摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第11-25页 |
1.1 抗菌肽 | 第11-12页 |
1.1.1 抗菌肽 | 第11页 |
1.1.2 我国抗生素的使用现状 | 第11-12页 |
1.2 抗菌肽的分类 | 第12-15页 |
1.2.1 根据抗菌肽来源分类 | 第12-14页 |
1.2.2 根据抗菌肽结构分类 | 第14-15页 |
1.3 抗菌肽的生物学功能 | 第15-16页 |
1.3.1 抗菌肽对细菌的作用 | 第15页 |
1.3.2 抗菌肽对病毒的作用 | 第15页 |
1.3.3 抗菌肽对真菌的作用 | 第15-16页 |
1.4 抗菌肽的杀菌机制 | 第16-17页 |
1.4.1 抑制细胞壁及蛋白质合成作用 | 第16页 |
1.4.2 抑制细胞呼吸作用 | 第16页 |
1.4.3 诱导细胞凋亡 | 第16-17页 |
1.4.4 激活免疫功能,刺激免疫因子 | 第17页 |
1.5 抗菌肽基因的克隆和表达研究 | 第17-18页 |
1.5.1 防御素 | 第17页 |
1.5.2 人工合成的抗菌肽基因的表达 | 第17-18页 |
1.6 昆虫的免疫系统研究概况 | 第18-20页 |
1.6.1 模式生物果蝇 | 第18-19页 |
1.6.2 果蝇模式生物做反应器的优点 | 第19-20页 |
1.7 酵母中的表达与分泌 | 第20-22页 |
1.7.2 甲醇营养型酵母的表达载体 | 第21页 |
1.7.3 外源基因在酵母中表达产物的分泌 | 第21-22页 |
1.8 抗菌肽基因工程的应用展望 | 第22-23页 |
1.8.1 医药领域中的应用 | 第22页 |
1.8.2 转基因领域中的应用 | 第22-23页 |
1.8.3 农业中的应用 | 第23页 |
1.8.4 畜牧业中的应用 | 第23页 |
1.9 本试验的研究目的 | 第23-25页 |
第2章 材料与方法 | 第25-38页 |
2.1 材料 | 第25-27页 |
2.1.1 果蝇、菌株与质粒 | 第25页 |
2.1.2 仪器 | 第25页 |
2.1.3 培养基 | 第25-26页 |
2.1.4 主要化学试剂 | 第26-27页 |
2.1.5 引物的设计与合成 | 第27页 |
2.2 方法 | 第27-38页 |
2.2.1 抗菌肽目的基因的克隆 | 第27-30页 |
2.2.2 酵母表达载体的构建 | 第30-33页 |
2.2.3 抗菌肽的表达 | 第33-35页 |
2.2.4 表达产物的检测 | 第35-36页 |
2.2.5 高表达防御素载体的构建 | 第36-38页 |
第3章 结果与分析 | 第38-47页 |
3.1 果蝇总DNA电泳图 | 第38-39页 |
3.2 果蝇RNA电泳图 | 第39-40页 |
3.3 重组酵母表达载体的构建 | 第40-41页 |
3.4 PCR电泳结果 | 第41页 |
3.5 氨基酸改造结果 | 第41-42页 |
3.6 双酶切 | 第42页 |
3.7 菌落PCR | 第42-43页 |
3.8 重组质粒线性化 | 第43页 |
3.9 表达产物的活性观察 | 第43-44页 |
3.10 defensin表达产物的检测 | 第44页 |
3.11 甲醇添加量对抑菌活性的影响 | 第44-45页 |
3.12 defensin表达产物的活性检测 | 第45-46页 |
3.13 杂交 | 第46-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
1 防御素的应用现状 | 第47页 |
2 防御素的改造结果及CG13422、Dro、Dpt以及MtK的抗性研究 | 第47-48页 |
3 可行性分析 | 第48-49页 |
4 果蝇防御素作为饲料添加剂和注射剂的有效利用探讨: | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54页 |