致谢 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-23页 |
1 细胞骨架概述 | 第9页 |
2 植物细胞微丝骨架 | 第9-12页 |
·微丝骨架概述 | 第9页 |
·微丝骨架的研究历程 | 第9-10页 |
·组成微丝的单体——肌动蛋白 | 第10页 |
·微丝的装配动态 | 第10-11页 |
·肌动蛋白结合蛋白 | 第11-12页 |
3 体细胞微丝骨架 | 第12-14页 |
·体细胞微丝骨架研究概况 | 第12-13页 |
·体细胞中微丝骨架的分布情况 | 第13-14页 |
4 微丝骨架功能 | 第14-15页 |
·微丝骨架与细胞运动 | 第14页 |
·微丝骨架与信号转导 | 第14-15页 |
5 微丝影响药物 | 第15页 |
6 微丝骨架研究进展 | 第15-16页 |
·微丝骨架结构研究进展 | 第15页 |
·微丝骨架结构动态变化研究进展 | 第15-16页 |
·微丝骨架功能研究进展 | 第16页 |
7 微丝骨架观察方法研究进展 | 第16-19页 |
·激光扫描共聚焦显微镜在荧光观察中的应用 | 第17页 |
·绿色荧光蛋白的应用 | 第17-19页 |
·GFP 的结构和功能 | 第17-18页 |
·GFP 在植物微丝骨架研究中的应用 | 第18-19页 |
·基因枪技术的原理 | 第19页 |
8 细胞骨架在植物细胞周期过程中的动态分布 | 第19-21页 |
·细胞分裂间期 | 第20页 |
·细胞有丝分裂期 | 第20-21页 |
9 体细胞胚胎发生与细胞骨架关系研究进展 | 第21页 |
10 本研究目的和意义 | 第21-23页 |
第二章 细胞学方法对微丝骨架观察 | 第23-37页 |
1 前言 | 第23页 |
2 实验材料 | 第23页 |
3 主要药品、试剂 | 第23页 |
4 培养基 | 第23-24页 |
5 仪器和设备 | 第24页 |
6 材料处理 | 第24-26页 |
·杂交鹅掌楸07255031 细胞系 | 第24-25页 |
·悬浮系的建立 | 第25页 |
·悬浮系同步化处理 | 第25页 |
·体积增长测定 | 第25页 |
·悬浮细胞微丝骨架荧光定位TRITC-phalloidin 标记的过程 | 第25-26页 |
7 结果 | 第26-33页 |
·培养时间与细胞体积增长数的关系 | 第26页 |
·染色处理条件优化 | 第26-30页 |
·胚性细胞与非胚性细胞微丝骨架观察 | 第30-31页 |
·悬浮培养过程中微丝骨架观察 | 第31-32页 |
·体细胞胚胎发生过程中微丝骨架观察 | 第32-33页 |
8 结论 | 第33-37页 |
第三章 遗传转化法 | 第37-51页 |
1 前言 | 第37页 |
2 实验材料 | 第37页 |
3 主要药品、试剂 | 第37页 |
4 培养基 | 第37页 |
5 仪器和设备 | 第37-38页 |
6 方法及实验步骤 | 第38-44页 |
·拟南芥RNA 提取 | 第38页 |
·RNA 反转录 | 第38-39页 |
·拟南芥ABD2 基因PCR | 第39-40页 |
·PCR 产物回收 | 第40页 |
·回收产物加尾 | 第40-41页 |
·连接到T 载体 | 第41页 |
·制备和转化感受态大肠杆菌 | 第41页 |
·转化 | 第41页 |
·单菌落鉴定 | 第41-42页 |
·菌液扩增 | 第42页 |
·质粒提取 | 第42-43页 |
·质粒酶切 | 第43页 |
·酶切后电泳检测回收 | 第43页 |
·连接 | 第43页 |
·轰击金粉的处理及微弹的制备 | 第43-44页 |
·基因枪轰击 | 第44页 |
·基因枪的使用 | 第44页 |
·轰击参数的设置 | 第44页 |
7 结果 | 第44-50页 |
·PCR 获得目的基因 | 第44-45页 |
·目的基因转T 载体后检测 | 第45页 |
·提取质粒酶切 | 第45-46页 |
·PBI 质粒与目的基因连接后检测 | 第46-47页 |
·PBI-ABD2-GFP 连接后检测 | 第47-48页 |
·载体构建图谱 | 第48页 |
·基因枪轰击结果 | 第48-50页 |
8 结论 | 第50-51页 |
第四章 讨论及展望 | 第51-52页 |
1 讨论 | 第51页 |
2 展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
详细摘要 | 第57-58页 |