| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩写和符号清单 | 第14-16页 |
| 文献综述 | 第16-24页 |
| 引言 | 第24-25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-35页 |
| 1.1 材料 | 第25-27页 |
| 1.1.1 试验动物 | 第25页 |
| 1.1.2 实验主要材料 | 第25-26页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第26-27页 |
| 1.2 试验方法 | 第27-35页 |
| 1.2.1 溶液配制 | 第27-28页 |
| 1.2.2 腺病毒构建 | 第28页 |
| 1.2.3 体内试验样品采集 | 第28-29页 |
| 1.2.4 原代肝细胞的分离培养 | 第29页 |
| 1.2.5 最佳添加浓度和时间 | 第29页 |
| 1.2.6 试验分组及处理 | 第29页 |
| 1.2.7 组织学的检测 | 第29-30页 |
| 1.2.8 血液、肝脏组织中生化指标检测 | 第30页 |
| 1.2.9 ELISA法检测氧化抗氧化指标及SIRT1酶活性 | 第30页 |
| 1.2.10 荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定SIRT1-SREBP-1c/PGC-1α信号通路关键因子mRNA的相对表达量 | 第30-32页 |
| 1.2.11 Westernblot法测定SIRT1-SREBP-1c/PGC-1α信号通路相关蛋白的表达 | 第32-34页 |
| 1.2.12 免疫荧光(IF)检测腺病毒转染过表达SIRT1基因的蛋白表达 | 第34页 |
| 1.2.13 数据统计分析 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-52页 |
| 2.1 脂肪肝奶牛血液、肝脏中脂代谢功能紊乱 | 第35-42页 |
| 2.1.1 围产期对照奶牛和脂肪肝奶牛肝脏组织学检测 | 第35页 |
| 2.1.2 围产期对照奶牛和脂肪肝奶牛血液生化指标变化 | 第35-36页 |
| 2.1.3 围产期对照奶牛和脂肪肝奶牛血清、肝脏氧化抗氧化指标变化 | 第36-38页 |
| 2.1.4 围产期对照奶牛和脂肪肝奶牛肝脏脂代谢指标变化 | 第38页 |
| 2.1.5 围产期对照奶牛和脂肪肝奶牛肝脏组织中SIRT1通路的变化 | 第38-42页 |
| 2.2 过表达SIRT1腺病毒对肝细胞脂代谢的影响 | 第42-52页 |
| 2.2.1 体外肝细胞形态学观察 | 第42-43页 |
| 2.2.2 添加OA高脂造模最佳浓度的筛选 | 第43页 |
| 2.2.3 过表达SIRT1腺病毒载体的成功构建的鉴定 | 第43页 |
| 2.2.4 腺病毒转染肝细胞最佳浓度的筛选 | 第43-45页 |
| 2.2.5 OA造模脂沉积对肝细胞SIRT1、脂代谢和氧化应激关键分子表达的影响 | 第45-46页 |
| 2.2.6 添加NEFAs对造模高脂肝细胞脂代谢和SIRT1通路的影响 | 第46-49页 |
| 2.2.7 转染过表达SIRT1腺病毒在氧化应激介导的奶牛肝细胞中脂质沉积的作用机制 | 第49-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 3.1 肝脂沉积对SIRT1、脂代谢和氧化应激关键分子表达和酶活的影响 | 第52-53页 |
| 3.2 氧化应激对SIRT1和脂代谢关键分子表达和酶活及肝脂沉积的影响 | 第53页 |
| 3.3 过表达奶牛肝细胞SIRT1对脂代谢和氧化应激关键分子表达和酶活的影响 | 第53-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
