致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
中英文缩写词 | 第15-16页 |
文献综述 | 第16-25页 |
引言 | 第25-27页 |
1 材料与方法 | 第27-35页 |
1.1 主要试验材料 | 第27-28页 |
1.2 主要仪器 | 第28页 |
1.3 猪小肠上皮细胞的培养与处理 | 第28-29页 |
1.3.1 细胞的传代 | 第28页 |
1.3.2 细胞的复苏与冻存 | 第28-29页 |
1.4 抑制剂的配制 | 第29页 |
1.5 试验分组 | 第29页 |
1.6 猪小肠上皮细胞的光镜和电镜形态学观察 | 第29-30页 |
1.7 细胞存活率检测 | 第30页 |
1.8 ELISA法检测炎性因子含量 | 第30页 |
1.9 Westernblotting法检测NF-κB信号通路相关蛋白表达 | 第30-31页 |
1.9.1 细胞总蛋白的提取 | 第30页 |
1.9.2 细胞总蛋白含量的测定 | 第30页 |
1.9.3 SDS电泳浓缩胶和分离胶的配制 | 第30-31页 |
1.9.4 WB | 第31页 |
1.10 Westernblotting法检测MAPKs信号通路相关蛋白表达 | 第31-32页 |
1.10.1 细胞总蛋白的提取 | 第31-32页 |
1.10.2 细胞总蛋白含量的测定 | 第32页 |
1.10.3 SDS电泳浓缩胶和分离胶的配制 | 第32页 |
1.10.4 WB | 第32页 |
1.11 qRT-PCR法测定NF-κB信号通路关键因子mRNA的相对表达量 | 第32-33页 |
1.11.1 引物设计与合成 | 第32页 |
1.11.2 细胞总RNA的提取 | 第32-33页 |
1.11.3 反转录合成cDNA | 第33页 |
1.11.4 实时荧光定量PCR | 第33页 |
1.12 qRT-PCR法测定MAPKs信号通路关键因子mRNA的相对表达量 | 第33-34页 |
1.12.1 引物设计与合成 | 第33-34页 |
1.12.2 细胞总RNA的提取 | 第34页 |
1.12.3 反转录合成cDNA | 第34页 |
1.12.4 实时荧光定量PCR | 第34页 |
1.13 数据处理 | 第34-35页 |
2 结果与分析 | 第35-53页 |
2.1 11S和7S对猪小肠上皮细胞形态学的影响 | 第35-38页 |
2.1.1 11S和7S对细胞生长状态的变化 | 第35-37页 |
2.1.2 11S和7S对细胞超微结构的变化 | 第37-38页 |
2.2 大豆抗原蛋白对猪小肠上皮细胞存活率的影响 | 第38-39页 |
2.2.1 11S对细胞存活率的影响 | 第38-39页 |
2.2.2 7S对细胞存活率的影响 | 第39页 |
2.3 11S和7S对细胞上清液中炎性因子及二胺氧化酶浓度变化的影响 | 第39-45页 |
2.3.1 11S和7S对细胞内5-HT含量的影响 | 第39-41页 |
2.3.2 11S和7S对细胞内NO含量的影响 | 第41-42页 |
2.3.3 11S和7S对细胞内IL-6含量的影响 | 第42-43页 |
2.3.4 11S和7S对细胞内IL-10含量的影响 | 第43-44页 |
2.3.5 11S和7S对细胞内DAO含量的影响 | 第44-45页 |
2.4 11S和7S对NF-κB信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响 | 第45-49页 |
2.4.1 11S对NF-κB信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响 | 第45-47页 |
2.4.2 7S对NF-κB信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响 | 第47-49页 |
2.5 11S和7S对MAPKs信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响 | 第49-53页 |
2.5.1 11S对MAPKs信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响 | 第49-50页 |
2.5.2 7S对MAPKs信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响 | 第50-53页 |
3 讨论 | 第53-58页 |
3.1 11S和7S对猪小肠上皮细胞形态学的影响 | 第53-54页 |
3.2 11S和7S对猪小肠上皮细胞存活率的影响 | 第54页 |
3.3 11S和7S对猪小肠上皮细胞上清液中炎性因子含量的影响 | 第54-55页 |
3.4 11S和7S对猪小肠上皮细胞NF-κB信号通路相关蛋白和基因表达量的影响 | 第55-56页 |
3.5 11S和7S对猪小肠上皮细胞MAPKs信号通路相关蛋白和基因表达量的影响 | 第56-57页 |
3.6 PDTC和L-NAME通路抑制剂对由大豆抗原蛋白诱导的IPEC-J2细胞NF-κB信号通路相关蛋白和基因表达量的影响 | 第57页 |
3.7 SP600125和SB202190通路抑制剂对由大豆抗原蛋白诱导的IPEC-J2细胞MAPKs信号通路相关蛋白和基因表达量的影响 | 第57-58页 |
4 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
附录 | 第67-85页 |
作者简介 | 第85-86页 |