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大豆抗原蛋白引起猪小肠上皮细胞损伤的机制研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
中英文缩写词第15-16页
文献综述第16-25页
引言第25-27页
1 材料与方法第27-35页
    1.1 主要试验材料第27-28页
    1.2 主要仪器第28页
    1.3 猪小肠上皮细胞的培养与处理第28-29页
        1.3.1 细胞的传代第28页
        1.3.2 细胞的复苏与冻存第28-29页
    1.4 抑制剂的配制第29页
    1.5 试验分组第29页
    1.6 猪小肠上皮细胞的光镜和电镜形态学观察第29-30页
    1.7 细胞存活率检测第30页
    1.8 ELISA法检测炎性因子含量第30页
    1.9 Westernblotting法检测NF-κB信号通路相关蛋白表达第30-31页
        1.9.1 细胞总蛋白的提取第30页
        1.9.2 细胞总蛋白含量的测定第30页
        1.9.3 SDS电泳浓缩胶和分离胶的配制第30-31页
        1.9.4 WB第31页
    1.10 Westernblotting法检测MAPKs信号通路相关蛋白表达第31-32页
        1.10.1 细胞总蛋白的提取第31-32页
        1.10.2 细胞总蛋白含量的测定第32页
        1.10.3 SDS电泳浓缩胶和分离胶的配制第32页
        1.10.4 WB第32页
    1.11 qRT-PCR法测定NF-κB信号通路关键因子mRNA的相对表达量第32-33页
        1.11.1 引物设计与合成第32页
        1.11.2 细胞总RNA的提取第32-33页
        1.11.3 反转录合成cDNA第33页
        1.11.4 实时荧光定量PCR第33页
    1.12 qRT-PCR法测定MAPKs信号通路关键因子mRNA的相对表达量第33-34页
        1.12.1 引物设计与合成第33-34页
        1.12.2 细胞总RNA的提取第34页
        1.12.3 反转录合成cDNA第34页
        1.12.4 实时荧光定量PCR第34页
    1.13 数据处理第34-35页
2 结果与分析第35-53页
    2.1 11S和7S对猪小肠上皮细胞形态学的影响第35-38页
        2.1.1 11S和7S对细胞生长状态的变化第35-37页
        2.1.2 11S和7S对细胞超微结构的变化第37-38页
    2.2 大豆抗原蛋白对猪小肠上皮细胞存活率的影响第38-39页
        2.2.1 11S对细胞存活率的影响第38-39页
        2.2.2 7S对细胞存活率的影响第39页
    2.3 11S和7S对细胞上清液中炎性因子及二胺氧化酶浓度变化的影响第39-45页
        2.3.1 11S和7S对细胞内5-HT含量的影响第39-41页
        2.3.2 11S和7S对细胞内NO含量的影响第41-42页
        2.3.3 11S和7S对细胞内IL-6含量的影响第42-43页
        2.3.4 11S和7S对细胞内IL-10含量的影响第43-44页
        2.3.5 11S和7S对细胞内DAO含量的影响第44-45页
    2.4 11S和7S对NF-κB信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响第45-49页
        2.4.1 11S对NF-κB信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响第45-47页
        2.4.2 7S对NF-κB信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响第47-49页
    2.5 11S和7S对MAPKs信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响第49-53页
        2.5.1 11S对MAPKs信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响第49-50页
        2.5.2 7S对MAPKs信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响第50-53页
3 讨论第53-58页
    3.1 11S和7S对猪小肠上皮细胞形态学的影响第53-54页
    3.2 11S和7S对猪小肠上皮细胞存活率的影响第54页
    3.3 11S和7S对猪小肠上皮细胞上清液中炎性因子含量的影响第54-55页
    3.4 11S和7S对猪小肠上皮细胞NF-κB信号通路相关蛋白和基因表达量的影响第55-56页
    3.5 11S和7S对猪小肠上皮细胞MAPKs信号通路相关蛋白和基因表达量的影响第56-57页
    3.6 PDTC和L-NAME通路抑制剂对由大豆抗原蛋白诱导的IPEC-J2细胞NF-κB信号通路相关蛋白和基因表达量的影响第57页
    3.7 SP600125和SB202190通路抑制剂对由大豆抗原蛋白诱导的IPEC-J2细胞MAPKs信号通路相关蛋白和基因表达量的影响第57-58页
4 结论第58-59页
参考文献第59-67页
附录第67-85页
作者简介第85-86页

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