| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第9-17页 |
| 一、骨骼肌成体干细胞 | 第9-11页 |
| 1.1 骨骼肌成体干细胞的发现 | 第9页 |
| 1.2 骨骼肌成体干细胞的标记基因 | 第9-10页 |
| 1.3 骨骼肌成体干细胞的起源 | 第10-11页 |
| 二、骨骼肌的分泌功能 | 第11-13页 |
| 2.1 骨骼肌以内分泌形式对其他器官的调控 | 第11-12页 |
| 2.2 骨骼肌以自分泌/旁分泌形式对自身和骨骼肌干细胞的调控 | 第12-13页 |
| 三、骨骼肌与外泌体 | 第13-15页 |
| 3.1 外泌体概述 | 第13-14页 |
| 3.2 外泌体以内分泌形式介导组织与组织间的物质和信息交流 | 第14页 |
| 3.3 外泌体以自分泌/旁分泌形式调控自身和邻近细胞的功能 | 第14-15页 |
| 3.4 外泌体在骨骼肌中研究现状 | 第15页 |
| 四、骨骼肌纤维作为骨骼肌干细胞的微环境调控其功能 | 第15-16页 |
| 4.1 骨骼肌纤维的类型 | 第15-16页 |
| 4.2 骨骼肌纤维对骨骼肌干细胞的调控 | 第16页 |
| 五、本文的科学问题及研究内容 | 第16-17页 |
| 材料与方法 | 第17-32页 |
| 一、实验材料 | 第17-22页 |
| 1.1 实验动物 | 第17页 |
| 1.2 细胞 | 第17页 |
| 1.3 主要仪器及设备 | 第17-18页 |
| 1.4 引物 | 第18-19页 |
| 1.5 主要试剂 | 第19-22页 |
| 二、实验方法 | 第22-32页 |
| 2.1 组织(细胞)总RNA的提取 | 第22页 |
| 2.2 Oligo引物的反转录体系 | 第22-23页 |
| 2.3 PCR反应 | 第23页 |
| 2.4 组织(细胞)总蛋白提取 | 第23-24页 |
| 2.5 Western blot | 第24-26页 |
| 2.6 细胞培养 | 第26-27页 |
| 2.7 免疫荧光检测 | 第27-28页 |
| 2.8 利用流式分选技术分离骨骼肌干细胞 | 第28页 |
| 2.9 鼠跑步实验 | 第28-29页 |
| 2.10 CCK-8检测细胞增殖 | 第29页 |
| 2.11 条件培养基(conditional medium,CM)的制备 | 第29页 |
| 2.12 外泌体的分离和鉴定 | 第29-30页 |
| 2.13 代谢组学 | 第30页 |
| 2.14 KEGG代谢通路注释 | 第30页 |
| 2.15 差异候选代谢物的聚类和可视化分析 | 第30-31页 |
| 2.16 RNA-seq测序 | 第31-32页 |
| 实验结果 | 第32-49页 |
| 一、利用RNA-seq和分泌蛋白数据库系统鉴定不同代谢类型肌群差异的分泌因子 | 第32-40页 |
| 1.1 采用RNA-seq技术系统分析不同代谢类型肌群的基因表达谱差异 | 第32-33页 |
| 1.2 GO和KEGG分析表明TA和Sol肌群具有显著差异的代谢通路 | 第33-36页 |
| 1.3 RNA-seq与分泌蛋白数据库联合分析鉴定(TA和Sol)差异的分泌因子 | 第36-37页 |
| 1.4 通过几个代谢模型验证TA和Sol差异的分泌因子是受骨骼肌代谢调控的 | 第37-40页 |
| 二、采用代谢组学系统展示不同代谢类型肌群差异分泌的代谢小分子 | 第40-43页 |
| 2.1 TA和Sol骨骼肌组织条件培养基制备 | 第40页 |
| 2.2 TA和Sol骨骼肌组织条件培养基的代谢组学分析及其差异代谢小分子 | 第40-41页 |
| 2.3 代谢组学与RNA-seq数据联合分析表明代谢小分子差异存在的原因 | 第41-43页 |
| 三、骨骼肌代谢调控的分泌因子(生长因子和代谢小分子)是否由外泌体介导分泌及其对骨骼肌干细胞的调控功能研究 | 第43-49页 |
| 3.1 不同代谢类型肌群来源的条件培养基差异调控骨骼肌干细胞增殖与分化 | 第43-44页 |
| 3.2 骨骼肌组织来源的外泌体的分离鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3 骨骼肌来源的外泌体差异调控骨骼肌干细胞增殖与分化 | 第45-46页 |
| 3.4 通过蛋白质谱和代谢组学鉴定不同代谢类型肌群的外泌体成分 | 第46-49页 |
| 讨论 | 第49-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简历 | 第59-61页 |
