| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| 1.1 小麦茎基腐病及假禾谷镰刀菌 | 第9-12页 |
| 1.1.1 小麦茎基腐病及其病原菌 | 第9-10页 |
| 1.1.2 发生危害 | 第10-11页 |
| 1.1.3 防治方法 | 第11-12页 |
| 1.1.4 假禾谷镰刀菌致病的分子机制研究 | 第12页 |
| 1.2 蛋白糖基化修饰的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 蛋白糖基化的研究意义 | 第12-13页 |
| 1.2.2 蛋白糖基化类型 | 第13-14页 |
| 1.2.3 蛋白N-糖基化修饰在酿酒酵母(Scerevisiaecerevisiae)中的研究进展 | 第14页 |
| 1.2.4 蛋白N-糖基化修饰在拟南芥(Arabidopsisthaliana)中的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.5 蛋白N-糖基化修饰在植物病原真菌中的研究进展 | 第15页 |
| 1.3 基因功能的研究方法 | 第15-18页 |
| 1.3.1 生物信息学分析 | 第16页 |
| 1.3.2 基因功能验证 | 第16-17页 |
| 1.3.3 转录组分析 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第20-25页 |
| 3.1.1 供试菌株 | 第20页 |
| 3.1.2 供试植物 | 第20页 |
| 3.1.3 供试载体 | 第20-21页 |
| 3.1.4 供试引物 | 第21-22页 |
| 3.1.5 实验中用到的培养基配方 | 第22页 |
| 3.1.6 实验中用到的试剂配方 | 第22-24页 |
| 3.1.7 实验中用到的仪器 | 第24页 |
| 3.1.8 实验中用到的生物学分析工具 | 第24-25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-36页 |
| 3.2.1 假禾谷镰刀菌的保存和活化 | 第25页 |
| 3.2.2 用CTAB法提取假禾谷镰刀菌的基因组DNA | 第25-26页 |
| 3.2.3 DNA浓缩 | 第26页 |
| 3.2.4 目的基因序列的获取 | 第26页 |
| 3.2.5 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| 3.2.6 PCR产物纯化 | 第26页 |
| 3.2.7 胶回收 | 第26-27页 |
| 3.2.8 TA克隆 | 第27-28页 |
| 3.2.9 质粒的提取 | 第28页 |
| 3.2.10 假禾谷镰刀菌FpALG3基因同源重组序列的构建 | 第28-30页 |
| 3.2.11 PEG介导的假禾谷镰刀菌的原生质体转化 | 第30-31页 |
| 3.2.12 FpALG3基因的敲除转化子验证 | 第31-32页 |
| 3.2.13 假禾谷镰刀菌FpALG3基因回补载体的构建以及回补转化子的验证 | 第32-33页 |
| 3.2.14 FpALG3基因突变体生长性状测定 | 第33-34页 |
| 3.2.15 FpALG3基因突变体致病性检测 | 第34-36页 |
| 4 结果与分析 | 第36-47页 |
| 4.1 FpALG3基因的同源性分析 | 第36-38页 |
| 4.1.1 FpALG3基因序列及其编码的氨基酸序列的获取 | 第36-37页 |
| 4.1.2 FpALG3基因编码的氨基酸序列同源性比对分析 | 第37-38页 |
| 4.1.3 FpALG3基因转录组数据分析 | 第38页 |
| 4.2 FpALG3基因的同源重组序列的构建和验证 | 第38-39页 |
| 4.3 FpALG3基因敲除转化子的验证 | 第39-40页 |
| 4.3.1 PCR验证 | 第39-40页 |
| 4.3.2 Southernblot验证 | 第40页 |
| 4.4 FpALG3基因回补转化子的PCR检测 | 第40-43页 |
| 4.4.1 FpALG3基因回补载体的构建 | 第40-41页 |
| 4.4.2 FpALG3基因回补转化子的验证和PCR检测 | 第41-42页 |
| 4.4.3 cfpalg3回补突变体的荧光检测 | 第42-43页 |
| 4.5 Δfpalg3敲除突变体的生长性状和致病力检测 | 第43-47页 |
| 4.5.1 Δfpalg3敲除突变体菌落形态观察和生长速率的测定 | 第43页 |
| 4.5.2 Δfpalg3敲除突变体的产孢量下降 | 第43-44页 |
| 4.5.3 Δfpalg3敲除突变体的菌丝能够形成更多分叉 | 第44页 |
| 4.5.4 Δfpalg3敲除突变体在大麦叶片上形成更小的病斑 | 第44-45页 |
| 4.5.5 Δfpalg3敲除突变体接种小麦胚芽鞘的致病性基本丧失 | 第45页 |
| 4.5.6 Δfpalg3敲除突变体接种小麦茎基部的致病性明显下降 | 第45-47页 |
| 5 结论与讨论 | 第47-50页 |
| 5.1 结论 | 第47页 |
| 5.2 讨论 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| Abstract | 第58-59页 |
