| 致谢 | 第4-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-22页 |
| 1.1 花生概述 | 第13页 |
| 1.2 花生茎腐病研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 花生茎腐病的发生与危害 | 第13-14页 |
| 1.2.2 花生茎腐病病原菌及其分类地位 | 第14-15页 |
| 1.3 花生茎腐病综合防治 | 第15-16页 |
| 1.3.1 农业防治 | 第15页 |
| 1.3.2 化学防治 | 第15-16页 |
| 1.3.3 生物防治 | 第16页 |
| 1.4 抗逆相关转录因子研究进展 | 第16-18页 |
| 1.4.1 转录因子简介 | 第16-17页 |
| 1.4.2 AP2/ERF转录因子 | 第17-18页 |
| 1.4.3 ERF亚族转录因子的调控机制 | 第18页 |
| 1.4.4 ERF亚族转录因子在非生物胁迫中的作用 | 第18页 |
| 1.5 实时荧光定量PCR | 第18-21页 |
| 1.5.1 实时荧光定量PCR原理 | 第18-19页 |
| 1.5.2 实时荧光定量PCR标记技术分类 | 第19页 |
| 1.5.3 实时荧光定量PCR的应用 | 第19页 |
| 1.5.4 植物中的内参基因 | 第19-21页 |
| 1.6 技术路线 | 第21-22页 |
| 2 引言 | 第22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-37页 |
| 3.1 花生茎腐病病原菌的分离鉴定 | 第22-25页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第23-25页 |
| 3.1.2.1 培养基的配制 | 第23页 |
| 3.1.2.2 试剂的配制 | 第23页 |
| 3.1.2.3 病原菌的分离纯化 | 第23-24页 |
| 3.1.2.4 病原菌鉴定 | 第24页 |
| 3.1.2.5 PCR产物检测 | 第24-25页 |
| 3.1.2.6 基于ITS序列构建系统发育树 | 第25页 |
| 3.1.2.7 病原菌的致病性测定 | 第25页 |
| 3.1.2.8 病原菌的保存 | 第25页 |
| 3.2 病原菌的生物学特性 | 第25-26页 |
| 3.2.1 材料 | 第25页 |
| 3.2.2 试验方法 | 第25-26页 |
| 3.2.2.1 不同培养基对菌丝生长的影响 | 第25-26页 |
| 3.2.2.2 不同pH值对菌丝生长的影响 | 第26页 |
| 3.2.2.3 菌丝的致死温度 | 第26页 |
| 3.3 室内杀菌剂筛选和抗性种质筛选 | 第26-29页 |
| 3.3.1 材料 | 第26页 |
| 3.3.2 试剂和仪器 | 第26页 |
| 3.3.3 试验方法 | 第26-29页 |
| 3.3.3.1 杀菌剂配制 | 第26-27页 |
| 3.3.3.2 不同浓纳米氧化锌对病原菌生长速率的影响 | 第27页 |
| 3.3.3.3 不同杀菌剂对病原菌生长速率的影响 | 第27页 |
| 3.3.3.4 抗病种质筛选品系的农艺性状调查 | 第27页 |
| 3.3.3.5 花生种子的萌发 | 第27-28页 |
| 3.3.3.6 室内病原菌的培养及接种 | 第28页 |
| 3.3.3.7 调查方法和抗性评价 | 第28-29页 |
| 3.4 AP/ERF转录因子家族基因的生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 3.4.1 数据来源 | 第29页 |
| 3.4.2 序列分析及进化树的构建 | 第29页 |
| 3.4.3 生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 3.4.4 染色体物理分布 | 第30页 |
| 3.4.5 ERF亚族转录因子基因的选择 | 第30页 |
| 3.5 AhERF基因扩增 | 第30-33页 |
| 3.5.1 材料 | 第30页 |
| 3.5.2 所用试剂及仪器 | 第30页 |
| 3.5.3 主要试剂的配制 | 第30-31页 |
| 3.5.4 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.5.4.1 花生基因组DNA提取及引物设计 | 第31-32页 |
| 3.5.4.2 目的片段PCR扩增 | 第32页 |
| 3.5.4.3 PCR产物回收 | 第32-33页 |
| 3.5.4.4 连接反应 | 第33页 |
| 3.5.4.5 目的基因的转化 | 第33页 |
| 3.5.4.6 阳性克隆的筛选及测序 | 第33页 |
| 3.6 AhERF基因的表达 | 第33-37页 |
| 3.6.1 材料 | 第33页 |
| 3.6.2 试验方法 | 第33-37页 |
| 3.6.2.1 花生材料的种植及病原菌的接种 | 第33-34页 |
| 3.6.2.2 样品的采集 | 第34页 |
| 3.6.2.3 RNA的提取 | 第34页 |
| 3.6.2.4 RNA质量检测 | 第34页 |
| 3.6.2.5 cDNA第一链合成 | 第34-35页 |
| 3.6.2.6 实时荧光定量PCR引物设计 | 第35-36页 |
| 3.6.2.7 多个引物的扩增 | 第36页 |
| 3.6.2.8 荧光定量PCR检测 | 第36-37页 |
| 4 结果分析 | 第37-64页 |
| 4.1 病原菌的分离鉴定 | 第37-39页 |
| 4.1.1 病原菌的形态观察 | 第37页 |
| 4.1.2 ITS鉴定 | 第37-39页 |
| 4.1.2.1 PCR产物检测 | 第37-38页 |
| 4.1.2.2 供试菌株和其相近属种ITS序列分析 | 第38-39页 |
| 4.1.3 病原菌的致病性 | 第39页 |
| 4.2 病原菌的生物学特性 | 第39-41页 |
| 4.2.1 不同培养基对菌丝生长的影响 | 第39-40页 |
| 4.2.2 不同pH值对菌丝生长的影响 | 第40-41页 |
| 4.2.3 菌丝的致死温度 | 第41页 |
| 4.3 不同浓度纳米氧化锌对病原菌生长速率的影响 | 第41-43页 |
| 4.3.1 滤纸片法 | 第41-42页 |
| 4.3.2 涂布平板法 | 第42-43页 |
| 4.4 不同杀菌剂对病原菌生长速率的影响 | 第43-44页 |
| 4.5 花生主要新品系农艺性状分析 | 第44-45页 |
| 4.6 抗性种质筛选 | 第45-47页 |
| 4.7 花生AP2/ERF转录因子家族基因的生物信息学分析 | 第47-57页 |
| 4.7.1 花生AP2/ERF转录因子家族基因分类 | 第47-48页 |
| 4.7.2 花生AP2/ERF转录因子家族基因系统发育树 | 第48-50页 |
| 4.7.3 花生AP2/ERF转录因子家族基因保守域分析 | 第50-53页 |
| 4.7.4 花生AP2/ERF转录因子家族蛋白质理化性质分析 | 第53-56页 |
| 4.7.5 花生ERF亚族基因在染色体上的物理定位 | 第56页 |
| 4.7.6 ERF亚族基因的筛选 | 第56-57页 |
| 4.8 AhERF基因扩增 | 第57-61页 |
| 4.8.1 AhERF基因PCR扩增 | 第57页 |
| 4.8.2 阳性克隆的PCR检测 | 第57-58页 |
| 4.8.3 测序结果与原序列比对 | 第58-61页 |
| 4.9 AhERF基因在抗、感病品种根部的表达 | 第61-64页 |
| 4.9.1 RNA提取质量检测 | 第61-62页 |
| 4.9.2 多个引物的扩增 | 第62页 |
| 4.9.3 AhERF基因在花生抗、感品种根部的表达分析 | 第62-64页 |
| 5 结论与讨论 | 第64-68页 |
| 5.1 花生茎腐病病原菌鉴定 | 第64页 |
| 5.2 花生茎腐病病原菌棉色二孢(Diplodiagossypina)的生物学特性 | 第64-65页 |
| 5.3 多种杀菌剂剂对花生茎腐病病原菌生长速率的影响 | 第65页 |
| 5.4 花生种质资源在室内的抗性差异分析 | 第65页 |
| 5.5 AP2/ERF转录因子家族基因的生物信息学分析 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| ABSTRACT | 第75-77页 |
