摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-19页 |
1.1 藻胆体和藻胆蛋白 | 第12-13页 |
1.2 藻胆色素 | 第13-14页 |
1.3 荧光蛋白及其应用 | 第14-15页 |
1.4 远红光光适应及其应用 | 第15-16页 |
1.5 裂合酶 | 第16-17页 |
1.6 本课题研究意义 | 第17-19页 |
2 APC基因在CpcS酶催化下的光谱特性研究 | 第19-37页 |
2.1 引言 | 第19-20页 |
2.2 材料与仪器 | 第20-22页 |
2.2.1 菌株与质粒 | 第20页 |
2.2.2 培养基与试剂 | 第20-22页 |
2.2.3 主要实验仪器 | 第22页 |
2.3 实验方法 | 第22-30页 |
2.3.1 表达载体的构建 | 第22-28页 |
2.3.2 蛋白与色素重组 | 第28页 |
2.3.3 蛋白与色素表达 | 第28-29页 |
2.3.4 细胞破碎与蛋白提纯 | 第29页 |
2.3.5 紫外可见光谱及荧光光谱测定 | 第29-30页 |
2.3.6 圆二色光谱测定 | 第30页 |
2.4 结果与分析 | 第30-36页 |
2.4.1 质粒构建检测图 | 第30-32页 |
2.4.2 裂合酶催化活性比较 | 第32页 |
2.4.3 蛋白、细胞悬液光谱测定 | 第32-36页 |
2.5 结果讨论 | 第36-37页 |
3 ApcA2-ApcB2突变藻的构建和特性研究 | 第37-51页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 实验材料和仪器 | 第37-39页 |
3.2.1 主要材料 | 第37-38页 |
3.2.2 主要试剂 | 第38-39页 |
3.2.3 主要仪器 | 第39页 |
3.3 实验方法 | 第39-45页 |
3.3.1 突变藻质粒的构建 | 第39-42页 |
3.3.2 藻种的纯化 | 第42-43页 |
3.3.3 突变体的筛选 | 第43页 |
3.3.4 藻细胞的培养 | 第43-44页 |
3.3.5 目的蛋白的纯化 | 第44页 |
3.3.6 生长曲线的测定 | 第44页 |
3.3.7 叶绿素a含量的测定 | 第44-45页 |
3.3.8 藻蓝蛋白CPC含量的测定 | 第45页 |
3.3.9 藻细胞吸收光谱与荧光光谱分析 | 第45页 |
3.4 结果与分析 | 第45-49页 |
3.4.1 突变体藻转化载体的构建 | 第45-46页 |
3.4.2 突变体藻种的构建和检测 | 第46-47页 |
3.4.3 突变体藻种内蛋白提取和光谱检测 | 第47-48页 |
3.4.4 突变体藻种生长曲线的测定 | 第48-49页 |
3.4.5 突变藻与WT内含物的差异 | 第49页 |
3.5 结果讨论 | 第49-51页 |
4 外源蛋白在烟草中的瞬时和稳态表达及生理特性研究 | 第51-63页 |
4.1 引言 | 第51页 |
4.2 材料与仪器 | 第51-53页 |
4.2.1 菌株与质粒 | 第51页 |
4.2.2 培养基与试剂 | 第51-53页 |
4.2.3 主要实验仪器 | 第53页 |
4.3 实验方法 | 第53-58页 |
4.3.1 蛋白融合体的构建 | 第53-54页 |
4.3.2 蛋白与色素BV重组 | 第54页 |
4.3.3 蛋白的表达与纯化 | 第54-55页 |
4.3.4 细胞破碎与蛋白提纯 | 第55页 |
4.3.5 紫外可见光谱及荧光光谱测定 | 第55页 |
4.3.6 烟草瞬时表达载体的构建 | 第55页 |
4.3.7 农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第55-56页 |
4.3.8 农杆菌侵染烟草瞬时表达 | 第56页 |
4.3.9 农杆菌侵染烟草瞬时表达的生理数据测定 | 第56页 |
4.3.10 农杆菌侵染烟草稳定表达 | 第56-58页 |
4.4 结果与分析 | 第58-62页 |
4.4.1 FRET效应最佳Linker选择 | 第58-60页 |
4.4.2 烟草表达载体的构建 | 第60-61页 |
4.4.3 光状态转换测定 | 第61页 |
4.4.4 快速光响应测定 | 第61-62页 |
4.5 结果讨论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-73页 |
附录 1 攻读学位期间发表的学术论文 | 第73-74页 |
SCI论文 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |