中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第11-29页 |
1.1 大黄鱼主要寄生虫病介绍 | 第11-13页 |
1.2 眼点淀粉卵甲藻病研究概况 | 第13-19页 |
1.2.1 眼点淀粉卵甲藻的命名和分类地位的确定 | 第13-17页 |
1.2.2 眼点淀粉卵甲藻的分布 | 第17页 |
1.2.3 眼点淀粉卵甲藻的生活史 | 第17-18页 |
1.2.4 眼点淀粉卵甲藻对海水鱼的危害 | 第18-19页 |
1.3 刺激隐核虫研究概况 | 第19-24页 |
1.3.1 刺激隐核虫命名和分类地位 | 第19-21页 |
1.3.2 刺激隐核虫的分布 | 第21页 |
1.3.3 刺激隐核虫的生活史 | 第21-23页 |
1.3.4 刺激隐核虫对海水鱼的危害 | 第23-24页 |
1.3.5 刺激隐核虫的检测 | 第24页 |
1.4 基于核糖体序列的鱼类寄生虫分类学研究进展 | 第24-27页 |
1.5 本研究的的内容和意义 | 第27-29页 |
第二章 眼点淀粉卵甲藻培养和生活史观察 | 第29-53页 |
2.1 材料 | 第29页 |
2.2 方法 | 第29-33页 |
2.2.1 眼点淀粉卵甲藻的采集 | 第29页 |
2.2.2 眼点淀粉卵甲藻胞囊发育的观察 | 第29-31页 |
2.2.3 眼点淀粉卵甲藻涡孢子观察 | 第31-33页 |
2.2.4 眼点淀粉卵甲藻营养体的离体保存 | 第33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-49页 |
2.3.1 眼点淀粉卵甲藻的获取 | 第33-35页 |
2.3.2 眼点淀粉卵甲藻胞囊的观察 | 第35-40页 |
2.3.3 眼点淀粉卵甲藻涡孢子观察结果 | 第40-46页 |
2.3.4 眼点淀粉卵甲藻短期保存效果 | 第46-49页 |
2.4 讨论 | 第49-53页 |
第三章 眼点淀粉卵甲藻对大黄鱼的感染力测定 | 第53-67页 |
3.1 材料 | 第53页 |
3.2 方法 | 第53-56页 |
3.2.1 三种体重大黄鱼鳃部成熟胞囊大小的测定 | 第53页 |
3.2.2 培养眼点淀粉卵甲藻过程中,投放涡孢子数量的优化 | 第53-54页 |
3.2.3 眼点淀粉卵甲藻致死量的测定 | 第54-55页 |
3.2.4 眼点淀粉卵甲藻涡孢子感染大黄鱼并发育成胞囊比例估测 | 第55页 |
3.2.5 涡孢子半数致死量测定 | 第55-56页 |
3.3 结果 | 第56-63页 |
3.3.1 鳃部成熟胞囊大小的测定情况 | 第56页 |
3.3.2 眼点淀粉卵甲藻培养条件的优化 | 第56-58页 |
3.3.3 眼点淀粉卵甲藻致死量的测定 | 第58-59页 |
3.3.4 眼点淀粉卵甲藻涡孢子成功感染大黄鱼并发育成胞囊的比例估测 | 第59-61页 |
3.3.5 涡孢子对大黄鱼的半数致死量 | 第61-63页 |
3.4 讨论 | 第63-67页 |
第四章 眼点淀粉卵甲藻核糖体序列的拼接和序列分析 | 第67-89页 |
4.1 材料 | 第67-68页 |
4.1.1 虫株来源和实验动物 | 第67页 |
4.1.2 主要试剂与仪器 | 第67-68页 |
4.2 方法 | 第68-74页 |
4.2.1 ND1410拼接所用引物 | 第68页 |
4.2.2 眼点淀粉卵甲藻的采集 | 第68页 |
4.2.3 眼点淀粉卵甲藻RNA的提取 | 第68-69页 |
4.2.4 眼点淀粉卵甲藻DNA提取 | 第69-70页 |
4.2.5 28S基因片段序列的扩增 | 第70页 |
4.2.6 18S序列PCR扩增、克隆及测序分析 | 第70-71页 |
4.2.7 ITS序列PCR扩增、克隆及测序分析 | 第71页 |
4.2.8 28S序列PCR扩增、克隆、验证及测序分析 | 第71-72页 |
4.2.9 28S序列的验证 | 第72页 |
4.2.10 眼点淀粉卵甲藻ND1412株部分18S、28S基因片段两翼的拼接 | 第72-74页 |
4.3 结果 | 第74-86页 |
4.3.1 18S基因片段序列测序分析 | 第74-77页 |
4.3.2 ITS序列测序分析 | 第77-78页 |
4.3.3 28S基因片段序列测序分析 | 第78-81页 |
4.3.4 完整眼点淀粉卵甲藻完整18S、28S拼接结果 | 第81-83页 |
4.3.5 眼点淀粉卵甲藻18S序列分析 | 第83-85页 |
4.3.6 眼点淀粉卵甲藻28S序列分析 | 第85-86页 |
4.4 讨论 | 第86-89页 |
第五章 眼点淀粉卵甲藻PCR检测方法的建立 | 第89-99页 |
5.1 材料 | 第89-90页 |
5.1.1 虫株来源和实验动物 | 第89页 |
5.1.2 主要试剂与仪器 | 第89-90页 |
5.2 方法 | 第90-92页 |
5.2.1 检测过程中所用引物 | 第90页 |
5.2.2 眼点淀粉卵甲藻的检测 | 第90-91页 |
5.2.3 3种引物物种特异性分析 | 第91-92页 |
5.3 结果 | 第92-98页 |
5.3.1 眼点淀粉卵甲藻的检测结果 | 第92-97页 |
5.3.2 引物物种特异性情况 | 第97-98页 |
5.4 讨论 | 第98-99页 |
第六章 刺激隐核虫核糖体序列的拼接和序列分析 | 第99-123页 |
6.1 材料与方法 | 第99-104页 |
6.1.1 虫株来源 | 第99页 |
6.1.2 主要试剂 | 第99-100页 |
6.1.3 实验所用引物 | 第100-101页 |
6.1.4 刺激隐核虫生活史的观察 | 第101页 |
6.1.5 刺激隐核虫的传代培养 | 第101页 |
6.1.6 刺激隐核虫采集与核酸的提取 | 第101-102页 |
6.1.7 rDNA基因序列的扩增 | 第102页 |
6.1.8 RNA的提取28S基因小片段序列的获取 | 第102页 |
6.1.9 28S部分序列PCR扩增及测序 | 第102-103页 |
6.1.10 18S部分序列PCR扩增及测序 | 第103页 |
6.1.11 ITS1/5.8S/ITS2序列PCR扩增及测序 | 第103-104页 |
6.1.12 ISG序列PCR扩增 | 第104页 |
6.1.13 四株虫株部分ISG区域扩增 | 第104页 |
6.2 结果 | 第104-119页 |
6.2.1 刺激隐核虫采集及生活史观察、传代 | 第104-106页 |
6.2.2 18S基因片段序列测序分析 | 第106页 |
6.2.3 28S基因片段序列测序分析 | 第106-108页 |
6.2.4 18S/ITS1/5. 8S/ITS2/28S序列PCR扩增及测序 | 第108页 |
6.2.5 28S/IGS/18S序列PCR扩增及测序 | 第108-109页 |
6.2.6 ND1410株 18S基因序列分析 | 第109-114页 |
6.2.7 ND1410株 ITS1/5.8S/ITS2基因序列分析 | 第114页 |
6.2.8 ND1410株28S基因序列分析 | 第114-119页 |
6.2.9 四株虫株亲缘关系分析 | 第119页 |
6.3 讨论 | 第119-123页 |
第七章 刺激隐核虫虫检测方法的建立 | 第123-131页 |
7.1 材料与方法 | 第123-126页 |
7.1.1 虫株来源和实验动物 | 第123页 |
7.1.2 主要试剂与仪器 | 第123-124页 |
7.1.3 实验所用引物 | 第124页 |
7.1.4 特异性引物的设计 | 第124-125页 |
7.1.5 PCR检测 | 第125-126页 |
7.2 结果 | 第126-129页 |
7.2.1 4个刺激隐核虫虫株的检测结果 | 第126页 |
7.2.2 PCR检测灵敏度测定结果 | 第126-129页 |
7.2.3 PCR检测特异性测定结果 | 第129页 |
7.3 讨论 | 第129-131页 |
全文总结 | 第131-132页 |
附录 | 第132-136页 |
参考文献 | 第136-142页 |
致谢 | 第142页 |