| 摘要 | 第9-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 缩略语表 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-38页 |
| 1 前言 | 第18-19页 |
| 2 妊娠期肥胖的影响 | 第19-20页 |
| 2.1 对人类健康的影响 | 第19-20页 |
| 2.2 对动物生产的影响 | 第20页 |
| 3 脂肪组织的发育及其调控 | 第20-24页 |
| 3.1 脂肪组织发育的基本过程 | 第21-22页 |
| 3.2 脂肪分化的分子调控 | 第22-23页 |
| 3.3 核心转录因子PPARγ | 第23-24页 |
| 4 妊娠期脂质代谢对胎盘功能及胎儿发育的影响 | 第24-28页 |
| 4.1 胎盘的脂质代谢特点 | 第24-26页 |
| 4.1.1 胎盘脂质代谢的必要性 | 第24-25页 |
| 4.1.2 胎盘脂质代谢模式 | 第25-26页 |
| 4.2 妊娠期肥胖对胎盘功能及胎儿发育的影响 | 第26-28页 |
| 4.2.1 妊娠肥胖影响胎盘正常功能 | 第26-27页 |
| 4.2.2 脂肪酸核受体PPARγ参与调节胎盘发育 | 第27-28页 |
| 4.2.3 妊娠期肥胖对胎儿发育的影响 | 第28页 |
| 5 长链脂肪酸受体GPR120的结构及功能 | 第28-34页 |
| 5.1 GPR120的结构和表达谱 | 第29-30页 |
| 5.1.1 GPR120的结构和经典信号 | 第29页 |
| 5.1.2 GPR120的组织表达 | 第29-30页 |
| 5.2 GPR120在脂肪组织中的葡萄糖摄取与能量代谢作用 | 第30-32页 |
| 5.3 GPR120的配基及下游信号通路 | 第32-33页 |
| 5.3.1 GPR120的配基及下游可能信号通路在脂肪分化中的作用 | 第32页 |
| 5.3.2 膜受体GPR120与核受体PPARγ的关系 | 第32-33页 |
| 5.4 GPR120对胎盘发育的影响 | 第33-34页 |
| 6 基因的表观转录组学调控：RNAm~6A修饰及相关生物学功能 | 第34-36页 |
| 6.1 RNAm~6A发现与分布特点 | 第34-35页 |
| 6.2 RNAm~6A书写、擦除与识别 | 第35页 |
| 6.3 mRNAm~6A甲基化修饰参与的生物学事件 | 第35-36页 |
| 7 存在的问题与研究的目的意义 | 第36-38页 |
| 第二章 母猪妊娠期肥胖对胎盘发育的影响及其机制研究 | 第38-59页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 材料和方法 | 第39-47页 |
| 2.1 试验动物分组与饲养管理 | 第39页 |
| 2.2 数据采集及方法 | 第39-40页 |
| 2.2.1 背膘厚度测定的方法 | 第39-40页 |
| 2.2.2 繁殖性能统计 | 第40页 |
| 2.3 胎盘样品的采集 | 第40页 |
| 2.4 胎盘血管密度分析 | 第40页 |
| 2.5 RNA抽提、反转录及实时荧光定量PCR | 第40-41页 |
| 2.5.1 总RNA抽提及反转录 | 第40-41页 |
| 2.5.2 实时荧光定量PCR(Real-timequantitativePCR,QPCR) | 第41页 |
| 2.6 Westernblot检测组织中蛋白表达 | 第41-43页 |
| 2.7 高效液相色谱与质谱联用检测m~6A水平 | 第43-44页 |
| 2.7.1 样品的预处理 | 第43-44页 |
| 2.7.2 样品上机分析 | 第44页 |
| 2.7.3 离子碎片谱分析 | 第44页 |
| 2.7.4 m~6A的定量分析 | 第44页 |
| 2.8 m~6Aimmunoprecipitation(MeRIP)QPCR | 第44-45页 |
| 2.9 数据统计 | 第45-47页 |
| 3 实验结果 | 第47-56页 |
| 3.1 母猪妊娠末期不同背膘厚度对胎盘及胎儿发育的影响 | 第47-52页 |
| 3.1.1 母猪妊娠末期不同背膘厚度对弱仔发生率的影响 | 第47页 |
| 3.1.2 母猪妊娠末期背膘对胎盘中脂质沉积的影响 | 第47-48页 |
| 3.1.3 母猪妊娠末期背膘对血管发育的影响 | 第48-49页 |
| 3.1.4 母猪妊娠末期不同背膘下胎盘m~6A修饰的影响 | 第49-50页 |
| 3.1.5 母猪不同背膘下弱仔胎盘中m~6A相关蛋白的表达 | 第50-51页 |
| 3.1.6 母猪妊娠末期不同背膘下血管发育关键基因的m~6A修饰情况 | 第51-52页 |
| 3.2 母猪妊娠期末期背膘过厚对不同体重仔猪胎盘发育的影响 | 第52-56页 |
| 3.2.1 母猪妊娠末期背膘过厚对不同体重仔猪胎盘血管发育的影响 | 第52-54页 |
| 3.2.2 母猪妊娠期不同背膘下不同体重仔猪胎盘中m~6A水平差异 | 第54页 |
| 3.2.3 母猪妊娠期不同背膘下不同体重仔猪胎盘中m~6A水平差异 | 第54-55页 |
| 3.2.4 妊娠末期背膘过厚母猪中关键基因的m~6A修饰差异 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 母猪妊娠末期背膘厚度对低初生重仔猪发生率的影响 | 第56-57页 |
| 4.2 母猪妊娠末期背膘过厚可能通过影响胎盘血管发育影响LBW猪的发生 | 第57页 |
| 4.3 母猪妊娠末期背膘过厚可能通过RNAm~6A修饰调控相关基因的表达 | 第57-59页 |
| 第三章 猪GPR120不同转录本的鉴定及受体信号研究 | 第59-72页 |
| 1 前言 | 第59-60页 |
| 2 材料和方法 | 第60-65页 |
| 2.1 实验材料 | 第60页 |
| 2.1.1 细胞材料 | 第60页 |
| 2.1.2 载体和质粒 | 第60页 |
| 2.1.3 菌株 | 第60页 |
| 2.2 主要仪器、试剂和配制 | 第60-63页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第60-61页 |
| 2.2.2 主要试剂和试剂盒 | 第61页 |
| 2.2.3 主要溶液的配制 | 第61-63页 |
| 2.3 实验方法 | 第63-65页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第63页 |
| 2.3.2 总RNA抽提、反转录及实时荧光定量PCR | 第63-64页 |
| 2.3.3 细胞转染 | 第64页 |
| 2.3.4 细胞或组织总蛋白抽提及Westernblot检测 | 第64页 |
| 2.3.5 双荧光素酶活性检测 | 第64-65页 |
| 2.3.6 统计分析 | 第65页 |
| 3 实验结果 | 第65-69页 |
| 3.1 猪GPR120及其转录本在组织和细胞中的表达 | 第65-66页 |
| 3.2 猪GPR120对激动剂的响应 | 第66-67页 |
| 3.3 猪GPR120 V2转录本并不影响WT转录本的功能 | 第67-68页 |
| 3.4 猪GPR120响应激动剂可以激活胞内ERK1/2信号 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| 4.1 猪GPR120组织表达特异性反映生物学功能 | 第69-70页 |
| 4.2 猪GPR120响应n-3PUFA激活下游信号通路 | 第70-72页 |
| 第四章 猪GPR120调控脂肪细胞分化的功能及机制研究 | 第72-97页 |
| 1 前言 | 第72-73页 |
| 2 材料和方法 | 第73-80页 |
| 2.1 实验材料 | 第73页 |
| 2.1.1 细胞材料 | 第73页 |
| 2.1.2 载体和质粒 | 第73页 |
| 2.1.3 菌株 | 第73页 |
| 2.2 主要仪器、试剂和配制 | 第73-75页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第73-74页 |
| 2.2.2 主要试剂和试剂盒 | 第74-75页 |
| 2.2.3 主要溶液的配制 | 第75页 |
| 2.3 实验方法 | 第75-80页 |
| 2.3.1 细胞培养与分化 | 第75-76页 |
| 2.3.2 油红O染色及甘油三酯检测 | 第76页 |
| 2.3.3 总RNA抽提、反转录及QPCR | 第76-77页 |
| 2.3.4 干涉质粒的构建 | 第77页 |
| 2.3.5 细胞转染 | 第77页 |
| 2.3.6 慢病毒包装 | 第77-79页 |
| 2.3.7 慢病毒颗粒感染目的细胞 | 第79页 |
| 2.3.8 实时监测胞内钙离子水平 | 第79页 |
| 2.3.9 细胞或组织总蛋白抽提及Westernblot检测 | 第79页 |
| 2.3.10 双荧光素酶活性检测 | 第79-80页 |
| 2.3.11 统计分析 | 第80页 |
| 3 实验结果 | 第80-94页 |
| 3.1 慢病毒敲低GPR120对3T3L1成脂分化的影响 | 第80-81页 |
| 3.2 n-3PUFA对成脂分化的影响 | 第81-82页 |
| 3.3 ALA促进成脂分化是依赖于GPR120的 | 第82-84页 |
| 3.4 GPR120特异性激动剂TUG-891促进成脂分化 | 第84-85页 |
| 3.5 猪原代SV细胞中GPR120促进成脂分化 | 第85-86页 |
| 3.6 不同激动剂通过GPR120激活PPARγ | 第86-87页 |
| 3.7 胞内钙离子[Ca~(2+)]i和ERK1/2信号介导GPR120的激活 | 第87-89页 |
| 3.8 TUG-891通过[Ca~(2+)]i促进PPARγ的表达 | 第89-91页 |
| 3.9 TUG-891通过胞内ERK1/2信号上调PPARγ的表达 | 第91-93页 |
| 3.10 TUG-891通过[Ca~(2+)]i和ERK1/2信号激活PPARγ | 第93-94页 |
| 4 讨论 | 第94-97页 |
| 第五章 讨论与结语 | 第97-101页 |
| 1 总体讨论 | 第97-99页 |
| 2 研究结论 | 第99-100页 |
| 3 创新点 | 第100页 |
| 4 本研究的不足之处 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-123页 |
| 附录Ⅰ 研究生期间发表的主要论文 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-126页 |
