摘要 | 第11-13页 |
ABSTRACT | 第13页 |
第一章 引言 | 第15-25页 |
1 文献综述 | 第15-23页 |
1.1 转基因技术及所用到的标记基因 | 第15-18页 |
1.2 植物颜色控制基因的研究现状及其在标记基因方面的应用 | 第18-21页 |
1.3 小麦非组织培养转基因技术 | 第21-23页 |
2 本文研究的内容 | 第23页 |
3 本文研究的目的意义 | 第23-25页 |
第二章 RhDFR和TaDFR基因的克隆及序列分析 | 第25-41页 |
1 RhDFR和TaDFRA基因的克隆 | 第25-35页 |
1.1 试验材料、试剂和仪器 | 第25-28页 |
1.2 试验方法 | 第28-34页 |
1.3 结果分析 | 第34-35页 |
2 RhDFR和TaDFR基因测序结果及序列分析 | 第35-41页 |
2.1 RhDFR-1和TaDFRA-1基因测序结果 | 第35页 |
2.2 结构域分析 | 第35-36页 |
2.3 进化树分析 | 第36-41页 |
第三章 RhDFR-1和TaDFRA-1基因表达载体构建 | 第41-47页 |
1 试验材料及方法 | 第41-42页 |
1.1 载体构建方法:gateway克隆技术体系原理 | 第41-42页 |
1.2 菌株及载体 | 第42页 |
1.3 本试验所用引物 | 第42页 |
1.4 主要生化试剂 | 第42页 |
1.5 主要仪器 | 第42页 |
2 试验方法 | 第42-45页 |
2.1 p806-303-RhDFR-1和pGwb6-TaDFRA-1表达载体的构建 | 第42-44页 |
2.2 农杆菌感受态细胞的制备及重组表达载体转化农杆菌 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-47页 |
3.1 构建载体的结果 | 第45-46页 |
3.2 pGwb6-TaDFRA-1表达载体中sGFP-TaDFRA-1融合蛋白表达分析 | 第46-47页 |
第四章 RhDFR-1和TaDFRA-1在拟南芥中作为标记基因的可行性验证 | 第47-56页 |
1 试验材料 | 第47-48页 |
1.1 菌株及植物材料 | 第47页 |
1.2 主要生化试剂及试剂盒 | 第47页 |
1.3 试剂配制 | 第47页 |
1.4 主要仪器和器具 | 第47-48页 |
2 试验方法 | 第48-50页 |
2.1 拟南芥育苗 | 第48-49页 |
2.2 农杆菌培养、沾花转化并收获T_1代种子 | 第49页 |
2.3 T_1代种子筛选、检测、观察并收获T_2种子 | 第49-50页 |
2.4 RhDFR-1和TaDFRA-1作为筛选标记基因的可行性验证 | 第50页 |
3 结果与分析 | 第50-56页 |
3.1 p806-303-RhDFR-1转化拟南芥结果观察 | 第50页 |
3.2 pGwb6-TaDFRA-1转化拟南芥结果观察 | 第50-54页 |
3.3 RhDFR-1和TaDFRA-1作为标记基因的可行性验证 | 第54-56页 |
第五章 小麦转基因方法的探索 | 第56-67页 |
1 试验材料 | 第56页 |
1.1 菌株及植物材料 | 第56页 |
1.2 主要生化试剂 | 第56页 |
1.3 主要仪器和器具 | 第56页 |
2 试验方法 | 第56-61页 |
2.1 转化方法 | 第56-58页 |
2.2 筛选方案 | 第58-59页 |
2.3 转化方案 | 第59-61页 |
3 结果与分析 | 第61-67页 |
3.1 T_0代播种量及成活量统计 | 第61页 |
3.2 T_1代收获种子量及PCR筛选结果 | 第61-65页 |
3.3 辽春17的T_2代PCR筛选结果 | 第65页 |
3.4 豫麦18的T_2代GFP及DFR表达结果观察 | 第65-66页 |
3.5 Southernblotting对转基因植株检测的尝试 | 第66-67页 |
第六章 结论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
攻读硕士学位论文期间发表的论文 | 第76页 |