| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-11页 |
| 第一章 材料与方法 | 第11-21页 |
| 1.1 仪器、试剂和耗材 | 第11-12页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第11页 |
| 1.1.2 主要试剂和耗材 | 第11-12页 |
| 1.2 核酸提取 | 第12-14页 |
| 1.2.1 细胞系DNA提取 | 第12-13页 |
| 1.2.2 细胞系RNA提取 | 第13页 |
| 1.2.3 总RNA纯化 | 第13-14页 |
| 1.3 细胞的处理 | 第14-15页 |
| 1.3.1 实验前准备 | 第14页 |
| 1.3.2 首次传代前细胞的复苏 | 第14页 |
| 1.3.3 培养液的更换 | 第14页 |
| 1.3.4 细胞传代 | 第14-15页 |
| 1.3.5 5-Aza-CdR作用 | 第15页 |
| 1.3.6 miRNAs转染 | 第15页 |
| 1.4 DNA样本亚硫酸盐处理 | 第15-16页 |
| 1.4.1 DNA前处理 | 第16页 |
| 1.4.2 亚硫酸盐修饰及纯化 | 第16页 |
| 1.4.3 修饰后处理 | 第16页 |
| 1.5 WIF1甲基化状态检测 | 第16-17页 |
| 1.5.1 甲基化特异性PCR (MSP) | 第16-17页 |
| 1.5.2 亚硫酸盐基因测序 | 第17页 |
| 1.6 WIF1 mRNA检测 | 第17-18页 |
| 1.6.1 RT-PCR | 第17-18页 |
| 1.6.2 实时荧光定量PCR | 第18页 |
| 1.6.3 Real-time qPCR结果数据分析 | 第18页 |
| 1.7 MTT法检测细胞增殖活性 | 第18-19页 |
| 1.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
| 1.8.1 凝胶制备 | 第19页 |
| 1.8.2 电泳 | 第19页 |
| 1.8.3 显色 | 第19页 |
| 1.9 Western Blot检测目的基因的表达 | 第19-21页 |
| 第二章 结果 | 第21-29页 |
| 2.1 胃癌细胞系WIF1启动子甲基化状态BGS检测结果 | 第21页 |
| 2.2 WIF1在胃癌细胞系中的表达 | 第21-22页 |
| 2.3 5-Aza-CdR对WIF1基因甲基化状态的影响 | 第22页 |
| 2.4 5-Aza-CdR对WIF1基因转录表达的影响 | 第22-23页 |
| 2.5 BART19-3p模拟物和抑制物对WIF1转录表达的影响 | 第23页 |
| 2.6 5-Aza-CdR对细胞增殖的影响 | 第23-25页 |
| 2.7 BART19-3p模拟物对细胞增殖的影响 | 第25-26页 |
| 2.8 BART19-3p抑制物对细胞增殖的影响 | 第26-27页 |
| 2.9 5-Aza-CdR对 β-catenin表达水平的影响 | 第27页 |
| 2.10 BART19-3p模拟物和抑制物对 β-catenin表达的影响 | 第27-29页 |
| 第三章 讨论 | 第29-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 综述 | 第36-52页 |
| 综述参考文献 | 第47-52页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
