摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
引言 | 第10-13页 |
1 NLR样受体与结肠炎 | 第10-11页 |
2 MAPK与结肠炎 | 第11-12页 |
3 黄酮概述 | 第12页 |
4 研究目的和意义 | 第12-13页 |
第一部分 黄酮对LPS及ATP诱导的RAW264.7、THP-1细胞中NLRP3表达以及其信号通路作用研究 | 第13-28页 |
1 抗炎效果最佳的黄酮单体筛选 | 第13-15页 |
1.1 实验材料 | 第13-15页 |
1.1.1 细胞株及主要试剂 | 第13页 |
1.1.2 实验仪器 | 第13页 |
1.1.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩胶与分离胶配制 | 第13-14页 |
1.1.4 引物序列 | 第14-15页 |
2 实验方法 | 第15-18页 |
2.1 细胞培养 | 第15页 |
2.2 THP-1细胞的诱导分化 | 第15页 |
2.3 细胞总RNA提取 | 第15-16页 |
2.4 cDNA的制备 | 第16页 |
2.5 Real-timePCR检测 | 第16-17页 |
2.6 数据处理 | 第17页 |
2.7 细胞蛋白提取及BCA法测定蛋白含量 | 第17-18页 |
2.8 SDS-PAGE电泳 | 第18页 |
2.9 蛋白杂交检测 | 第18页 |
2.10 cck-8测定细胞活力 | 第18页 |
3 结果分析 | 第18-28页 |
3.1 黄酮对Raw264.7、THP-1细胞活力的影响 | 第18-20页 |
3.2 抗炎效果最佳的黄酮单体筛 | 第20-21页 |
3.3 黄酮对ATP及LPS激活的NLRP3及MAPK信号通路的影响 | 第21-22页 |
3.4 黄酮对caspase-1活化影响 | 第22-23页 |
3.5 黄酮抑制MAPKs通路的活化 | 第23-24页 |
3.6 黄酮抑制NF-κB的活化 | 第24页 |
3.7 黄酮对Raw264.7细胞中细胞因子表达的影响 | 第24-26页 |
3.8 黄酮对THP-1细胞中细胞因子表达的影响 | 第26-28页 |
第二部分 芦丁及槲皮素抑制DSS诱导的小鼠急性结肠炎 | 第28-39页 |
1 实验材料 | 第28页 |
1.1 实验材料与试剂 | 第28页 |
1.2 实验仪器 | 第28页 |
2 实验方法 | 第28-30页 |
2.1 动物实验 | 第28-29页 |
2.2 mDAI评分细则 | 第29页 |
2.3 H&E染色 | 第29页 |
2.4 IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α的检测 | 第29页 |
2.5 IL-1β,TNF-α,IL-6、IL-10基因的转录水平的检测 | 第29-30页 |
2.6 SDS-PAGE及蛋白杂交检测 | 第30页 |
2.7 数据统计与分析 | 第30页 |
3 结果分析 | 第30-36页 |
3.1 黄酮对DSS诱导的结肠炎小鼠的mDAI及结肠长度的影响 | 第30-31页 |
3.2 黄酮抑制结肠中炎性细胞的浸润 | 第31-32页 |
3.3 黄酮对DSS诱导的结肠炎小鼠中caspase-1表达的影响 | 第32-33页 |
3.4 黄酮对DSS诱导的结肠炎小鼠模型中IL-1B、TNF-α、IL-10、IL-6细胞因子及其mRNA的影响 | 第33-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
作者简介 | 第45页 |