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黄酮类药物对巨噬细胞中NLRP3信号通路的调控及缓解DSS诱导的小鼠结肠炎机制的研究

摘要第3-4页
abstract第4-5页
缩略语表第9-10页
引言第10-13页
    1 NLR样受体与结肠炎第10-11页
    2 MAPK与结肠炎第11-12页
    3 黄酮概述第12页
    4 研究目的和意义第12-13页
第一部分 黄酮对LPS及ATP诱导的RAW264.7、THP-1细胞中NLRP3表达以及其信号通路作用研究第13-28页
    1 抗炎效果最佳的黄酮单体筛选第13-15页
        1.1 实验材料第13-15页
            1.1.1 细胞株及主要试剂第13页
            1.1.2 实验仪器第13页
            1.1.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩胶与分离胶配制第13-14页
            1.1.4 引物序列第14-15页
    2 实验方法第15-18页
        2.1 细胞培养第15页
        2.2 THP-1细胞的诱导分化第15页
        2.3 细胞总RNA提取第15-16页
        2.4 cDNA的制备第16页
        2.5 Real-timePCR检测第16-17页
        2.6 数据处理第17页
        2.7 细胞蛋白提取及BCA法测定蛋白含量第17-18页
        2.8 SDS-PAGE电泳第18页
        2.9 蛋白杂交检测第18页
        2.10 cck-8测定细胞活力第18页
    3 结果分析第18-28页
        3.1 黄酮对Raw264.7、THP-1细胞活力的影响第18-20页
        3.2 抗炎效果最佳的黄酮单体筛第20-21页
        3.3 黄酮对ATP及LPS激活的NLRP3及MAPK信号通路的影响第21-22页
        3.4 黄酮对caspase-1活化影响第22-23页
        3.5 黄酮抑制MAPKs通路的活化第23-24页
        3.6 黄酮抑制NF-κB的活化第24页
        3.7 黄酮对Raw264.7细胞中细胞因子表达的影响第24-26页
        3.8 黄酮对THP-1细胞中细胞因子表达的影响第26-28页
第二部分 芦丁及槲皮素抑制DSS诱导的小鼠急性结肠炎第28-39页
    1 实验材料第28页
        1.1 实验材料与试剂第28页
        1.2 实验仪器第28页
    2 实验方法第28-30页
        2.1 动物实验第28-29页
        2.2 mDAI评分细则第29页
        2.3 H&E染色第29页
        2.4 IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α的检测第29页
        2.5 IL-1β,TNF-α,IL-6、IL-10基因的转录水平的检测第29-30页
        2.6 SDS-PAGE及蛋白杂交检测第30页
        2.7 数据统计与分析第30页
    3 结果分析第30-36页
        3.1 黄酮对DSS诱导的结肠炎小鼠的mDAI及结肠长度的影响第30-31页
        3.2 黄酮抑制结肠中炎性细胞的浸润第31-32页
        3.3 黄酮对DSS诱导的结肠炎小鼠中caspase-1表达的影响第32-33页
        3.4 黄酮对DSS诱导的结肠炎小鼠模型中IL-1B、TNF-α、IL-10、IL-6细胞因子及其mRNA的影响第33-36页
    4 讨论第36-38页
    5 结论第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-45页
作者简介第45页

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