| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 图目录 | 第12-13页 |
| 表目录 | 第13-14页 |
| 缩略词对照表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-31页 |
| 1.1 铜绿假单胞菌 | 第15-26页 |
| 1.1.1 铜绿假单胞菌概述 | 第15-16页 |
| 1.1.2 铜绿假单胞菌的致病性 | 第16-17页 |
| 1.1.3 铜绿假单胞菌中的群体感应调节系统 | 第17-22页 |
| 1.1.4 铜绿假单胞菌中的吩嗪化合物 | 第22-26页 |
| 1.2 抗生素及其特性 | 第26-28页 |
| 1.2.1 抗生素概述 | 第26页 |
| 1.2.2 抗生素的分类 | 第26-27页 |
| 1.2.3 抗生素做为信号分子的作用 | 第27-28页 |
| 1.3 自诱导信号分子AI-2的作用 | 第28-30页 |
| 1.4 本课题的研究目的和意义 | 第30-31页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第31-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-35页 |
| 2.1.1 菌株质粒 | 第31-32页 |
| 2.1.2 培养基和缓冲溶液 | 第32-34页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第34页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-55页 |
| 2.2.1 质粒的小量提取 | 第35页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶DNA片段回收纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.3 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第36页 |
| 2.2.4 铜绿假单胞菌细胞的快速制备 | 第36-37页 |
| 2.2.5 电转化 | 第37页 |
| 2.2.6 双亲株杂交实验 | 第37-38页 |
| 2.2.7 三亲株杂交实验 | 第38页 |
| 2.2.8 随机转座突变实验 | 第38-39页 |
| 2.2.9 转座突变体的筛选 | 第39-40页 |
| 2.2.10 随机PCR、测序及插入位点的确定 | 第40-42页 |
| 2.2.11 启动子—报道子融合体的构建 | 第42-43页 |
| 2.2.12 基因表达水平的测定 | 第43页 |
| 2.2.13 基因互补实验 | 第43-44页 |
| 2.2.14 基因敲除实验 | 第44-46页 |
| 2.2.15 绿脓菌素的测定 | 第46-47页 |
| 2.2.16 细菌的运动性能力实验 | 第47页 |
| 2.2.17 抗生素对基因表达影响的实验 | 第47-48页 |
| 2.2.18 96孔板法 | 第48页 |
| 2.2.19 Las-box对四环素调节影响的实验 | 第48-49页 |
| 2.2.20 AI-2的体外合成 | 第49-50页 |
| 2.2.21 动物实验 | 第50页 |
| 2.2.22 AI-2对rhl基因表达影响的检测 | 第50-51页 |
| 2.2.23 AI-2对铜绿假单胞菌运动的影响实验 | 第51页 |
| 2.2.24 以Mini-CTX为载体的启动子—报道子融合体的构建 | 第51页 |
| 2.2.25 蛋白的表达和纯化 | 第51-52页 |
| 2.2.26 聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第52-53页 |
| 2.2.27 电泳迁移实验(EMSA) | 第53-55页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第55-85页 |
| 3.1 吩嗪合成操纵子phzA受低抑制浓度抗生素激活的机制 | 第55-68页 |
| 3.1.1 低抑制浓度抗生素对phzA1/phzA2的调节 | 第55-56页 |
| 3.1.2 壮观霉素对phzA1/phzA2激活具体浓度的测定 | 第56-58页 |
| 3.1.3 寻找参与壮观霉素调节phzA1/phzA2表达的基因 | 第58-61页 |
| 3.1.4 基因pcnB互补实验和功能研究 | 第61-63页 |
| 3.1.5 基因truA互补实验和功能研究 | 第63-66页 |
| 3.1.6 讨论 | 第66-68页 |
| 3.2 铜绿假单胞菌中多个系统对phzA1/phzA2表达的影响 | 第68-74页 |
| 3.2.1 多个突变体中检测phzA1/phzA2的表达情况 | 第68-71页 |
| 3.2.2 LasR、RhlR以及PqsR蛋白与phzA1的相互作用 | 第71-73页 |
| 3.2.3 讨论 | 第73-74页 |
| 3.3 phzA1基因上游las-box对四环素调节的影响 | 第74-77页 |
| 3.3.1 含有las-box报道载体的构建 | 第74-75页 |
| 3.3.2 在固体平板中测定四环素对las-box的调节 | 第75-76页 |
| 3.3.3 液体中测定四环素对las-box的调节 | 第76-77页 |
| 3.3.4 讨论 | 第77页 |
| 3.4 AI-2影响铜绿假单胞致病性的研究 | 第77-85页 |
| 3.4.1 外源AI-2对铜绿假单胞菌毒性的研究 | 第78-79页 |
| 3.4.2 AI-2对铜绿假单胞菌中群体感应调节系统Rhl系统的调节实验 | 第79-80页 |
| 3.4.3 AI-2对铜绿假单胞菌的运动性的影响和对rhlAB基因表达的调节 | 第80-82页 |
| 3.4.4 信号分子AI-2对Rhl系统信号通路的影响 | 第82-83页 |
| 3.4.5 讨论 | 第83-85页 |
| 第四章 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-95页 |
| 攻读博士学位期间取得的科研成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
