| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词 | 第12-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-23页 |
| 1.1 耐辐射动球菌 | 第16-20页 |
| 1.1.1 耐辐射动球菌特征 | 第16-17页 |
| 1.1.2 耐辐射动球菌基因组 | 第17页 |
| 1.1.3 耐辐射动球菌抗辐射性研究 | 第17-18页 |
| 1.1.4 耐辐射动球菌研究进展 | 第18-20页 |
| 1.2 RecFOR途径 | 第20-23页 |
| 第二章 耐辐射动球菌中RecO、RecR蛋白的生物信息学分析 | 第23-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23页 |
| 2.2 结果与分析 | 第23-30页 |
| 2.2.1 RecO、RecR在耐辐射动球菌基因组中的位置和基本特征 | 第23-24页 |
| 2.2.2 RecO、RecR蛋白理化性质分析 | 第24-25页 |
| 2.2.3 RecO、RecR蛋白的疏水性分析 | 第25-26页 |
| 2.2.4 RecO、RecR蛋白的二级结构预测与分析 | 第26-27页 |
| 2.2.5 同源模建RecO、RecR蛋白的三级结构与分析 | 第27-30页 |
| 2.3 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 耐辐射动球菌RecO、RecR重组质粒的构建 | 第31-50页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第31-35页 |
| 3.1.1 菌种与质粒 | 第31-32页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第32-33页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第33-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-41页 |
| 3.2.1 耐辐射动球菌培养 | 第35页 |
| 3.2.2 耐辐射动球菌基因组提取 | 第35-36页 |
| 3.2.3 PCR扩增 | 第36-38页 |
| 3.2.4 质粒复苏与扩大 | 第38-40页 |
| 3.2.5 目的基因与载体连接 | 第40-41页 |
| 3.2.6 酶切鉴定测序 | 第41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-49页 |
| 3.3.1 耐辐射动球菌菌的培养条件 | 第41页 |
| 3.3.2 耐辐射动球菌的基因组提取及浓度测定 | 第41-42页 |
| 3.3.3 目的基因的PCR扩增 | 第42-44页 |
| 3.3.4 质粒的提取、酶切及纯化 | 第44-45页 |
| 3.3.5 重组载体的酶切验证 | 第45-47页 |
| 3.3.6 连接测序验证 | 第47-49页 |
| 3.4 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 耐辐射动球菌RecO、RecR诱导表达及其紫外辐射损伤研究 | 第50-58页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第50页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第50页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-54页 |
| 4.2.1 外源蛋白的诱导表达 | 第50-53页 |
| 4.2.2 菌落平板计数 | 第53-54页 |
| 4.2.3 紫外线对细菌生存率的影响 | 第54页 |
| 4.3 结果与分析 | 第54-57页 |
| 4.3.1 耐辐射动球菌RecO或RecR在大肠杆菌BL21(DE3)的诱导表达 | 第54-55页 |
| 4.3.2 间接计数法调整菌落浓度 | 第55-56页 |
| 4.3.3 紫外对细菌生存率的影响 | 第56-57页 |
| 4.4 小结 | 第57-58页 |
| 第五章 RecFOR途径中相关基因的表达分析 | 第58-68页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第58-59页 |
| 5.1.1 材料与仪器 | 第58页 |
| 5.1.2 试剂 | 第58-59页 |
| 5.2 实验方法 | 第59-62页 |
| 5.2.1 实时荧光定量PCR引物设计 | 第59-60页 |
| 5.2.2 重组菌总RNA提取 | 第60-61页 |
| 5.2.3 反转录 | 第61页 |
| 5.2.4 实时荧光定量PCR | 第61-62页 |
| 5.2.5 数据处理方法 | 第62页 |
| 5.3 结果与分析 | 第62-67页 |
| 5.3.1 总RNA提取的结果检测 | 第62-63页 |
| 5.3.2 重组菌中外源基因的表达分析 | 第63-65页 |
| 5.3.3 重组菌中RecFOR途径修复基因表达分析 | 第65-67页 |
| 5.4 小结 | 第67-68页 |
| 第六章 讨论 | 第68-70页 |
| 第七章 总结与展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 附录1 主要试剂配制 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
