摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 前言 | 第13-25页 |
1.1 植物细胞质雄性不育研究意义 | 第13-14页 |
1.2 植物细胞质雄性不育的创制 | 第14页 |
1.3 植物细胞质雄性不育发生机制 | 第14-22页 |
1.3.1 植物细胞质雄性不育细胞学研究 | 第14-16页 |
1.3.2 植物细胞质雄性不育分子机制 | 第16-20页 |
1.3.3 植物细胞质雄性不育与线粒体 | 第20-22页 |
1.4 分子标记技术与植物细胞质雄性不育相关基因的开发 | 第22-23页 |
1.5 辣椒细胞质雄性不育特征 | 第23-24页 |
1.5.1 辣椒细胞质雄性不育细胞学特征 | 第23页 |
1.5.2 辣椒细胞质雄性不育分子机理研究 | 第23-24页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 辣椒细胞质雄性不育系 HW203A 和其保持系 HW203B 花药细胞学与形态学分析 | 第25-30页 |
2.1 试验材料 | 第25页 |
2.2 试验方法 | 第25-26页 |
2.2.1 花药发育形态学观察 | 第25页 |
2.2.2 花药发育光学显微观察 | 第25-26页 |
2.2.3 花药发育胼脂质染色观察 | 第26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-28页 |
2.3.1 不育系 HW203A 与其保持系 HW203B 花药发育形态学观察 | 第26页 |
2.3.2 不育系 HW203A 与其保持系 HW203B 花药发育细胞形态学特征分析 | 第26-28页 |
2.4 讨论 | 第28-29页 |
2.5 小结 | 第29-30页 |
第三章 辣椒细胞质雄性不育相关基因Ψatp6-2 基因功能分析 | 第30-52页 |
3.1 试验材料 | 第30页 |
3.2 试验方法 | 第30-34页 |
3.2.1 辣椒 atp6-2 基因表达模式分析 | 第30-31页 |
3.2.2 不同发育时期花蕾线粒体 ATPase 水解活性测定 | 第31-32页 |
3.2.3 VIGS 技术沉默辣椒不育系 HW203A 与其保持系 HW203B atp6-2 基因 | 第32-33页 |
3.2.4 不育系与保持系花蕾线粒体 ATPase 组织化学定位 | 第33-34页 |
3.3 结果与分析 | 第34-45页 |
3.3.1 保持系 atp6-2 与其不育系Ψatp6-2 基因表达模式分析 | 第34-35页 |
3.3.2 花蕾不同发育时期不育系与保持系是线粒体 F_1F_o-ATP 合成酶水解活性分析 | 第35-36页 |
3.3.3 不育系Ψatp6-2 与保持系 atp6-2 基因沉默与花粉发育 | 第36-42页 |
3.3.4 不育系 HW203A 与其保持系 HW203B 花药 ATPase 定位 | 第42-45页 |
3.4 讨论 | 第45-50页 |
3.4.1 Ψatp6-2 基因对线粒体 F_1F_o-ATP 合成酶的作用 | 第45-47页 |
3.4.2 不育系中 F_oF_1-ATP 合酶功能障碍与辣椒花药败育 | 第47-49页 |
3.4.3 不育系与保持系花药 ATPase 定位与花药败育 | 第49-50页 |
3.5 结论 | 第50-52页 |
第四章 辣椒细胞质雄性不育相关基因 orf507 基因功能分析 | 第52-76页 |
4.1 试验材料 | 第52页 |
4.2 试验方法 | 第52-55页 |
4.2.1 细胞质雄性不育相关基因 orf507 基因表达模式分析 | 第52页 |
4.2.2 花药不同发育时期花蕾线粒体细胞色素 c 氧化酶活性测定 | 第52-53页 |
4.2.3 花药不同发育时期花蕾线粒体细胞色素 c 氧化酶组织化学定位 | 第53页 |
4.2.4 植物表达载体构建 | 第53-54页 |
4.2.5 农杆菌介导的辣椒遗传转化 | 第54页 |
4.2.6 辣椒遗传转化植株筛选及检测 | 第54页 |
4.2.7 转基因植株花药形态学与细胞学观察 | 第54-55页 |
4.2.8 转基因辣椒 BC_1T_1代群体分离分析 | 第55页 |
4.2.9 转基因辣椒 BC_1T_1代 orf507 基因及 atp6-2 基因表达模式分析 | 第55页 |
4.2.10 转基因辣椒 BC_1T_1代花蕾线粒体细胞色素 c 氧化酶与线粒体 F_1F_o-ATPase水解活性分析 | 第55页 |
4.3 结果与分析 | 第55-70页 |
4.3.1 不育系与保持系 orf507 基因表达模式分析 | 第55-56页 |
4.3.2 不育系与保持系花药不同发育时期细胞色素 c 氧化酶活性分析 | 第56-57页 |
4.3.3 花药不同发育时期花蕾线粒体细胞色素 c 氧化酶组织化学定位分析 | 第57-60页 |
4.3.4 植物表达载体构建 | 第60-62页 |
4.3.5 辣椒转 orf507 基因植株的获得 | 第62-63页 |
4.3.6 辣椒转基因植株分子检测 | 第63-64页 |
4.3.7 转基因植株花粉形态学和细胞学观察 | 第64-67页 |
4.3.8 转基因辣椒 BC_1T_1代分子检测 | 第67-68页 |
4.3.9 转基因辣椒 BC_1T_1代基因表达模式分析 | 第68-69页 |
4.3.10 转基因辣椒 BC_1T_1代花蕾线粒体 F_1F_o-ATP 合成酶水解活性及细胞色素 c 氧化酶活性分析 | 第69-70页 |
4.4 讨论 | 第70-75页 |
4.4.1 细胞色素 c 氧化酶功能障碍与细胞质雄性不育 | 第70-72页 |
4.4.2 辣椒 orf507 基因与线粒体电子传递链复合物 | 第72-75页 |
4.5 结论 | 第75-76页 |
第五章 辣椒细胞质雄性不育系和其保持系胞质线粒体 DNA 的 SRAP 分析 | 第76-91页 |
5.1 试验材料 | 第76-77页 |
5.2 试验方法 | 第77-79页 |
5.2.1 辣椒花蕾线粒体 DNA 的提取 | 第77页 |
5.2.2 线粒体基因组 SRAP 分析 | 第77-78页 |
5.2.3 SRAP 多态性片段的克隆和测序 | 第78页 |
5.2.4 SRAP 差异片段侧翼序列分析 | 第78页 |
5.2.5 线粒体 DNA SRAP 标记转化为 SCAR 标记 | 第78-79页 |
5.2.6 基因表达模式分析 | 第79页 |
5.3 结果与分析 | 第79-87页 |
5.3.1 三种 CMS 类型不育系与保持系花药形态学观察 | 第79-80页 |
5.3.2 辣椒细胞质雄性不育系与其保持系线粒体基因组 SRAP 分析 | 第80-83页 |
5.3.3 SRAP 标记 Me22/Em8 侧翼序列分析 | 第83-85页 |
5.3.4 CMS 不育胞质特异的 SCAR 标记的开发 | 第85-86页 |
5.3.5 SCAR_(130)标记在线粒体基因组中的定位 | 第86页 |
5.3.6 SCAR_(130)标记连锁基因表达模式分析 | 第86-87页 |
5.4 讨论 | 第87-90页 |
5.4.1 群体分离分析法在线粒体基因组分析中的应用 | 第87-88页 |
5.4.2 线粒体 DNA 中新的 CMS 特异分子标记的开发 | 第88-90页 |
5.5 小结与展望 | 第90-91页 |
第六章 全文结论与创新点 | 第91-92页 |
6.1 全文结论 | 第91页 |
6.2 全文创新点 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-106页 |
缩略词 | 第106-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
作者简介 | 第108-109页 |