| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 引言 | 第9-35页 |
| 1.1 斑马鱼作为模式生物的优点及早期发育概况 | 第9-17页 |
| 1.1.1 斑马鱼作为模式生物的优点 | 第9-10页 |
| 1.1.2 斑马鱼卵子的形成 | 第10-14页 |
| 1.1.3 斑马鱼的早期胚胎发育 | 第14-17页 |
| 1.2 母源因子在斑马鱼早期发育中的作用 | 第17-23页 |
| 1.2.1 母源因子与卵子的形成 | 第18-19页 |
| 1.2.2 母源因子与早期细胞分裂 | 第19-20页 |
| 1.2.3 母源因子与合子基因的激活 | 第20-22页 |
| 1.2.4 母源因子与背腹轴线的确立 | 第22-23页 |
| 1.3 斑马鱼中内胚层的诱导 | 第23-28页 |
| 1.3.1 卵黄多核层在中内胚层诱导中的作用 | 第24-25页 |
| 1.3.2 几条重要的信号通路在中内胚层诱导中的作用 | 第25-27页 |
| 1.3.3 T-box 基因在中内胚层诱导中的作用 | 第27-28页 |
| 1.4 Nodal 信号通路 | 第28-31页 |
| 1.4.1 Nodal 信号通路简介 | 第28-30页 |
| 1.4.2 Nodal 信号配体简介 | 第30-31页 |
| 1.5 母源 Eomesodermin 在斑马鱼早期胚胎发育过程中的作用 | 第31-34页 |
| 1.6 本研究的目的 | 第34-35页 |
| 第2章 材料与方法 | 第35-58页 |
| 2.1 斑马鱼品系 | 第35页 |
| 2.2 斑马鱼胚胎的人工受精 | 第35-36页 |
| 2.2.1 挤卵子 | 第35页 |
| 2.2.2 挤精子 | 第35-36页 |
| 2.2.3 受精 | 第36页 |
| 2.3 斑马鱼卵母细胞的体外成熟和受精 | 第36-38页 |
| 2.3.1 实验试剂和材料 | 第36-37页 |
| 2.3.2 斑马鱼卵母细胞的体外成熟和受精方法 | 第37-38页 |
| 2.4 突变体基因型的鉴定 | 第38页 |
| 2.5 显微注射 | 第38-43页 |
| 2.5.1 体外 mRNA 的转录 | 第39-42页 |
| 2.5.2 MO 的设计与变性 | 第42-43页 |
| 2.5.3 显微注射操作 | 第43页 |
| 2.6 MO 有效性的检测 | 第43页 |
| 2.7 斑马鱼整胚原位杂交 | 第43-48页 |
| 2.7.1 原位杂交探针的制备 | 第44-45页 |
| 2.7.2 整胚原位杂交所需的实验试剂 | 第45-46页 |
| 2.7.3 整胚原位杂交的实验步骤 | 第46-48页 |
| 2.8 荧光实时定量 PCR（Real-time PCR） | 第48-52页 |
| 2.8.1 总 mRNA 的提取 | 第48-49页 |
| 2.8.2 模板（cDNA）的制备 | 第49页 |
| 2.8.3 荧光实时定量 PCR | 第49-52页 |
| 2.9 染色体免疫共沉淀 | 第52-55页 |
| 2.9.1 染色体免疫共沉淀所需的实验试剂 | 第52页 |
| 2.9.2 染色体免疫共沉淀的实验方法 | 第52-55页 |
| 2.10 双荧光素酶报告基因实验 | 第55-58页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第58-97页 |
| 3.1 斑马鱼 eomesdermina（eomesa）的时空表达谱 | 第58-59页 |
| 3.2 eomesa 在斑马鱼早期中内胚层诱导过程中的作用 | 第59-68页 |
| 3.2.1 过表达 eomesa 促进斑马鱼中内胚层发育 | 第59页 |
| 3.2.2 单细胞敲低 eomesa 不影响斑马鱼中内胚层发育 | 第59-61页 |
| 3.2.3 母源敲低 eomesa 造成斑马鱼中内胚层发育缺陷 | 第61-66页 |
| 3.2.4 MZeomesa 胚胎存在中内胚层诱导缺陷 | 第66-68页 |
| 3.2.5 小结 | 第68页 |
| 3.3 母源 Eomesa 调控合子 nodal 基因的表达 | 第68-74页 |
| 3.3.1 Eomesa 通过 Nodal 信号调控组织中心基因的表达 | 第68页 |
| 3.3.2 母源敲低 eomesa 降低 nodal 基因的表达水平 | 第68-69页 |
| 3.3.3 MZeomesa 及 Meomesa 胚胎中 nodal 基因表达异常 | 第69-72页 |
| 3.3.4 母源合子 eomesa 的缺失不影响 boz 的表达 | 第72页 |
| 3.3.5 MZeomesa 胚胎中过表达 eomesa 挽救 nodal 基因的表达 | 第72-73页 |
| 3.3.6 小结 | 第73-74页 |
| 3.4 Eomesa 直接调控 nodal 基因的表达 | 第74-79页 |
| 3.4.1 Eomesa 直接调控 ndr1 的表达 | 第74-77页 |
| 3.4.2 Eomesa 可能直接调控 ndr2 的表达 | 第77-79页 |
| 3.4.3 小结 | 第79页 |
| 3.5 母源 Eomesa 激活 mxtx2 的表达 | 第79-82页 |
| 3.5.1 母源敲低 eomesa 降低 mxtx2 的表达 | 第79页 |
| 3.5.2 MZeomesa 和 Meomesa 胚胎中 mxtx2 的表达下降 | 第79-81页 |
| 3.5.3 母源 Eomesa 直接调控 mxtx2 基因的转录 | 第81-82页 |
| 3.5.4 小结 | 第82页 |
| 3.6 Eomesa 与 Mxtx2 协同激活 nodal 基因的表达 | 第82-84页 |
| 3.6.1 过表达 eomesa 和 mxtx2 激活 nodal 基因的异位表达 | 第83页 |
| 3.6.2 Eomesa 主要与 Mxtx2 一起调控 ndr1 和 ndr2 的表达 | 第83-84页 |
| 3.6.3 小结 | 第84页 |
| 3.7 MZeomesa 胚胎中 Nodal 拮抗因子表达异常 | 第84-86页 |
| 3.8 MZeomesa 胚胎的其它相关研究 | 第86-93页 |
| 3.8.1 MZeomesa 胚胎 24 小时的表型 | 第86-88页 |
| 3.8.2 eomesafh105突变等位基因可能未完全丧失功能 | 第88-91页 |
| 3.8.3 MZeomesa 中 Tbx16 不调控 nodal 基因的表达 | 第91-92页 |
| 3.8.4 MZeomesa 中β-catenin 可能负责激活 nodal 基因在背部表达 | 第92-93页 |
| 3.9 eomesa 同源基因 eomesb 的功能初探 | 第93-97页 |
| 第4章 结论与展望 | 第97-102页 |
| 4.1 本研究的主要结论 | 第97页 |
| 4.2 斑马鱼合子 nodal 基因的调控网络 | 第97-100页 |
| 4.3 母源因子 Eomesa 在斑马鱼早期发育中的功能 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第112页 |
