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枸杞根际促生细菌筛选、培养基优化及基因组测序

符号说明第4-11页
中文摘要第11-14页
Abstract第14-17页
1 引言第18-36页
    1.1 枸杞及其经济价值第18页
    1.2 枸杞连作障碍第18-19页
    1.3 枸杞土传病害第19-20页
    1.4 枸杞根腐病及防治现状第20-21页
        1.4.1 致病病原第20页
        1.4.2 枸杞根腐病症状第20页
        1.4.3 枸杞根腐病发病规律第20-21页
        1.4.4 枸杞根腐病防治第21页
    1.5 植物根际促生细菌第21-23页
        1.5.1 植物根际促生细菌概述第21-22页
        1.5.2 植物根际促生细菌作用机制第22页
        1.5.3 植物根际促生细菌应用第22-23页
    1.6 微生物肥料第23-27页
        1.6.1 微生物肥料概念第23页
        1.6.2 微生物肥料特点第23-24页
        1.6.3 微生物肥料种类第24-25页
        1.6.4 国际微生物肥料的发展现状第25页
        1.6.5 我国微生物肥料现状第25-26页
        1.6.6 微生物肥料的应用效果及其发展前景第26-27页
        1.6.7 微生物肥料发展存在的问题第27页
    1.7 微生物肥料在枸杞种植中的应用前景第27页
    1.8 全基因组测序技术第27-34页
        1.8.1 概述第27-28页
        1.8.2 基因组测序技术的发展第28-29页
        1.8.3 基因组数据分析参数第29-34页
            1.8.3.1 基因组组分分析第29-31页
            1.8.3.2 通用功能注释数据库介绍第31-32页
            1.8.3.3 特定功能注释数据库介绍第32-33页
            1.8.3.4 全基因组图谱第33-34页
    1.9 本项目的立项依据、研究内容和技术路线第34-36页
        1.9.1 立项依据第34页
        1.9.2 研究内容第34-35页
        1.9.3 技术路线第35-36页
2 材料与方法第36-48页
    2.1 枸杞根际样品采集第36页
    2.2 主要仪器和设备第36页
    2.3 主要药品试剂第36-37页
    2.4 培养基第37-38页
        2.4.1 常规培养基第37-38页
        2.4.2 蛋白降解菌筛选培养基第38页
        2.4.3 溶磷细菌筛选培养基第38页
        2.4.4 解磷细菌筛选培养基第38页
        2.4.5 生长素产生菌筛选培养基第38页
    2.5 枸杞根腐病菌的分离第38-39页
    2.6 根际细菌的分离第39页
    2.7 拮抗菌的筛选第39-40页
    2.8 蛋白降解菌的筛选第40-41页
        2.8.1 蛋白降解菌的初筛第40页
        2.8.2 蛋白降解菌的复筛第40-41页
            2.8.2.1 酪氨酸标准曲线的绘制第40页
            2.8.2.2 蛋白酶活力测定第40-41页
    2.9 解磷细菌的筛选第41页
    2.10 溶磷细菌的筛选第41页
    2.11 生长素产生菌的筛选第41-42页
        2.11.1 IAA产生菌初筛第41页
        2.11.2 细菌分泌IAA定量测定第41-42页
    2.12 根际促生细菌的鉴定第42-43页
        2.12.1 菌株形态特征及生理生化特征鉴定第42页
        2.12.2 细菌基因组DNA的提取第42页
        2.12.3 16S rRNA基因序列扩增与测序第42-43页
    2.13 培养基的优化第43-45页
        2.13.1 种子液的制备第43页
        2.13.2 单因素试验第43-44页
            2.13.2.1 碳源对拮抗菌株生长的影响第43-44页
            2.13.2.2 氮源对拮抗菌株生长的影响第44页
            2.13.2.3 无机盐对拮抗菌株生长的影响第44页
        2.13.3 正交试验第44页
        2.13.4 平板菌落计数第44-45页
    2.14 拮抗菌株田间试验第45-46页
        2.14.1 试验设计第45-46页
        2.14.2 生防效果统计第46页
    2.15 拮抗菌株全基因组测序分析第46-48页
        2.15.1 测序流程第46页
        2.15.2 生物信息学分析流程第46-48页
3 结果与分析第48-93页
    3.1 枸杞根腐病原菌分离第48页
    3.2 枸杞根际促生细菌筛选第48-54页
        3.2.1 拮抗菌株的筛选第48-49页
        3.2.2 蛋白降解菌的筛选第49-51页
        3.2.3 解磷细菌的筛选第51-52页
        3.2.4 溶磷细菌的筛选第52-53页
        3.2.5 生长素产生菌的筛选第53-54页
    3.3 拮抗菌株形态特征第54-55页
    3.4 拮抗菌株生理生化特征第55-56页
    3.5 16S rRNA基因序列分析第56-58页
    3.6 四株拮抗菌的培养基优化第58-66页
        3.6.1 碳源对拮抗菌生长的影响第58-59页
        3.6.2 氮源对拮抗菌生长的影响第59-62页
            3.6.2.1 有机氮源对拮抗菌生长的影响第59-61页
            3.6.2.2 无机氮源对拮抗菌生长的影响第61-62页
        3.6.3 无机盐对拮抗菌生长的影响第62-63页
        3.6.4 最佳培养基组成第63-66页
            3.6.4.1 枯草芽孢杆菌GQJK2的最佳培养基第63-64页
            3.6.4.2 枯草芽孢杆菌GQJK4的最佳培养基第64页
            3.6.4.3 萎缩芽孢杆菌GQJK17的最佳培养基第64-65页
            3.6.4.4 贝莱斯芽孢杆菌GQJK49的最佳培养基第65-66页
    3.7 田间条件下拮抗菌生防效果第66-67页
        3.7.1 拮抗菌对枸杞根腐病发病率的影响第66-67页
        3.7.2 拮抗菌对枸杞产量的影响第67页
    3.8 枯草芽孢杆菌GQJK2全基因组测序分析第67-78页
        3.8.1 基因组组分分析第67-69页
            3.8.1.1 测序组装数据统计第67-68页
            3.8.1.2 重复序列、转座子分析第68-69页
            3.8.1.3 CRISPR分析第69页
        3.8.2 通用功能注释结果分析第69-74页
            3.8.2.1 COG功能注释第69-70页
            3.8.2.2 GO功能注释结果第70-71页
            3.8.2.3 KEGG功能注释第71-74页
        3.8.3 特定功能注释结果分析第74-77页
            3.8.3.1 碳水化合物活性酶(CAZy)注释分析第74-75页
            3.8.3.2 转运蛋白注释分析第75页
            3.8.3.3 分泌蛋白预测第75页
            3.8.3.4 分泌系统蛋白的预测第75-76页
            3.8.3.5 次级代谢基因簇分析第76-77页
        3.8.4 全基因组图谱第77-78页
    3.9 萎缩芽孢杆菌GQJK17全基因组测序分析第78-86页
        3.9.1 基因组组分分析第78-79页
            3.9.1.1 测序组装数据统计第78页
            3.9.1.2 重复序列、转座子分析第78-79页
        3.9.2 通用功能注释结果分析第79-83页
            3.9.2.1 COG功能注释第79-80页
            3.9.2.2 GO功能注释结果第80页
            3.9.2.3 KEGG功能注释第80-83页
        3.9.3 特定功能注释结果分析第83-86页
            3.9.3.1 碳水化合物活性酶(CAZy)注释分析第83-84页
            3.9.3.2 转运蛋白注释分析第84页
            3.9.3.3 分泌蛋白预测第84页
            3.9.3.4 分泌系统蛋白的预测第84-85页
            3.9.3.5 次级代谢基因簇分析第85-86页
        3.9.4 全基因组图谱第86页
    3.10 贝莱斯芽孢杆菌GQJK49全基因组测序分析第86-93页
        3.10.1 基因组组分分析第86-88页
            3.10.1.1 测序组装数据统计第86-87页
            3.10.1.2 GI岛预测第87-88页
        3.10.2 通用功能注释结果分析第88-90页
            3.10.2.1 COG功能注释第88-89页
            3.10.2.2 GO功能注释结果第89-90页
        3.10.3 特定功能注释结果分析第90-92页
            3.10.3.1 碳水化合物活性酶(CAZy)注释分析第90-91页
            3.10.3.2 次级代谢基因簇分析第91-92页
        3.10.4 全基因组图谱第92-93页
4 讨论第93-97页
5 结论第97-99页
参考文献第99-109页
致谢第109-110页
攻读学位期间发表论文情况第110页

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