| 目录 | 第4-7页 |
| Contents | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第15-41页 |
| 1.1 海洋多糖及多糖水解酶 | 第15页 |
| 1.2 卡拉胶结构、性质及应用 | 第15-22页 |
| 1.2.1 卡拉胶的结构组成与分类 | 第16-18页 |
| 1.2.2 卡拉胶的理化性质 | 第18-21页 |
| 1.2.3 卡拉胶的应用 | 第21-22页 |
| 1.3 卡拉胶寡糖 | 第22-27页 |
| 1.3.1 卡拉胶寡糖的制备方法 | 第22-24页 |
| 1.3.2 卡拉胶寡糖的分离纯化与寡糖结构的鉴定方法 | 第24-25页 |
| 1.3.3 卡拉胶寡糖的生物活性 | 第25-27页 |
| 1.4 卡拉胶酶 | 第27-36页 |
| 1.4.1 卡拉胶降解酶的研究进展 | 第28-33页 |
| 1.4.2 卡拉胶酶的应用 | 第33-35页 |
| 1.4.3 卡拉胶降解酶的应用前景展望 | 第35-36页 |
| 1.5 菌株发酵产酶的优化方法 | 第36-39页 |
| 1.5.1 非统计学方法 | 第36页 |
| 1.5.2 统计学方法 | 第36-39页 |
| 1.6 本论文的研究思路、目的与意义 | 第39-41页 |
| 第二章 ι-卡拉胶降解细菌的筛选鉴定及其产酶培养基的统计学优化 | 第41-67页 |
| 2.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 2.1.1 菌株 | 第41页 |
| 2.1.2 培养基 | 第41页 |
| 2.1.3 试剂 | 第41-42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-48页 |
| 2.2.1 卡拉胶降解细菌的筛选 | 第42页 |
| 2.2.2 产卡拉胶酶细菌的鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2.3 卡拉胶酶活力的测定 | 第43-45页 |
| 2.2.4 卡拉胶酶培养基的统计学优化 | 第45-48页 |
| 2.3 实验结果 | 第48-65页 |
| 2.3.1 卡拉胶降解细菌KL-A的分离与鉴定 | 第48-51页 |
| 2.3.2 Cellulophaga sp.KL-A产卡拉胶酶培养基的统计学优化 | 第51-65页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第65-67页 |
| 第三章 Cellulophaga sp.KL-A中ι-卡拉胶酶CgiA2_Ce的克隆表达与酶学性质的研究 | 第67-95页 |
| 3.1 实验材料 | 第67-71页 |
| 3.1.1 菌株、质粒和感受态细胞 | 第67页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第67页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第67-68页 |
| 3.1.4 引物 | 第68页 |
| 3.1.5 培养基 | 第68-69页 |
| 3.1.6 溶液及缓冲液 | 第69-71页 |
| 3.1.7 主要分析软件 | 第71页 |
| 3.2 基本方法 | 第71-79页 |
| 3.2.1 细菌基因组DNA的提取 | 第71页 |
| 3.2.2 PCR扩增体系及程序 | 第71-72页 |
| 3.2.3 PCR产物切胶回收纯化 | 第72页 |
| 3.2.4 目的片段与载体连接 | 第72页 |
| 3.2.5 感受态细胞的制备(化学转化) | 第72-73页 |
| 3.2.6 克隆质粒转入感受态细胞 | 第73页 |
| 3.2.7 限制性内切酶酶切反应 | 第73-74页 |
| 3.2.8 重组表达的载体pET32a(+)-CgiA2_Ce的构建 | 第74页 |
| 3.2.9 重组ι-卡拉胶酶CgiA2_Ce的表达和纯化 | 第74-75页 |
| 3.2.10 重组ι-卡拉胶酶CgiA2_Ce的酶学性质研究 | 第75-76页 |
| 3.2.11 重组酶酶促反应动力学参数的测定 | 第76-78页 |
| 3.2.12 重组ι-卡拉胶酶CgiA2_Ce降解方式及降解产物的研究 | 第78-79页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第79-91页 |
| 3.3.1 Cellulophaga sp.KL-A的全基因组序列分析及CgiA2_Ce序列比对分析 | 第79-82页 |
| 3.3.2 重组表达载体的体系构建 | 第82-84页 |
| 3.3.3 重组酶CgiA2_Ce的表达和分离纯化 | 第84-85页 |
| 3.3.4 重组ι-卡拉胶酶CgiA2_Ce酶学性质研究 | 第85-89页 |
| 3.3.5 重组酶CgiA2_Ce降解方式及降解产物的分析 | 第89-91页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第91-95页 |
| 第四章 总结与展望 | 第95-98页 |
| 参考文献 | 第98-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
