| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第8-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-28页 |
| 1. 抗菌肽 | 第12-19页 |
| 1.1 抗菌肽的分类 | 第12-14页 |
| 1.1.1 阴离子抗菌肽 | 第12页 |
| 1.1.2 阳离子多肽 | 第12-13页 |
| 1.1.3 含有特定氨基酸的阳离子抗菌肽 | 第13页 |
| 1.1.4 含有半胱氨酸的抗菌肽 | 第13页 |
| 1.1.5 一些大分子量蛋白的片段 | 第13-14页 |
| 1.2 影响抗菌肽活性和特异性的特点 | 第14页 |
| 1.3 抗菌肽的杀菌机制 | 第14-19页 |
| 2. Hepcidin | 第19-27页 |
| 2.1 Hepcidin 的功能 | 第19-21页 |
| 2.1.1 hepcidin 是一种抗菌肽 | 第19-20页 |
| 2.1.2 hepcidin 是一种铁调节激素 | 第20-21页 |
| 2.1.3 一种抗肿瘤多肽 | 第21页 |
| 2.2 Hepcidin 研究现状 | 第21-27页 |
| 3. 本文的研究目的和技术路线 | 第27-28页 |
| 3.1 研究目的 | 第27页 |
| 3.2 技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 斑马鱼 hepcidin-2 的特征及功能研究 | 第28-64页 |
| 1. 前言 | 第28页 |
| 2. 材料与方法 | 第28-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-31页 |
| 2.1.1 斑马鱼 | 第28页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验液的配制 | 第29-30页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.5 菌株与质粒 | 第31页 |
| 2.1.6 DNA 测序及引物合成 | 第31页 |
| 2.2 试验方法 | 第31-51页 |
| 2.2.1 性成熟斑马鱼总 RNA 的提取及 cDNA 的获得 | 第31-33页 |
| 2.2.2 斑马鱼 hepcidin 基因全长序列的克隆 | 第33-37页 |
| 2.2.3 序列与系统进化分析 | 第37页 |
| 2.2.4 斑马鱼 hepcidin-2 成熟蛋白原核表达 | 第37-45页 |
| 2.2.5 点突变实验 | 第45-47页 |
| 2.2.6 斑马鱼 hepcidin 重组蛋白及其突变体的 Western blot 检测 | 第47-48页 |
| 2.2.7 斑马鱼 hepcidin 及其突变体蛋白的抑菌能力 | 第48-49页 |
| 2.2.8 透射电镜实验 | 第49页 |
| 2.2.9 rHCD 与病原相关模式分子的结合 | 第49-51页 |
| 2.2.10 数据分析 | 第51页 |
| 3. 实验结果 | 第51-61页 |
| 3.1 成体斑马鱼总 RNA 的提取及 cDNA 模板的获得 | 第51页 |
| 3.2 斑马鱼 Hepcidin-2 基因 cDNA 序列的克隆 | 第51-52页 |
| 3.3 斑马鱼 hepcidin-2 序列分析和进化树分析 | 第52-54页 |
| 3.4 斑马鱼 hepcidin-2 重组蛋白 rHCD 的原核表达和纯化 | 第54-57页 |
| 3.4.1 重组质粒 pET-30a/hepcidin-2 的构建 | 第54-56页 |
| 3.4.2 斑马鱼重组蛋白 rHCD 在大肠杆菌的诱导表达和纯化 | 第56-57页 |
| 3.5 hepcidin-2 的点突变实验 | 第57-58页 |
| 3.7 rHCD 和 rmHCD 的抑菌活性 | 第58-59页 |
| 3.8 TEM 检验 rHCD 对细菌细胞壁的损坏作用 | 第59-60页 |
| 3.9 hepcidin-2 对 LPS、LTA 和 PGN 的结合 | 第60-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简历 | 第72-73页 |
| 发表的学术论文 | 第73-74页 |
