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小麦高光效相关基因功能分析及TaSCL14基因克隆与功能验证

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-11页
第一章 文献综述第16-31页
    1.1 作物高光效育种研究进展第16-20页
        1.1.1 作物高光效育种概念与意义第16页
        1.1.2 小麦高光效育种途径及进展第16-20页
    1.2 BSMV-VIGS沉默系统第20-23页
        1.2.1 BSMV-VIGS概述与机理第20-22页
        1.2.2 BSMV-VIGS在小麦基因功能研究中的优点第22页
        1.2.3 BSMV-VIGS在小麦基因功能研究中的应用第22-23页
    1.3 光氧化胁迫第23-24页
    1.4 叶绿素荧光第24-26页
        1.4.1 叶绿素荧光动力学的发现第24-25页
        1.4.2 叶绿素荧光动力学的测定及参数意义第25-26页
        1.4.3 叶绿素荧光动力学的应用第26页
    1.5 GRAS转录因子研究进展第26-28页
        1.5.1 GRAS转录因子结构第26-27页
        1.5.2 GRAS转录因子生物学功能研究第27-28页
    1.6 立题意义及依据第28-29页
    1.7 研究技术路线第29-31页
第二章 利用BSMV-VIGS的方法研究小麦高光效相关基因功能第31-53页
    2.1 材料与方法第31-40页
        2.1.1 植物材料及培养方法第31-32页
        2.1.2 菌种、载体及试剂第32页
        2.1.3 总RNA提取和纯化第32-33页
        2.1.4 c DNA第一链合成第33页
        2.1.5 VIGS载体构建第33-37页
        2.1.6 BSMV-VIGS介导的基因沉默方法第37-38页
        2.1.7 基因沉默效果检测第38-39页
        2.1.8 叶绿素荧光参数测定第39页
        2.1.9 光氧化抗性处理第39页
        2.1.10 叶绿素含量分析第39页
        2.1.11 MDA含量和电导率测定第39-40页
        2.1.12 数据分析第40页
    2.2 结果与分析第40-49页
        2.2.1 VIGS 载体构建第40-41页
        2.2.2 基因沉默分析第41-42页
        2.2.3 BSMV 小麦对常温强光和低温强光的响应第42-43页
        2.2.4 BSMV 小麦对 DCMU 的响应第43-44页
        2.2.5 BSMV 小麦对 MV 的响应第44-45页
        2.2.6 BSMV 小麦对 H2O2的响应第45-46页
        2.2.7 BSMV 小麦叶片 MDA 含量和电导率第46-47页
        2.2.8 氧化剂处理后 BSMV 小麦叶片叶绿素含量变化第47-48页
        2.2.9 BSMV 小麦植株生物量的积累第48-49页
    2.3 结论与讨论第49-53页
第三章 小麦Ta SCL14 基因分离、定位及强光诱导表达分析第53-66页
    3.1 材料与方法第53-58页
        3.1.1 供试材料及培养条件第53页
        3.1.2 载体、试剂第53页
        3.1.3 强光处理方法第53-54页
        3.1.4 Real-time PCR第54页
        3.1.5 DNA提取(试剂盒提取)第54-55页
        3.1.6 基因克隆第55页
        3.1.7 亚细胞定位方法第55-57页
        3.1.8 染色体定位方法第57-58页
    3.2 结果与分析第58-64页
        3.2.1 Ta SCL14 基因克隆及序列分析第58-59页
        3.2.2 Ta SCL14 基因染色体定位第59-60页
        3.2.3 Ta SCL14 基因亚细胞定位第60-62页
        3.2.4 Ta SCL14 基因表达第62-64页
    3.3 结论与讨论第64-66页
第四章Ta SCL14 基因沉默小麦光合特性及衰老分析第66-79页
    4.1 材料与方法第66-70页
        4.1.1 植物材料第66页
        4.1.2 试剂及主要仪器第66页
        4.1.3 表型记录方法第66页
        4.1.4 光合特性分析方法第66-67页
        4.1.5 Rubisco酶活分析第67-69页
        4.1.6 SPAD值测定方法第69页
        4.1.7 黑暗诱导叶片衰老方法第69-70页
    4.2 结果与分析第70-76页
        4.2.1 Ta SCL14 基因沉默小麦植株表型动态分析第70-72页
        4.2.2 BSMV:Ta SCL14 小麦植株光合特性分析第72-75页
        4.2.3 BSMV:Ta SCL14 小麦Rubisco酶活分析第75页
        4.2.4 黑暗诱导BSMV:Ta SCL14 小麦叶片衰老特性分析第75-76页
    4.3 结论与讨论第76-79页
第五章 小麦Ta SCL14 基因在拟南芥中超量表达分析第79-100页
    5.1 材料与方法第79-85页
        5.1.1 植物材料与培养方法第79-80页
        5.1.2 菌株、载体、试剂第80页
        5.1.3 p BI121 载体构建第80-81页
        5.1.4 拟南芥转化第81-82页
        5.1.5 转基因拟南芥PCR鉴定第82-83页
        5.1.6 表型分析第83页
        5.1.7 根尖细胞观察第83-84页
        5.1.8 光合速率测定第84页
        5.1.9 强光处理、氧化剂处理第84页
        5.1.10 基因表达分析第84-85页
    5.2 结果与分析第85-97页
        5.2.1 p BI121::Ta SCL14 超表达载体构建第85-88页
        5.2.2 转Ta SCL14 基因植株分子检测第88-89页
        5.2.3 转基因拟南芥外源基因的表达分析第89页
        5.2.4 转基因拟南芥表型分析第89-91页
        5.2.5 转基因拟南芥根尖细胞形态第91-92页
        5.2.6 转基因拟南芥光合速率第92-94页
        5.2.7 转基因拟南芥光氧化抗性特性第94-97页
        5.2.8 转基因拟南芥中上调表达基因第97页
    5.3 结论与讨论第97-100页
第六章Ta SCL14 基因在小麦中转化及表达分析第100-107页
    6.1 材料与方法第100-102页
        6.1.1 材料第100页
        6.1.2 载体构建第100-101页
        6.1.3 T0和T1代转基因小麦检测方法第101-102页
        6.1.4 光合速率测定方法第102页
    6.2 结果与分析第102-106页
        6.2.1 p UBI::Ta SCL14 载体构建第102-103页
        6.2.2 T0和T1代转基因阳性小麦植株的特异性分子检测第103-105页
        6.2.3 转Ta SCL14 基因小麦的光合速率第105-106页
    6.3 结论与讨论第106-107页
第七章 结论与创新点第107-110页
    7.1 结论第107-109页
    7.2 创新点第109-110页
参考文献第110-120页
缩略词第120-122页
致谢第122-124页
作者简介第124页

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