| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 植物干细胞 | 第10-13页 |
| 1.1.1 植物根尖结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 植物根尖干细胞调控网络 | 第11-13页 |
| 1.2 WOX5的功能研究 | 第13-15页 |
| 1.2.1 WOX家族概况 | 第13页 |
| 1.2.2 WOX5的调控机制及功能研究 | 第13-15页 |
| 1.3 PLTs蛋白的功能研究 | 第15-18页 |
| 1.3.1 AP2家族概况 | 第15页 |
| 1.3.2 PLTs的调控机制及功能研究 | 第15-18页 |
| 1.4 酵母双杂交技术的原理 | 第18-19页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 1.6 技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 培养基和常规试剂的配置 | 第21-24页 |
| 2.1.4 引物 | 第24-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 酵母感受态制备 | 第26页 |
| 2.2.2 酵母文库滴度测定 | 第26页 |
| 2.2.3 酵母文库筛选 | 第26-27页 |
| 2.2.4 质粒转化及酵母感受态细胞制备 | 第27-28页 |
| 2.2.5 外源蛋白在烟草叶片中瞬时表达 | 第28页 |
| 2.2.6 CTAB法提取拟南芥基因组DNA | 第28-29页 |
| 2.2.7 拟南芥RNA提取及cDNA合成 | 第29页 |
| 2.2.8 EMS诱变建库 | 第29页 |
| 2.2.9 农杆菌介导花序侵染法转化拟南芥 | 第29页 |
| 2.2.10 GUS组织化学染色及光学显微分析 | 第29-30页 |
| 2.2.11 Lugol染色和碘化丙啶(PI)染色 | 第30页 |
| 2.2.12 Confocal显微分析 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-51页 |
| 3.1 pGBKT7-PLT2载体构建 | 第31-32页 |
| 3.2 PLT2相互作用蛋白筛选 | 第32-36页 |
| 3.2.1 pGBKT7-PLT2毒性和自激活检测 | 第32页 |
| 3.2.2 酵母文库滴度测定和相互作用蛋白筛选 | 第32-36页 |
| 3.3 酵母双杂交验证候选蛋白与PLT2蛋白相互作用 | 第36-38页 |
| 3.3.1 AD-HSP20和AD-DJA6载体构建 | 第36-37页 |
| 3.3.2 酵母验证HSP20和DJA6与PLT2相互作用 | 第37-38页 |
| 3.4 BiFC验证候选蛋白与PLT2相互作用 | 第38-40页 |
| 3.4.1 1300 -SPYCE-HSP20和1300-SPYCE-DAJ6载体构建 | 第38-39页 |
| 3.4.2 1300 -SPYNE-PLT2载体构建 | 第39-40页 |
| 3.4.3 BIFC验证蛋白HSP20和DJA6与PLT2相互作用 | 第40页 |
| 3.5 HSP20和DJA6基因表达特征分析 | 第40-43页 |
| 3.6 EMS突变体库筛选 | 第43-46页 |
| 3.6.1 plt1plt2突变体库初步筛选 | 第43-44页 |
| 3.6.2 突变体遗传稳定性鉴定 | 第44-45页 |
| 3.6.3 突变体表型分析 | 第45-46页 |
| 3.7 WOX5过量表达对不同器官发育的影响 | 第46-51页 |
| 3.7.1 pFP-WOX5-GFP载体构建 | 第46-47页 |
| 3.7.2 pFP-WOX5-GFP转基因植株表型分析 | 第47-51页 |
| 4 结论与讨论 | 第51-54页 |
| 4.1 讨论 | 第51-53页 |
| 4.2 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 A：作者攻读硕士学位期间发表论文及科研情况 | 第60-61页 |
| 附录 B：缩略词表 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
