缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
前言 | 第15-16页 |
文献回顾 | 第16-26页 |
实验一 低氧诱导神经元线粒体损伤 | 第26-39页 |
1 材料 | 第26-30页 |
1.1 主要试剂 | 第26-27页 |
1.2 动物及细胞 | 第27页 |
1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
1.4 主要实验用液的配制 | 第28-30页 |
2 方法 | 第30-33页 |
2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
2.2 细胞分组 | 第31页 |
2.3 细胞线粒体形态观察 | 第31页 |
2.4 Mito质粒的制备 | 第31-32页 |
2.5 免疫电镜检测线粒体形态变化 | 第32页 |
2.6 JC1染色检测线粒体膜电位 | 第32页 |
2.7 细胞蛋白提取和免疫蛋白印迹(western-blot)方法 | 第32-33页 |
3 结果 | 第33-36页 |
3.1 低氧对原代培养神经元线粒体形态的影响 | 第33-34页 |
3.2 低氧暴露对SH-SY5Y细胞线粒体形态的影响 | 第34-35页 |
3.3 低氧对神经元细胞线粒体超微结构的影响 | 第35页 |
3.4 低氧暴露对神经元细胞线粒体膜电位的影响 | 第35-36页 |
3.5 低氧暴露对神经元细胞线粒体相关蛋白表达的影响 | 第36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
实验二 HUMMR在低氧诱导线粒体损伤中的作用 | 第39-54页 |
1 材料 | 第39-43页 |
1.1 主要试剂 | 第39-40页 |
1.2 实验用细胞 | 第40页 |
1.3 主要仪器 | 第40-41页 |
1.4 主要实验用液的配制 | 第41-43页 |
2 方法 | 第43-44页 |
2.1 细胞培养 | 第43页 |
2.2 细胞分组 | 第43页 |
2.3 免疫电镜检测线粒体形态变化 | 第43页 |
2.4 细胞蛋白提取和免疫蛋白印迹(western-blot)方法 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-52页 |
3.1 低氧暴露对HUMMR蛋白表达的影响 | 第44页 |
3.2 HUMMR高表达质粒的构建 | 第44-46页 |
3.3 HUMMR高表达对低氧诱导的线粒体形态的影响 | 第46-50页 |
3.4 HUMMR-shRNA干涉质粒构建及慢病毒的包装及验证 | 第50页 |
3.5 HUMMR低表达对低氧诱导的线粒体形态的影响 | 第50-52页 |
3.6 HUMMR低表达对低氧诱导的线粒体相关蛋白表达的影响 | 第52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
实验三 MEF2D对低氧诱导HUMMR表达的调控作用 | 第54-65页 |
1 材料 | 第54-57页 |
1.1 主要试剂 | 第54-55页 |
1.2 实验用细胞 | 第55页 |
1.3 主要仪器 | 第55-56页 |
1.4 主要实验用液的配制 | 第56-57页 |
2 方法 | 第57-59页 |
2.1 细胞培养 | 第57页 |
2.2 细胞分组 | 第57-58页 |
2.3 MEF2D高表达细胞的制备 | 第58页 |
2.4 MEF2D高表达观察细胞中线粒体形态 | 第58页 |
2.5 JC1染色检测MEF2D高表达后线粒体膜电位 | 第58-59页 |
2.6 细胞蛋白提取和免疫蛋白印迹(western-blot)方法 | 第59页 |
3 结果 | 第59-62页 |
3.1 低氧对MEF2D表达的影响 | 第59页 |
3.2 构建高表达MEF2D细胞 | 第59-60页 |
3.3 低氧暴露对MEF2D高表达SH-SY5Y细胞粒体形态的影响 | 第60-61页 |
3.4 高表达MEF2D对线粒体相关蛋白表达的影响 | 第61页 |
3.5 低氧暴露对神经元细胞线粒体膜电位的影响 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-65页 |
小结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-75页 |
个人简历和研究成果 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |