| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-38页 |
| 前言 | 第15页 |
| 1 植物苯丙烷类物质研究简介 | 第15-38页 |
| 1.1 植物苯丙烷类物质的结构及功能 | 第15-23页 |
| 1.1.1 黄酮醇物质结构与功能 | 第18-19页 |
| 1.1.2 花青素结构与功能 | 第19-21页 |
| 1.1.3 酚酸类物质结构与功能 | 第21-23页 |
| 1.2 苯丙烷类物质的合成代谢调控 | 第23-27页 |
| 1.2.1 黄酮醇物质合成代谢调控 | 第24-25页 |
| 1.2.2 花青素物质合成代谢调控 | 第25-26页 |
| 1.2.3 咖啡酰奎尼酸合成代谢调控 | 第26-27页 |
| 1.3 MYB、bHLH、WD40类转录因子研究进展 | 第27-34页 |
| 1.3.1 MYB、bHLH、WD40类转录因子调控类黄酮合成及其DNA结合位点 | 第28-29页 |
| 1.3.2 MYB、bHLH、WD40类转录因子的进化及其他功能 | 第29-30页 |
| 1.3.3 MYB转录因子研究进展 | 第30-32页 |
| 1.3.3.1 AtMYB12转录因子研究进展 | 第30-31页 |
| 1.3.3.2 SlMYB12转录因子研究进展 | 第31-32页 |
| 1.3.3.3 Rosea1转录因子研究进展 | 第32页 |
| 1.3.4 bHLH转录因子研究进展 | 第32-33页 |
| 1.3.4.1 Delila转录因子研究进展 | 第33页 |
| 1.3.5 WD40转录因子研究进展 | 第33-34页 |
| 1.4 果实特异性启动子调控转录因子研究 | 第34-36页 |
| 1.4.1 番茄果实特异性启动子E8 | 第34-35页 |
| 1.4.2 番茄果实特异性启动子E4 | 第35-36页 |
| 1.4.3 番茄果实特异性启动子PG | 第36页 |
| 1.4.4 番茄果实特异性启动子 2A12 | 第36页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第36-38页 |
| 第二章 MYB、bHLH、WD40类转录因子对番茄中苯丙烷类物质合成调控研究 | 第38-60页 |
| 1 材料与方法 | 第38-47页 |
| 1.1 材料 | 第38-39页 |
| 1.1.1 供试植物材料 | 第38页 |
| 1.1.2 菌株和载体 | 第38页 |
| 1.1.3 酶与生化试剂 | 第38页 |
| 1.1.4 实验仪器 | 第38-39页 |
| 1.1.5 溶液及培养基的配制 | 第39页 |
| 1.2 实验方法 | 第39-47页 |
| 1.2.1 PCR引物设计 | 第39页 |
| 1.2.2 转基因植株阳性检测 | 第39页 |
| 1.2.3 RNA的抽提 | 第39-40页 |
| 1.2.4 反转录及定量PCR | 第40-41页 |
| 1.2.5 基因克隆及纯化 | 第41-43页 |
| 1.2.6 载体构建 | 第43页 |
| 1.2.7 感受态细胞的制备 | 第43-44页 |
| 1.2.8 热激转化大肠杆菌（DH5α） | 第44页 |
| 1.2.9 转化菌落阳性鉴定 | 第44页 |
| 1.2.10 质粒DNA的提取 | 第44-45页 |
| 1.2.11 酵母双杂交互作验证 | 第45页 |
| 1.2.12 序列测定 | 第45页 |
| 1.2.13 3种转AtMYB12、Ros1、Del基因番茄的转录组测序方案设计 | 第45-46页 |
| 1.2.14 苯丙烷类物质含量测定 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-58页 |
| 2.1 3种转AtMYB12、Ros1、Del基因番茄果皮中苯丙烷类物质含量检测 | 第47-49页 |
| 2.2 3种转AtMYB12、Ros1、Del基因番茄的转录组测序数据分析 | 第49-54页 |
| 2.3 qRT-PCR检测候选基因在转基因果实不同发育阶段表达量变化 | 第54-56页 |
| 2.4 候选转录因子与AtMYB12、Ros1的互作验证 | 第56-58页 |
| 2.4.1 候选转录因子基因与AtMYB12、Ros1基因的AD及BD载体构建 | 第57页 |
| 2.4.2 候选转录因子与AtMYB12、Ros1的互作验证 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 3.1 qRT-PCR验证候选转录因子对相应苯丙烷物质的调控功能 | 第58-59页 |
| 3.2 候选转录因子与AtMYB12及Ros1蛋白的互作验证 | 第59-60页 |
| 第三章 MYB类转录因子对龙葵花青素合成调控研究 | 第60-73页 |
| 1 材料与方法 | 第60-64页 |
| 1.1 材料及培养 | 第60页 |
| 1.1.1 供试植物材料 | 第60页 |
| 1.1.2 菌株和载体 | 第60页 |
| 1.2 实验方法 | 第60-64页 |
| 1.2.1 PCR引物设计 | 第60-61页 |
| 1.2.2 RNA的抽提 | 第61页 |
| 1.2.3 反转录及定量PCR | 第61页 |
| 1.2.4 RACE-PCR基因克隆 | 第61-62页 |
| 1.2.5 序列测定 | 第62页 |
| 1.2.6 电转化农杆菌（GV3101） | 第62页 |
| 1.2.7 转化菌落的阳性鉴定 | 第62-63页 |
| 1.2.8 农杆菌介导的瞬时表达 | 第63页 |
| 1.2.9 花青素含量测定 | 第63页 |
| 1.2.10 花青素提取纯化 | 第63-64页 |
| 1.2.11 花青素组分质谱鉴定 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-71页 |
| 2.1 龙葵鲜果中花青素含量及抗氧化分析 | 第64-65页 |
| 2.2 龙葵果实花青素提取物的纯化 | 第65页 |
| 2.3 龙葵果实花青素组分的质谱鉴定 | 第65-68页 |
| 2.4 龙葵SnMYB基因的克隆及功能预测 | 第68-69页 |
| 2.5 龙葵SnMYB基因对花青素调控功能验证 | 第69-71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| 3.1 龙葵果实花青素含量及抗氧化分析 | 第71页 |
| 3.2 龙葵花青素组分鉴定 | 第71-72页 |
| 3.3 SnMYB基因的克隆及功能分析 | 第72页 |
| 3.4 SnMYB基因对花青素合成调控功能验证 | 第72-73页 |
| 第四章 不同果实特异性启动子驱动AtMYB12转录因子调控番茄中苯丙烷物质合成研究 | 第73-84页 |
| 1 材料与方法 | 第73-76页 |
| 1.1 材料 | 第73页 |
| 1.1.1 供试植物材料 | 第73页 |
| 1.2 实验方法 | 第73-76页 |
| 1.2.1 PCR引物设计 | 第73页 |
| 1.2.2 RNA的抽提 | 第73-74页 |
| 1.2.3 反转录及定量PCR | 第74页 |
| 1.2.4 基因克隆及纯化 | 第74页 |
| 1.2.5 载体构建 | 第74-75页 |
| 1.2.6 序列测定 | 第75页 |
| 1.2.7 农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第75页 |
| 1.2.8 DNA提取及转基因植株阳性检测 | 第75页 |
| 1.2.9 转基因植株中苯丙烷物质含量检测 | 第75-76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-82页 |
| 2.1 不同启动子基因植物表达载体的构建 | 第76-78页 |
| 2.1.1 不同启动子PG、2A12、E4、E8S、E8L基因及AtMYB12基因的克隆 | 第76页 |
| 2.1.2 过渡载体pX6-PG、pX6-2A12、pX6-E4、pX6-E8S、pX6-E8L的构建 | 第76页 |
| 2.1.3 番茄表达载体的构建 | 第76-77页 |
| 2.1.4 番茄表达载体转化农杆菌（AGL I） | 第77-78页 |
| 2.2 农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第78-79页 |
| 2.3 转基因番茄果实苯丙烷物质含量检测 | 第79-81页 |
| 2.4 转基因番茄果实中AtMYB12基因表达量分析 | 第81-82页 |
| 3 讨论 | 第82-84页 |
| 3.1 不同启动子驱动AtMYB12基因对不同苯丙烷类物质调控差异 | 第82页 |
| 3.2 不同启动子驱动AtMYB12基因表达效率差异 | 第82-84页 |
| 第五章 番茄SlMYB12转录因子对不同番茄品种中黄酮醇物质合成调控研究 | 第84-96页 |
| 1 材料与方法 | 第84-88页 |
| 1.1 材料 | 第84页 |
| 1.1.1 供试植物材料 | 第84页 |
| 1.2 实验方法 | 第84-88页 |
| 1.2.1 PCR引物设计 | 第84-85页 |
| 1.2.2 RNA的抽提 | 第85页 |
| 1.2.3 反转录及定量PCR | 第85-86页 |
| 1.2.4 DNA抽取 | 第86页 |
| 1.2.5 转基因植株阳性检测 | 第86页 |
| 1.2.6 转基因植物中黄酮醇物质含量检测 | 第86-87页 |
| 1.2.7 转基因番茄抗氧化能力分析 | 第87-88页 |
| 2 结果与分析 | 第88-94页 |
| 2.1 3种不同品种野生型番茄果实差异比较 | 第88-90页 |
| 2.2 3种不同品种转SlMYB12基因番茄差异比较 | 第90-94页 |
| 3 讨论 | 第94-96页 |
| 3.1 3种不同品种野生型番茄果实差异比较 | 第94-95页 |
| 3.2 3种转SlMYB12基因番茄果实差异比较 | 第95-96页 |
| 结论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-112页 |
| 附录Ⅰ | 第112-113页 |
| 附录Ⅱ | 第113-114页 |
| 附录Ⅲ | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 攻读博士期间发表论文及申请专利情况 | 第116页 |
