摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-18页 |
1.1 棉花的概述及棉花黄萎病研究概况 | 第9页 |
1.2 植物的抗病机制 | 第9-12页 |
1.3 水杨酸信号路径 | 第12-14页 |
1.4 茉莉酸信号路径 | 第14-16页 |
1.5 乙烯信号路径 | 第16页 |
1.6 细胞色素P450的研究 | 第16-18页 |
2 研究意义 | 第18-19页 |
3. 材料和方法 | 第19-30页 |
3.1 实验材料 | 第19页 |
3.1.1 植物体材料 | 第19页 |
3.1.2 质粒与菌株 | 第19页 |
3.2 实验方法 | 第19-30页 |
3.2.1 RACE技术获得基因的全长序列 | 第19-20页 |
3.2.2 GenomeWalking克隆基因的启动子 | 第20-22页 |
3.2.3 RNAi载体的构建 | 第22-24页 |
3.2.4 超量表达载体的构建 | 第24-25页 |
3.2.5 融合蛋白表达载体构建 | 第25-26页 |
3.2.6 启动子载体的构建 | 第26页 |
3.2.7 DNA的提取及纯化 | 第26页 |
3.2.8 RNA的提取及纯化 | 第26页 |
3.2.9 Southern杂交 | 第26-27页 |
3.2.10 Real-time PCR表达分析 | 第27-29页 |
3.2.11 棉花下胚轴的遗传转化 | 第29页 |
3.2.12 洋葱表皮细胞的瞬时表达 | 第29-30页 |
4 结果分析 | 第30-43页 |
4.1 GbCYP82S基因结构分析 | 第30-33页 |
4.1.1 基因全长的获得及分析 | 第30页 |
4.1.2 GbCYP82S保守结构域分析 | 第30-31页 |
4.1.3 GbCYP82S的3'UTR的结构分析 | 第31-32页 |
4.1.4 启动子分析 | 第32-33页 |
4.2 GbCYP82S基因在棉花抗病反应中的表达分析及组织表达模式分析 | 第33-34页 |
4.3 GbCYP82S基因的亚细胞定位 | 第34-35页 |
4.4 载体构建及转基因植株的鉴定 | 第35-40页 |
4.4.1 载体构建及遗传转化 | 第35页 |
4.4.2 转基因植株的获得与表型变化 | 第35-39页 |
4.4.3 转基因植株的分子鉴定 | 第39-40页 |
4.5 GbCYP82S在棉花抗病反应中的功能分析 | 第40-43页 |
4.5.1 GbCYP82S与抗病反应信号分子JA的关系 | 第40-42页 |
4.5.2 GbCYP82S在棉花中被抑制后SAR相关基因的表达变化 | 第42-43页 |
5 讨论 | 第43-47页 |
5.1 GbCYP82S与类病斑的关系 | 第43-45页 |
5.2 GbCYP82S与茉莉酸的关系 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
致谢 | 第51页 |