| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-49页 |
| 1.1 被子植物的受精 | 第14-18页 |
| 1.1.1 双受精研究的历史追溯 | 第14-15页 |
| 1.1.2 引子 | 第15页 |
| 1.1.3 参与受精过程的主要生殖单位 | 第15-17页 |
| 1.1.4 受精的过程 | 第17-18页 |
| 1.2 花粉管的生长与导向 | 第18-30页 |
| 1.2.1 花粉管的基本结构 | 第18-20页 |
| 1.2.2 花粉管的生长特点和调节机制 | 第20-22页 |
| 1.2.3 花粉管的导向过程和研究进展 | 第22-30页 |
| 1.2.3.1 花粉管的生长路径 | 第23-24页 |
| 1.2.3.2 花粉管的多重导向信号 | 第24-29页 |
| 1.2.3.3 γ-氨基顶端在花粉管生长和导向过程中的作用 | 第29-30页 |
| 1.3 γ-氨基丁酸(GABA)在植物生长与发育中的作用 | 第30-41页 |
| 1.3.1 GABA在植物中的代谢 | 第31-33页 |
| 1.3.2 GABA在植物中的代谢调节机制 | 第33-36页 |
| 1.3.3 GABA在植物细胞内和细胞间的转运调节机制 | 第36-37页 |
| 1.3.4 GABA在植物生长发育过程中的角色和功能 | 第37-38页 |
| 1.3.5 GABA在植物中做为信号分子并存在受体的依据 | 第38-41页 |
| 1.4 GABA在动物中的角色和作用机制 | 第41-45页 |
| 1.4.1 GABA在动物中的分布,代谢和转运 | 第42-43页 |
| 1.4.2 GABA在动物中受体类型 | 第43-45页 |
| 1.4.3 GABA在动物中的功能 | 第45页 |
| 1.5 本论文的研究内容和研究方法 | 第45-48页 |
| 1.6 本论文研究的创新点和主要贡献 | 第48-49页 |
| 第二章 动物中GABA受体拮抗剂荧光探针和烟草原生质体结合实验 | 第49-58页 |
| 2.1 前言 | 第49-50页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第50-53页 |
| 烟草花粉原生质体的分离与收集 | 第50-51页 |
| 荧光探针的制备流程 | 第51-52页 |
| 烟草叶肉原生质体的分离和收集 | 第52页 |
| 小鼠脑组织冰冻切片 | 第52页 |
| 小鼠脑组织冰冻切片和CGP64213突光探针标记实验 | 第52页 |
| 原生质体和CGP64213荧光探针标记实验 | 第52-53页 |
| 2.3 实验结果 | 第53-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-58页 |
| 第三章 拟南芥中G蛋白偶联受体的表达与纯化 | 第58-74页 |
| 3.1 前言 | 第58-60页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第60-69页 |
| 拟南芥花器官RNA的提取 | 第61-62页 |
| 琼脂糖凝胶电泳，检测RNA的质量 | 第62页 |
| 反转录cDNA的合成 | 第62页 |
| 目的基因CDS全长的克隆 | 第62-64页 |
| cDNA片段和载体片段的酶切与连接 | 第64页 |
| 大肠杆菌BL21表达菌株感受态的制备 | 第64-65页 |
| Inone法制备大肠杆菌DH5a菌株超级感受态 | 第65-66页 |
| 大肠杆菌DH5a株系和BL21表达菌株的热激转化 | 第66页 |
| 原核表达蛋白程序 | 第66-67页 |
| 带组氨酸标签的重组表达蛋白的亲和纯化 | 第67页 |
| 亲和纯化获得特异性的重组蛋白 | 第67-68页 |
| 蛋白质SDS-PAGE (聚丙稀酷胺凝胶电泳） | 第68页 |
| PAGE胶电泳以及考马斯亮蓝染色检测 | 第68-69页 |
| 3.3 实验结果 | 第69-72页 |
| 3.4 本章讨论 | 第72-74页 |
| 第四章 磁珠亲和层析寻找植物中的GABA受体和结合蛋白 | 第74-95页 |
| 4.1 前言 | 第74-77页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第77-84页 |
| 蛋白的原核表达和纯化 | 第77页 |
| 蛋白质印记(WESTERN BLOT)操作流程 | 第77-79页 |
| SIMAG-Carboxy磁珠和GABA的偶联 | 第79-80页 |
| 拟南芥总蛋白的提取 | 第80-81页 |
| SIMAG-Carboxy-GABA磁珠的结合实验 | 第81-82页 |
| PAGE胶银染色方法 | 第82页 |
| Sulfo-NHS-LC-Biotin 和 GABA的偶联 | 第82页 |
| CM5/SA芯片重生 | 第82-83页 |
| CMS/SA-GABA芯片的制作 | 第83页 |
| BIACORE-X分子相互作用仪操作 | 第83-84页 |
| 4.3 实验结果 | 第84-91页 |
| 4.4 本章讨论 | 第91-95页 |
| 第五章 GABA调节花粉原生质体膜表面Ca~(2+)通道活性 | 第95-105页 |
| 5.1 前言 | 第95-96页 |
| 5.2 实验材料和方法 | 第96-98页 |
| 拟南芥和烟草花粉原生质体的制备 | 第97页 |
| 拟南芥和烟草花粉原生质体的全细胞膜片钳实验 | 第97-98页 |
| 5.3 实验结果 | 第98-102页 |
| 5.4 讨论 | 第102-105页 |
| 第六章 烟草花柱道中存在的GABA浓度梯度 | 第105-111页 |
| 6.1 前言 | 第105-107页 |
| 6.2 实验材料和方法 | 第107页 |
| 烟草花柱道中GABA含量的HPLC测定 | 第107页 |
| 6.3 实验结果 | 第107-109页 |
| 6.4 讨论 | 第109-111页 |
| 第八章 总讨论 | 第111-120页 |
| 参考文献 | 第120-131页 |
| 在读期间发表和整理的论文 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132页 |
