摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-28页 |
1.1 小麦返白系研究概况 | 第13-15页 |
1.1.1 关于白化 | 第13页 |
1.1.2 小麦返白系 | 第13页 |
1.1.3 返白期间的蛋白、氨基酸代谢的变化 | 第13-14页 |
1.1.4 返白期间的色素代谢变化 | 第14页 |
1.1.5 环境对小麦返白系表达效应的影响研究 | 第14页 |
1.1.6 返白系叶绿体超微结构变化 | 第14-15页 |
1.2 冷驯化相关基因的研究进展 | 第15-22页 |
1.2.1 小麦中的冷驯化相关基因 | 第16-21页 |
1.2.2 小麦中冷驯化过程中基因转录调控途径 | 第21-22页 |
1.3 春化作用 | 第22-24页 |
1.4 基因芯片技术概述 | 第24-25页 |
1.4.1 基因芯片发展简介 | 第24页 |
1.4.2 基因芯片原理 | 第24-25页 |
1.5 数字表达谱 | 第25-26页 |
1.5.1 数字表达谱的简介 | 第25页 |
1.5.2 数字表达谱的原理 | 第25-26页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
1.7 实验技术路线 | 第27-28页 |
第二章 低温条件下小麦返白系及其亲本矮变1 号小麦叶片的基因芯片数据分析 | 第28-36页 |
2.1 材料 | 第28页 |
2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.1.2 常用的试剂 | 第28页 |
2.1.3 主要仪器 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-30页 |
2.2.1 基因芯片 | 第28页 |
2.2.2 材料的准备 | 第28页 |
2.2.3 小麦心叶总RNA 的抽提、纯化及检测 | 第28-29页 |
2.2.4 总RNA 的紫外定量和检测 | 第29页 |
2.2.5 总RNA 的电泳质检 | 第29页 |
2.2.6 基因芯片主要实验流程 | 第29页 |
2.2.7 表达差异基因的筛选 | 第29-30页 |
2.3 实验结果与分析 | 第30-36页 |
2.3.1 总 RNA 样品检测 | 第30页 |
2.3.2 不同低温处理时间的心叶基因的表达差异分析 | 第30-31页 |
2.3.3 低温胁迫下A 与F 心叶基因表达谱差异 | 第31页 |
2.3.4 基因芯片中检测到的冷驯化相关基因 | 第31-32页 |
2.3.5 基因芯片中检测到的材料间表达有差异的冷驯化相关基因 | 第32-34页 |
2.3.6 基因芯片中筛选出的差异表达基因 | 第34-36页 |
第三章 低温条件下小麦返白系及亲本矮变1 号的叶片基因数字表达谱数据分析 | 第36-43页 |
3.1 材料 | 第36页 |
3.1.1 植物材料 | 第36页 |
3.1.2 常用的试剂 | 第36页 |
3.1.3 主要仪器 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-37页 |
3.2.1 数字表达谱 | 第36页 |
3.2.2 材料的准备 | 第36页 |
3.2.3 小麦心叶总RNA 的抽提、纯化及检测 | 第36页 |
3.2.4 总RNA 的定量和质量检测 | 第36页 |
3.2.5 电泳质检 | 第36页 |
3.2.6 数字表达谱的主要实验流程 | 第36-37页 |
3.2.7 表达差异基因的筛选 | 第37页 |
3.3 实验结果与分析 | 第37-43页 |
3.3.1 总 RNA 样品检测 | 第37页 |
3.3.2 数字表达谱中检测到的基因 | 第37-38页 |
3.3.3 低温胁迫下A 与F 心叶基因表达谱差异 | 第38-40页 |
3.3.4 数字表达谱中检测到的冷驯化相关基因 | 第40-41页 |
3.3.5 数字表达谱中检测有显著差异的冷驯化相关基因 | 第41页 |
3.3.6 基因芯片和数字表达谱中结果的比较 | 第41-43页 |
第四章 表达差异基因的验证 | 第43-62页 |
4.1 材料 | 第43-44页 |
4.1.1 植物材料 | 第43页 |
4.1.2 常用的试剂及配置 | 第43-44页 |
4.1.3 主要仪器 | 第44页 |
4.2 实验方法 | 第44-52页 |
4.2.1 材料的准备 | 第44页 |
4.2.2 小麦心叶总RNA 的抽提、纯化及检测 | 第44-45页 |
4.2.3 紫外定量和检测 | 第45页 |
4.2.4 电泳检测总 RNA | 第45页 |
4.2.5 反转录总RNA | 第45-46页 |
4.2.6 RT-PCR 引物设计 | 第46-47页 |
4.2.7 以β-actin 为内参,调整模板的量 | 第47-48页 |
4.2.8 半定量 PCR 分析 | 第48页 |
4.2.9 qRT-PCR 分析 | 第48-49页 |
4.2.10 小麦基因组DNA 的提取 | 第49-50页 |
4.2.11 Ve12 基因及其启动子引物设计 | 第50页 |
4.2.12 Ve12 基因相关研究 | 第50-52页 |
4.3 结果与分析 | 第52-62页 |
4.3.1 总 RNA 样品检测 | 第52-53页 |
4.3.2 半定量 PCR 验证基因的表达谱 | 第53-55页 |
4.3.3 qRT-PCR 验证基因芯片和数字表达谱 | 第55-59页 |
4.3.4 基因组 DNA 样品检测 | 第59-60页 |
4.3.5 返白系中 Ve12 基因的初步研究结果 | 第60-62页 |
第五章 讨论 | 第62-65页 |
5.1 取样时间点及取样部的选择 | 第62页 |
5.2 基因芯片中的数据分析 | 第62-63页 |
5.3 数字表达谱中的数据分析 | 第63页 |
5.4 基因芯片和数字表达谱共同检测到的冷驯化相关基因 | 第63-64页 |
5.5 基因芯片和数字表达谱数据的验证通过 | 第64-65页 |
第六章 结论与创新点 | 第65-66页 |
6.1 结论 | 第65页 |
6.2 本研究的主要创新点 | 第65页 |
6.3 下一步工作设想 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
附录 | 第73-75页 |
缩略词 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
作者简介 | 第77页 |