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柑橘砧木耐缺硼胁迫能力差异的分子机理研究

摘要第8-10页
Abstract第10-12页
缩略词表第13-15页
第一章 前言第15-40页
    1 课题的提出第15-19页
    2 前人的研究进展第19-38页
        2.1 植物硼营养的生理功能第19-24页
            2.1.1 硼糖复合物和糖转运第19页
            2.1.2 硼与细胞壁的结构和功能第19-22页
            2.1.3 硼与细胞膜第22-23页
            2.1.4 硼与激素代谢第23页
            2.1.5 硼与酚类化合物代谢第23-24页
            2.1.6 硼与其他矿质元素的代谢第24页
        2.2 硼吸收与跨膜转运机制第24-29页
            2.2.1 硼跨膜转运模式第24-25页
            2.2.2 硼的跨膜转运与水通道蛋白第25-27页
            2.2.3 硼的跨膜转运与硼转运蛋白第27-29页
        2.3 硼与转录水平调控第29-31页
            2.3.1 硼吸收和转运相关基因第29-30页
            2.3.2 细胞壁合成与修饰相关基因第30页
            2.3.3 氮素代谢相关基因第30页
            2.3.4 胁迫响应相关基因第30-31页
        2.4 柑橘硼营养研究进展第31-33页
            2.4.1 缺硼和硼毒害胁迫对柑橘叶片形态的影响第32页
            2.4.2 缺硼和硼毒害胁迫对柑橘其他矿质元素代谢的影响第32-33页
            2.4.3 缺硼和硼毒害胁迫对柑橘叶片色素含量和光合作用的影响第33页
            2.4.4 缺硼和硼毒害胁迫对柑橘根系生长发育的影响第33页
        2.5 抑制差减杂交结合cDNA芯片技术在植物抗逆研究中的应用第33-38页
            2.5.1 抑制差减杂交技术原理和特点第33-36页
            2.5.2 抑制差减杂交技术在植物研究中的应用第36-37页
            2.5.3 基因芯片结合SSH技术在植物逆境研究中的应用第37-38页
    3 本研究的目的、意义和内容第38-40页
第二章 不同类型柑橘砧木耐缺硼能力差异的生理机制第40-62页
    1 材料与方法第42-44页
        1.1 试验材料及其培养第42页
        1.2 试验设计第42页
        1.3 采样与测定第42-44页
            1.3.1 植株各部位生物量的测定第42页
            1.3.2 植株各部位矿质元素含量的测定第42-43页
            1.3.3 植株叶绿素和叶面积的测定第43页
            1.3.4 植株根系型态分析第43-44页
        1.4 实验数据的统计分析和作图第44页
    2 结果与分析第44-55页
        2.1 缺硼胁迫下的柑橘砧木表型第44-45页
        2.2 植株生长参数第45-49页
        2.3 植株不同部位的硼含量第49-50页
        2.4 植株叶片色素含量第50-51页
        2.5 植株根系形态分析第51页
        2.6 植株叶和根中其他矿质营养含量分析第51-55页
            2.6.1 叶中其他矿质营养含量第51-55页
            2.6.2 根中其他矿质营养含量第55页
    3 讨论第55-60页
        3.1 缺硼条件下的柑橘砧木表型第55-56页
        3.2 缺硼对柑橘砧木根系形态的影响第56-58页
        3.3 缺硼胁迫下的生理表现与矿质元素含量变化的关系第58-59页
        3.4 不同柑橘砧木的耐缺硼胁迫能力差异分析第59-60页
    4 结论第60-62页
第三章 柑橘砧木缺硼胁迫抑制差减杂交文库构建和生物信息学分析第62-89页
    1 材料与方法第63-66页
        1.1 试验材料第63页
        1.2 实生苗的培育第63页
        1.3 试验设计和采样第63-64页
            1.3.1 试验Ⅰ的设计和采样第63页
            1.3.2 试验Ⅱ的设计和采样第63-64页
        1.4 相关生理指标的测定第64页
        1.5 总RNA的提取与mRNA的分离纯化第64-65页
            1.5.1 总RNA的提取纯化和检测第64-65页
            1.5.2 mRNA的分离纯化和检测第65页
        1.6 抑制性差减杂交文库构建第65页
        1.7 差减文库的cDNA芯片杂交筛选第65页
        1.8 生物信息学分析第65页
        1.9 Real-time PCR测定基因的相对表达量第65-66页
    2 结果与分析第66-83页
        2.1 枳和枳橙对缺硼胁迫的差异生理表现第66-68页
        2.2 植株根总RNA的提取和mRNA分离纯化及其质量检测第68-69页
        2.3 抑制差减杂交文库(SSH-cDNA)构建第69-71页
            2.3.1 cDNA双链合成和RsaI酶切结果第69页
            2.3.2 接头连接效率检测结果第69-70页
            2.3.3 蓝白斑筛选结果第70页
            2.3.4 差减效率检测第70-71页
        2.4 抑制差减杂交文库(SSH-cDNA)质量检测第71页
            2.4.1 差减文库的插入片段检测第71页
            2.4.2 差减文库库容第71页
        2.5 差异基因的芯片筛选第71-74页
            2.5.1 差减产物的PCR克隆第71-72页
            2.5.2 RNA的提取及其质量检测第72页
            2.5.3 芯片杂交第72-74页
        2.6 生物信息学分析第74-76页
        2.7 芯片结果的验证第76-77页
        2.8 缺硼影响细胞壁代谢相关基因的表达第77-79页
        2.9 缺硼影响跨膜转运蛋白基因的表达第79-80页
        2.10 缺硼影响的代谢途径第80-83页
    3 讨论第83-87页
        3.1 生理表现与柑橘砧木的耐缺硼能力差异第83-84页
        3.2 细胞壁代谢与柑橘砧木的耐缺硼胁迫能力的差异第84-85页
        3.3 水通道蛋白与柑橘砧木的耐缺硼胁迫能力差异第85-86页
        3.4 代谢途径与柑橘砧木的耐缺硼胁迫能力第86-87页
            3.4.1 木质素代谢与柑橘砧木的耐缺硼胁迫能力第86-87页
            3.4.2 氮碳代谢与柑橘砧木的耐缺硼胁迫能力的差异第87页
    4 结论第87-89页
参考文献第89-106页
附录Ⅰ 相关实验方法(一):柑橘水培规程第106-122页
附录Ⅱ 相关试验结果第122-127页
附录Ⅲ 课题资助项目第127页
附录Ⅳ 作者简介第127页
附录Ⅴ 攻读博士学位期间发表的论文第127-129页
致谢第129页

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