| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-21页 |
| 引言 | 第21-23页 |
| 第一章 文献综述 | 第23-44页 |
| ·环境胁迫的概念及分类 | 第23-24页 |
| ·主要环境胁迫因子对甲壳动物的影响 | 第24-28页 |
| ·温度胁迫 | 第24-25页 |
| ·盐度胁迫 | 第25页 |
| ·组织缺氧胁迫 | 第25-26页 |
| ·氨态氮胁迫 | 第26-27页 |
| ·pH 胁迫 | 第27-28页 |
| ·分子生物学技术研究在甲壳动物胁迫研究的应用 | 第28-30页 |
| ·目的基因克隆与表达 | 第28-29页 |
| ·功能基因组研究 | 第29-30页 |
| ·甲壳动物细胞凋亡的研究进展 | 第30-37页 |
| ·细胞凋亡的途径 | 第30-32页 |
| ·甲壳动物中的细胞凋亡相关因子 | 第32-37页 |
| ·氧化胁迫与细胞凋亡 | 第37-41页 |
| ·本研究的目的、意义、主要内容及技术路线 | 第41-44页 |
| ·研究目的及意义 | 第41-42页 |
| ·主要内容 | 第42页 |
| ·技术路线 | 第42-44页 |
| 第二章 中国对虾细胞凋亡因子Caspase 基因cDNA 克隆和表达分析 | 第44-83页 |
| ·材料与方法 | 第45-63页 |
| ·实验材料 | 第45-47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·中国对虾Caspase 基因中间片段克隆 | 第49-54页 |
| ·Caspase 基因的3′RACE 和5′RACE | 第54-58页 |
| ·生物信息学分析 | 第58-59页 |
| ·pH 胁迫后中国对虾Caspase 基因组织表达分析 | 第59-60页 |
| ·pH 胁迫中国对虾肝胰腺组织TUNEL 分析 | 第60-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-78页 |
| ·总RNA 提取及检测 | 第63页 |
| ·中国对虾Caspase 基因保守序列、3′RACE 和5′RACE 的克隆 | 第63-64页 |
| ·中国对虾Caspase 基因的序列分析及氨基酸序列分析 | 第64-66页 |
| ·中国对虾Caspase 蛋白的疏水性分析 | 第66-67页 |
| ·中国对虾Caspase 蛋白二级结构预测 | 第67-68页 |
| ·中国对虾Caspase 基因与其他物种Caspase 的多序列比对 | 第68-70页 |
| ·中国对虾Caspase 与其他物种Caspase 的系统进化分析 | 第70页 |
| ·pH 胁迫中国对虾后各组织Caspase 基因的表达变化 | 第70-78页 |
| ·讨论 | 第78-83页 |
| ·中国对虾Caspase 基因的克隆及序列分析 | 第79-80页 |
| ·pH 胁迫对中国对虾Caspase 基因表达的影响 | 第80-81页 |
| ·pH 胁迫对中国对虾肝胰腺组织TUNEL 分析 | 第81-83页 |
| 第三章 中国对虾Caspase 基因的重组表达、分离纯化和多克隆抗体的制备 | 第83-107页 |
| ·材料与方法 | 第83-97页 |
| ·实验材料 | 第83-88页 |
| ·方法 | 第88-93页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第93-94页 |
| ·免疫印迹（Western blotting）检测 | 第94-97页 |
| ·结果与分析 | 第97-105页 |
| ·中国对虾Caspase 基因开放式阅读框克隆 | 第97-98页 |
| ·中国对虾Caspase 序列稀有密码子分析 | 第98-100页 |
| ·中国对虾Caspase 基因在E.Coli 中的表达 | 第100-101页 |
| ·Caspase 重组蛋白的MALDI-TOF-MS 质谱鉴定 | 第101-102页 |
| ·重组表达菌体的扩大培养 | 第102页 |
| ·Caspase 重组蛋白的纯化 | 第102页 |
| ·Caspase 重组蛋白的多克隆抗体效价分析 | 第102-103页 |
| ·抗血清的特异性Western-blot 检测 | 第103-104页 |
| ·中国对虾各组织Caspase 蛋白分析 | 第104-105页 |
| ·讨论 | 第105-107页 |
| 第四章 pH 胁迫对中国对虾抗氧化系统及HSP90 基因表达的影响 | 第107-121页 |
| ·材料与方法 | 第107-112页 |
| ·试剂 | 第107-108页 |
| ·仪器 | 第108页 |
| ·实验动物 | 第108页 |
| ·实验方法 | 第108-112页 |
| ·统计分析 | 第112页 |
| ·结果与分析 | 第112-118页 |
| ·牛血清白蛋白标准曲线的制备 | 第112-113页 |
| ·pH 胁迫对中国对虾抗氧化酶活力的影响 | 第113-115页 |
| ·pH 胁迫对中国对虾抗氧化酶基因表达的影响 | 第115-118页 |
| ·讨论 | 第118-121页 |
| ·pH 胁迫对中国对虾 T-AOC、抗超氧阴离子和 CAT 活力的影响 | 第118-119页 |
| ·pH 胁迫对中国对虾CAT 和Prx 基因表达的影响 | 第119-120页 |
| ·pH 胁迫对中国对虾HSP90 基因表达的影响 | 第120-121页 |
| 第五章 氨氮胁迫对中国对虾抗氧化系统、血淋巴氨氮成分及HSP90 基因表达的影响 | 第121-150页 |
| ·材料与方法 | 第122-125页 |
| ·试剂 | 第122页 |
| ·仪器 | 第122页 |
| ·实验动物 | 第122页 |
| ·实验方法 | 第122-125页 |
| ·统计分析 | 第125页 |
| ·结果与分析 | 第125-142页 |
| ·氨氮浓度测定标准曲线 | 第125页 |
| ·各组氨氮浓度和分子氨浓度随时间的变化情况 | 第125-126页 |
| ·氨氮胁迫对中国对虾血淋巴氨氮、尿素氮含量的影响 | 第126-128页 |
| ·氨氮胁迫对中国对虾ATP 酶活力的影响 | 第128-131页 |
| ·氨氮胁迫对中国对虾抗氧化酶活力的影响 | 第131-135页 |
| ·氨氮胁迫对中国对虾抗氧化基因表达的影响 | 第135-138页 |
| ·氨氮胁迫对中国对虾Caspase 和HSP90 基因表达的影响 | 第138-142页 |
| ·讨论 | 第142-150页 |
| ·养殖水体氨氮浓度的变化 | 第142-143页 |
| ·氨氮胁迫对中国对虾血淋巴氨氮、尿素氮含量的影响 | 第143-144页 |
| ·氨氮胁迫对中国对虾ATP 酶活力的影响 | 第144-146页 |
| ·氨氮胁迫对中国对虾抗氧化系统的影响 | 第146-147页 |
| ·氨氮胁迫对中国对虾Caspase 基因和HSP90 基因表达的影响 | 第147-150页 |
| 结论 | 第150-151页 |
| 参考文献 | 第151-170页 |
| 博士期间发表的文章及其他成果情况 | 第170-171页 |
| 致谢 | 第171页 |
