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多头带绦虫Tm18基因的克隆与原核表达

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-6页
目录第6-8页
第一章 文献综述 动物绦虫蚴病疫苗研究进展第8-20页
 1 天然抗原第8-10页
   ·六钩蚴及其分泌/排泄物第8-9页
   ·原头蚴及其组分抗原第9-10页
   ·细胞苗第10页
 2 基因工程疫苗第10-19页
   ·重组蛋白疫苗第11-17页
     ·45w家族第11-13页
     ·16kDa和18kDa抗原第13-14页
     ·Eg95和Em95第14-15页
     ·多肽疫苗第15-17页
   ·核酸疫苗第17-19页
 3 疫苗研究展望第19页
 4 本试验的目的意义第19-20页
第二章 多头带绦虫Tm18抗原基因的克隆和原核表达第20-53页
 1 材料和方法第20-33页
   ·材料第20-23页
     ·虫株和实验动物第20页
     ·主要试剂第20-21页
     ·菌株及质粒载体第21页
     ·主要仪器设备第21页
     ·培养基及常用液体的配制第21-23页
     ·主要生物信息数据库和计算机软件第23页
   ·试验方法第23-33页
     ·多头带绦虫虫卵的收集和六钩蚴总RNA的提取第23-24页
     ·多头带绦虫Tm18基因的克隆第24-27页
     ·Tm18基因原核表达载体构建第27-28页
     ·重组pGEX-4T-1-Tm18质粒在大肠杆菌中的诱导表达第28-30页
     ·重组蛋白的纯化第30-31页
     ·重组蛋白的免疫印迹(Western-Blotting)检测第31-32页
     ·重组蛋白免疫小鼠的抗体水平的检测第32-33页
 2 结果第33-49页
   ·多头带绦虫Tm18基因的克隆第33-41页
     ·多头带绦虫Tm18的扩增和克隆质粒的鉴定第33页
     ·多头带绦虫Tm18基因测序鉴定第33页
     ·多头带绦虫Tm18基因的序列分析第33-36页
     ·多头带绦虫Tm18基因的蛋白质生物信息学分析第36-41页
   ·重组Tm18基因的亚克隆第41页
     ·重组Tm18基因片段的扩增第41页
     ·pMD18-T-rTm18质粒的鉴定第41页
   ·pGEX-4T-rTm18重组表达质粒的构建与鉴定第41页
   ·pGEX-4-rTm18重组质粒表达产物的SDS-PAGE电泳分析第41-43页
   ·重组蛋白的纯化和免疫印迹检测第43-44页
   ·重组蛋白免疫小鼠的抗体水平的检测第44-49页
     ·小鼠血清中IgG的检测结果第44-45页
     ·小鼠血清中IgG1的检测结果第45-46页
     ·小鼠血清中IgG2a的检测结果第46-47页
     ·小鼠血清中IgE的检测结果第47-48页
     ·小鼠血清中IgM的检测结果第48-49页
 3 讨论第49-51页
   ·关于绦虫的18kDa抗原第49页
   ·多头带绦虫的Tm18抗原第49-50页
   ·多头带绦虫Tm18的表达第50-51页
   ·重组抗原的免疫活性第51页
 4 结论与创新点第51-53页
   ·结论第51-52页
   ·创新点第52-53页
参考文献第53-57页
致谢第57-58页
攻读学位期间发表的学术论文第58页

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