中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-6页 |
目录 | 第6-8页 |
第一章 文献综述 动物绦虫蚴病疫苗研究进展 | 第8-20页 |
1 天然抗原 | 第8-10页 |
·六钩蚴及其分泌/排泄物 | 第8-9页 |
·原头蚴及其组分抗原 | 第9-10页 |
·细胞苗 | 第10页 |
2 基因工程疫苗 | 第10-19页 |
·重组蛋白疫苗 | 第11-17页 |
·45w家族 | 第11-13页 |
·16kDa和18kDa抗原 | 第13-14页 |
·Eg95和Em95 | 第14-15页 |
·多肽疫苗 | 第15-17页 |
·核酸疫苗 | 第17-19页 |
3 疫苗研究展望 | 第19页 |
4 本试验的目的意义 | 第19-20页 |
第二章 多头带绦虫Tm18抗原基因的克隆和原核表达 | 第20-53页 |
1 材料和方法 | 第20-33页 |
·材料 | 第20-23页 |
·虫株和实验动物 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20-21页 |
·菌株及质粒载体 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21页 |
·培养基及常用液体的配制 | 第21-23页 |
·主要生物信息数据库和计算机软件 | 第23页 |
·试验方法 | 第23-33页 |
·多头带绦虫虫卵的收集和六钩蚴总RNA的提取 | 第23-24页 |
·多头带绦虫Tm18基因的克隆 | 第24-27页 |
·Tm18基因原核表达载体构建 | 第27-28页 |
·重组pGEX-4T-1-Tm18质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第28-30页 |
·重组蛋白的纯化 | 第30-31页 |
·重组蛋白的免疫印迹(Western-Blotting)检测 | 第31-32页 |
·重组蛋白免疫小鼠的抗体水平的检测 | 第32-33页 |
2 结果 | 第33-49页 |
·多头带绦虫Tm18基因的克隆 | 第33-41页 |
·多头带绦虫Tm18的扩增和克隆质粒的鉴定 | 第33页 |
·多头带绦虫Tm18基因测序鉴定 | 第33页 |
·多头带绦虫Tm18基因的序列分析 | 第33-36页 |
·多头带绦虫Tm18基因的蛋白质生物信息学分析 | 第36-41页 |
·重组Tm18基因的亚克隆 | 第41页 |
·重组Tm18基因片段的扩增 | 第41页 |
·pMD18-T-rTm18质粒的鉴定 | 第41页 |
·pGEX-4T-rTm18重组表达质粒的构建与鉴定 | 第41页 |
·pGEX-4-rTm18重组质粒表达产物的SDS-PAGE电泳分析 | 第41-43页 |
·重组蛋白的纯化和免疫印迹检测 | 第43-44页 |
·重组蛋白免疫小鼠的抗体水平的检测 | 第44-49页 |
·小鼠血清中IgG的检测结果 | 第44-45页 |
·小鼠血清中IgG1的检测结果 | 第45-46页 |
·小鼠血清中IgG2a的检测结果 | 第46-47页 |
·小鼠血清中IgE的检测结果 | 第47-48页 |
·小鼠血清中IgM的检测结果 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
·关于绦虫的18kDa抗原 | 第49页 |
·多头带绦虫的Tm18抗原 | 第49-50页 |
·多头带绦虫Tm18的表达 | 第50-51页 |
·重组抗原的免疫活性 | 第51页 |
4 结论与创新点 | 第51-53页 |
·结论 | 第51-52页 |
·创新点 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第58页 |