| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| ·植物的耐盐机制 | 第11-12页 |
| ·植物的盐胁迫适应机制 | 第11页 |
| ·盐胁迫对植物生长的影响 | 第11页 |
| ·盐胁迫对植物营养吸收的影响 | 第11页 |
| ·盐胁迫对苹果生理生化特征的影响 | 第11-12页 |
| ·Na~+吸收机制研究进展 | 第12-13页 |
| ·K~+通道 | 第12页 |
| ·Na~+的渗漏吸收机制 | 第12-13页 |
| ·Na~+/H~+逆向运转体(NHX) | 第13-14页 |
| ·苹果转基因研究进展 | 第14-15页 |
| ·苹果遗传转化中存在的问题及展望 | 第15页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 材料和方法 | 第17-24页 |
| ·MdNHX1基因的克隆 | 第17-18页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第17页 |
| ·试验中所用的酶和试剂 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-18页 |
| ·苹果砧木M.26高效再生体系的优化 | 第18-19页 |
| ·供试材料 | 第18页 |
| ·供试植物品种 | 第18页 |
| ·试验试剂 | 第18页 |
| ·培养基制备 | 第18页 |
| ·仪器设备 | 第18页 |
| ·试验方法 | 第18-19页 |
| ·M.26无菌系的建立 | 第18-19页 |
| ·植株的再生 | 第19页 |
| ·结果调查与统计 | 第19页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第19-20页 |
| ·材料与试剂 | 第19页 |
| ·培养基配方 | 第19-20页 |
| ·苹果叶片卡那霉素(Km)选择压的确定 | 第20页 |
| ·根癌农杆菌介导苹果的转化 | 第20页 |
| ·转基因植株的检测 | 第20-24页 |
| ·供试植物材料 | 第20页 |
| ·试验试剂和试剂盒 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·引物的设计与合成 | 第21页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第21-24页 |
| ·PCR检测 | 第21-22页 |
| ·Southern blot检测方法 | 第22页 |
| ·RT-PCR检测方法 | 第22页 |
| ·Real-time PCR检测方法 | 第22页 |
| ·转基因植株耐盐性的鉴定 | 第22-24页 |
| 第三章 结果与分析 | 第24-38页 |
| ·MdNHX1基因的克隆 | 第24-26页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第24页 |
| ·MdNHX1基因克隆及其分析 | 第24-26页 |
| ·理化性质分析 | 第26页 |
| ·信号肽预测分析 | 第26页 |
| ·苹果砧木‘M.26’再生途径的优化 | 第26-29页 |
| ·M.26叶片再生生物学观察 | 第26-27页 |
| ·不同浓度组合的6-BA和NAA对叶片不定芽发生的影响 | 第27-28页 |
| ·叶片成熟度对苹果叶片再生的影响 | 第28页 |
| ·离体叶片暗培养时间对苹果叶片再生的影响 | 第28页 |
| ·叶片极性对苹果叶片再生的影响 | 第28-29页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第29-30页 |
| ·抗生素对苹果叶片再生的影响 | 第29-30页 |
| ·抗生素对苹果生根的影响 | 第30页 |
| ·PCR检测 | 第30-32页 |
| ·目的基因PCR检测 | 第30-31页 |
| ·报告基因PCR检测 | 第31-32页 |
| ·Southern blot检测 | 第32-34页 |
| ·MdNHX1和nptⅡ基因探针标记效率的检测 | 第32-33页 |
| ·基因组DNA的酶切 | 第33页 |
| ·Southern blot | 第33-34页 |
| ·RT-PCR检测 | 第34-35页 |
| ·Real-time PCR检测 | 第35页 |
| ·生理指标检测方法 | 第35-38页 |
| 第四章 讨论 | 第38-42页 |
| ·苹果砧木‘M.26’叶片高效再生体系的优化 | 第38页 |
| ·苹果砧木‘M.26’遗传转化体系的优化 | 第38-39页 |
| ·外源基因MdNHX1的检测分析 | 第39页 |
| ·转基因苹果砧木‘M.26’的耐盐能力 | 第39-42页 |
| 第五章 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 缩略词 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |