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猪传染性胃肠炎病毒N蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立与应用

摘要第7-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语及符号第10-12页
第一篇 文献综述第12-22页
    第一章 猪传染性胃肠炎病毒研究进展第12-22页
        1 猪传染性胃肠炎病毒概述第12-13页
        2 猪传染性胃肠炎病毒的流行病学特征第13-14页
        3 猪传染性胃肠炎病毒的诊断第14-16页
            3.1 病毒的分离和鉴定第14页
            3.2 免疫荧光抗体技术第14-15页
            3.3 免疫组化技术第15页
            3.4 逆转录聚合酶链式反应第15-16页
            3.5 原位杂交技术第16页
        4 猪传染性胃肠炎病毒的疫苗研究第16-17页
        5 结语第17-18页
        参考文献第18-22页
第二篇 研究内容第22-44页
    第一章 猪传染性胃肠炎病毒N基因的克隆和原核表达第22-30页
        1 材料与方法第23-25页
            1.1 病毒、菌株、质粒第23页
            1.2 主要试剂第23页
            1.3 TGEV江苏分离株JS2012 N基因的扩增第23-24页
            1.4 TGEV N基因原核表达载体的构建与测序第24页
            1.5 重组TGEV N蛋白的表达第24页
            1.6 重组TGEV N蛋白的纯化第24页
            1.7 重组TGEV N蛋白Western Blot鉴定第24-25页
        2 结果第25-27页
            2.1 TGEV JS2012株N基因的扩增第25页
            2.2 TGEV JS2012N基因原核表达载体的构建第25-26页
            2.3 重组TGEV N蛋白的表达第26页
            2.4 重组TGEV N蛋白的纯化第26-27页
            2.5 重组TGEV N蛋白Western Blot鉴定第27页
        3 讨论第27-29页
        参考文献第29-30页
    第二章 猪传染性胃肠炎病毒抗体检测间接ELISA方法的建立与应用第30-42页
        1 材料与方法第31-33页
            1.1 材料第31页
            1.2 重组N蛋白抗原最适包被浓度和阴阳性血清的稀释浓度的确定第31页
            1.3 封闭液及抗体稀释液的确定第31-32页
            1.4 待检血清反应时间的确定第32页
            1.5 羊抗猪lgG-HRP最佳稀释度的确定第32页
            1.6 最适显色时间的确定第32页
            1.7 阴阳性临界值的确定第32页
            1.8 特异性实验第32页
            1.9 敏感性试验第32-33页
            1.10 重复性试验第33页
            1.11 间接ELISA与病毒血清中和试验的对照比较第33页
            1.12 临床猪血清检测第33页
        2 结果第33-39页
            2.1 重组N蛋白抗原最适包被浓度和阴阳性血清最佳稀释度的确定第33-34页
            2.2 封闭液及抗体稀释液的确定第34-35页
            2.3 待检血清反应时间的确定第35页
            2.4 酶标二抗最佳稀释度的确定第35页
            2.5 最佳底物作用时间的确定第35-36页
            2.6 阴阳性临界值确定第36-37页
            2.7 特异性实验第37页
            2.8 敏感性试验第37-38页
            2.9 重复性试验第38-39页
            2.10 间接ELISA与病毒血清中和试验的对照比较第39页
            2.11 临床猪血清检测第39页
        3 讨论第39-41页
        参考文献第41-42页
    第三章 结论第42-44页
附录 常用试剂配方第44-46页
致谢第46-48页
硕士期间论文发表第48页

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