| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 文献综述 | 第9-16页 |
| 1.1 植物脱水素的概述 | 第9页 |
| 1.2 脱水素抗逆性研究进展 | 第9-14页 |
| 1.2.1 低温胁迫响应 | 第9-11页 |
| 1.2.2 干旱胁迫响应 | 第11-12页 |
| 1.2.3 盐胁迫响应 | 第12-13页 |
| 1.2.4 ABA诱导响应 | 第13-14页 |
| 1.2.5 BRs诱导响应 | 第14页 |
| 1.3 植物脱水素转基因研究 | 第14-16页 |
| 2 引言 | 第16-18页 |
| 2.1 研究目的与意义 | 第16页 |
| 2.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 2.2.1 茶树CsDHN3的克隆及生物信息学分析 | 第16页 |
| 2.2.2 茶树叶片蛋白的提取方法 | 第16页 |
| 2.2.3 胁迫处理下茶树脱水素种类与功能 | 第16-17页 |
| 2.3 技术路线 | 第17-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-27页 |
| 3.1 试验材料 | 第18页 |
| 3.2 测定指标及方法 | 第18-19页 |
| 3.2.1 叶绿素荧光参数 | 第18页 |
| 3.2.2 相对含水量 | 第18页 |
| 3.2.3 相对电导率 | 第18-19页 |
| 3.3 仪器与试剂 | 第19-20页 |
| 3.3.1 主要实验仪器 | 第19页 |
| 3.3.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 3.3.3 引物合成与测序 | 第20页 |
| 3.4 试验方法 | 第20-27页 |
| 3.4.1 提取总RNA的方法 | 第20-21页 |
| 3.4.2 总RNA的质量检测 | 第21页 |
| 3.4.3 茶树叶片CsDHN3的EST片段的获得 | 第21-25页 |
| 3.4.4 茶树脱水素CsDHN3实时荧光定量PCR | 第25页 |
| 3.4.5 茶树叶片蛋白的提取及含量测定 | 第25-27页 |
| 4 结果与分析 | 第27-45页 |
| 4.1 RNA完整性和纯度的检测 | 第27页 |
| 4.2 茶树脱水素CSDHN3的CDNA全长克隆与序列分析 | 第27-33页 |
| 4.2.1 CsDHN33′/5′-RACE的克隆 | 第27-28页 |
| 4.2.2 CsDHN3的全长序列验证 | 第28-29页 |
| 4.2.3 CsDHN3序列分析 | 第29-33页 |
| 4.3 茶树脱水素CSDHN3的表达特性分析 | 第33-35页 |
| 4.4 不同总蛋白提取方法的效率比较 | 第35-36页 |
| 4.5 不同总蛋白提取方法的SDS-PAGE和Western-blot分析 | 第36-37页 |
| 4.6 不同胁迫下茶树脱水素蛋白的差异表达 | 第37-45页 |
| 4.6.1 低温胁迫下茶树脱水素蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 4.6.2 干旱胁迫下茶树脱水素蛋白的表达 | 第38-40页 |
| 4.6.3 ABA胁迫下茶树脱水素蛋白的表达 | 第40-41页 |
| 4.6.4 BR胁迫下茶树脱水素蛋白的表达 | 第41-45页 |
| 5 讨论 | 第45-49页 |
| 5.1 茶树脱水素CSDHN3的CDNA的克隆及序列分析 | 第45页 |
| 5.2 茶树叶片总蛋白提取方法比较 | 第45-46页 |
| 5.3 茶树在胁迫条件下脱水素的鉴定与差异表达 | 第46-49页 |
| 6 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
| 硕士在读期间发表的学术论文清单 | 第60页 |
