摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 文献综述 | 第9-17页 |
1.1 植物抗寒分子机制 | 第9-11页 |
1.1.1 植物低温胁迫调控性蛋白 | 第9-10页 |
1.1.2 植物低温胁迫功能蛋白 | 第10-11页 |
1.2 植物miRNA概述 | 第11-17页 |
1.2.1 植物miRNA的基本特点与分类 | 第11页 |
1.2.2 植物miRNA的生物合成和调控机理 | 第11-12页 |
1.2.3 miRNA在植物中的功能 | 第12-13页 |
1.2.4 植物miRNA的鉴定方法 | 第13-14页 |
1.2.5 茶树miRNA的研究进展 | 第14-15页 |
1.2.6 植物miRNA靶基因的预测及生物学验证 | 第15-17页 |
2 引言 | 第17-18页 |
2.1 研究意义、目的及内容 | 第17页 |
2.2 技术路线 | 第17-18页 |
3 材料与方法 | 第18-27页 |
3.1 试验材料与处理 | 第18页 |
3.1.1 试验材料 | 第18页 |
3.1.2 试验处理 | 第18页 |
3.2 试验试剂 | 第18-19页 |
3.2.1 主要仪器 | 第18页 |
3.2.2 主要试剂 | 第18-19页 |
3.2.3 引物合成与测序 | 第19页 |
3.3 试验方法 | 第19-27页 |
3.3.1 总RNA的提取和检测 | 第19-21页 |
3.3.2 降解组测序 | 第21-23页 |
3.3.3 RLM-5’RACE试验验证miRNA靶基因裂解位点 | 第23-25页 |
3.3.4 qRT-PCR实验 | 第25-27页 |
4 结果与分析 | 第27-42页 |
4.1 RNA的提取 | 第27页 |
4.2 降解组测序鉴定miRNA的靶基因 | 第27-30页 |
4.3 miRNA靶基因裂解位点验证试验(RLM-5’RACE) | 第30-33页 |
4.3.1 RLM -5’RACE试验 | 第30页 |
4.3.2 靶基因裂解位点分析 | 第30-33页 |
4.4 茶树低温胁迫差异表达miRNAs的qRT -PCR验证 | 第33页 |
4.5 基于降解组测序鉴定茶树低温胁迫差异表达miRNA的靶基因 | 第33-39页 |
4.6 miRNA及其靶基因在低温胁迫下的表达模式 | 第39-42页 |
4.6.1 低温胁迫下5对miRNA-靶基因的表达模式 | 第39页 |
4.6.2 miR164-NAC1在两个不同茶树品种中的表达 | 第39-42页 |
5 讨论 | 第42-45页 |
5.1 茶树抗寒相关miRNA的研究 | 第42页 |
5.2 茶树miRNA的靶基因分析 | 第42-43页 |
5.3 miR164-NAC1在两个茶树品种中的表达情况分析 | 第43-45页 |
6 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
附录A 茶树已知miRNA家族的靶基因 | 第53-65页 |
附录B 茶树新miRNA的靶基因 | 第65-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
作者简介 | 第76页 |
硕士在读期间发表的学术论文清单 | 第76页 |