摘要 | 第4-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
英文缩略词 | 第15-16页 |
第一部分 文献综述 | 第16-30页 |
1 细胞重编程研究进展 | 第17-20页 |
1.1 体细胞核移植 | 第17-18页 |
1.2 干细胞与体细胞融合 | 第18-19页 |
1.3 胞质提取物诱导 | 第19页 |
1.4 诱导多能干细胞技术 | 第19-20页 |
2 iPSCs的研究进展 | 第20-27页 |
2.1 重编程因子的选择 | 第20-21页 |
2.2 供体细胞来源与种类 | 第21-22页 |
2.3 目的基因导入方法选择 | 第22页 |
2.4 iPSC培养体系和鉴定 | 第22-23页 |
2.5 iPSC形成的可能机制 | 第23-25页 |
2.6 猪iPSC的研究进展 | 第25-26页 |
2.7 多能干细胞的相关信号通路 | 第26-27页 |
2.8 重编程效率的测定 | 第27页 |
3 细胞多能性状态研究 | 第27-29页 |
3.1 原始态和始发态研究 | 第27-28页 |
3.2 其他状态的多能性细胞研究 | 第28-29页 |
4 研究目的和意义 | 第29-30页 |
第二部分 试验部分 | 第30-70页 |
第一章 巴马小型猪不同种类体细胞重编程效率比较和培养条件筛选 | 第31-48页 |
1 材料与方法 | 第32-39页 |
1.1 材料和试剂 | 第32-34页 |
1.2 方法 | 第34-39页 |
2 结果与分析 | 第39-45页 |
2.1 无内毒素质粒提取 | 第39-40页 |
2.2 慢病毒包装及滴度测定 | 第40-41页 |
2.3 病毒感染 | 第41-42页 |
2.4 mTesR培养基中克隆的形成及重编程效率的比较 | 第42-43页 |
2.5 PBMSCs在不同培养基中形成克隆及重编程效率的比较 | 第43-44页 |
2.6 不同培养基传代培养piPSCs克隆的比较 | 第44-45页 |
3 讨论与分析 | 第45-47页 |
3.1 不同供体细胞重编程效率的比较 | 第45-46页 |
3.2 piPSCs的培养体系 | 第46-47页 |
4 小结 | 第47-48页 |
第二章 巴马小型猪诱导多能干细胞的生物学特性鉴定 | 第48-62页 |
1 材料与方法 | 第48-53页 |
1.1 材料和试剂 | 第48-50页 |
1.2 方法 | 第50-53页 |
2 结果与分析 | 第53-58页 |
2.1 2i+Lif+bFGF培养条件下获得piPSCs | 第53页 |
2.2 碱性磷酸酶染色 | 第53-54页 |
2.3 piPSCs多能性相关基因的检测 | 第54-55页 |
2.4 piPSCs外源性基因的表达 | 第55-57页 |
2.5 piPSCs的生长曲线测定 | 第57页 |
2.6 piPSCs的核型检测 | 第57-58页 |
2.7 piPSCs体外分化检测 | 第58页 |
3 讨论与分析 | 第58-60页 |
3.1 piPSCs的鉴定 | 第58-59页 |
3.2 外源基因的沉默 | 第59-60页 |
4 小结 | 第60-62页 |
第三章 piPSCs向Na(?)ve状态转变的初步研究 | 第62-70页 |
1 材料与方法 | 第62-64页 |
1.1 材料和试剂 | 第62-63页 |
1.2 方法 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-67页 |
2.1 不同浓度SB203580和SP600125对细胞增殖的影响 | 第64-65页 |
2.2 2i+Lif+bFGF+2s培养条件下重编程PBMSCs | 第65页 |
2.3 piPSCs的多能性相关基因检测 | 第65-66页 |
2.4 piPSCs的胰酶耐受性检测 | 第66-67页 |
3 讨论与分析 | 第67-69页 |
3.1 小分子化合物的使用 | 第67-68页 |
3.2 Na(?)ve状态iPSCs的表达标记 | 第68-69页 |
4 小结 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读硕士期间发表学术论文 | 第78页 |