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KCTD10对神经胶质瘤侵袭及迁移的影响

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
1 前言第12-17页
    1.1 KCTD10第12-14页
        1.1.1 KCTD10基因第12页
        1.1.2 KCTD10的表达及功能第12-14页
    1.2 神经胶质瘤的特点及研究第14-17页
2 材料和方法第17-35页
    2.1 组织样本和细胞第17页
    2.2 KCTD10的siRNA慢病毒和所用抗体及引物第17-18页
    2.3 试剂第18页
    2.4 溶液的配制第18-21页
        2.4.1 Western blot实验所需试剂第18-19页
        2.4.2 明胶酶谱实验所需试剂第19-21页
    2.5 仪器设备第21-22页
    2.6 组织样本的收集和保存第22-23页
    2.7 细胞实验操作第23-27页
        2.7.1 细胞的解冻第23页
        2.7.2 细胞的传代培养第23页
        2.7.3 细胞的冻存第23-24页
        2.7.4 慢病毒转染第24-26页
        2.7.5 划痕实验第26页
        2.7.6 transwell小室侵袭及迁移实验第26-27页
    2.8 样本的western blot检测第27-31页
        2.8.1 组织样本蛋白提取第27-28页
        2.8.2 细胞样本蛋白提取第28页
        2.8.3 蛋白样本浓度测定第28-29页
        2.8.4 SDS-PAGE电泳第29-30页
        2.8.5 转膜第30页
        2.8.6 封闭第30页
        2.8.7 抗体孵育第30-31页
        2.8.8 显色第31页
    2.9 样本的Real-time PCR检测第31-33页
        2.9.1 前期处理第31页
        2.9.2 总RNA提取第31-32页
        2.9.3 逆转录c DNA第32页
        2.9.4 Real-time PCR检测第32-33页
    2.10 明胶酶谱实验第33-34页
    2.11 统计学分析第34-35页
3 结果与分析第35-43页
    3.1 KCTD10在神经胶质瘤中蛋白水平的表达第35-36页
    3.2 KCTD10在神经胶质瘤细胞株里的表达第36页
    3.3 本底高表达KCTD10细胞株的慢病毒转染第36-37页
    3.4 干扰KCTD10慢病毒沉默效率的检测第37-38页
    3.5 划痕实验检测慢病毒转染后细胞的迁移能力第38-39页
    3.6 Transwell实验检测慢病毒转染后细胞的侵袭与转移能力第39-40页
    3.7 沉默 KCTD10 后与侵袭发生相关基因的表达第40-42页
    3.8 明胶酶谱法检测沉默KCTD10后细胞活性MMP2释放第42-43页
4 讨论第43-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-51页
综述第51-56页
    参考文献第54-56页
英文缩写表第56-57页
攻读硕士学位期间的主要成果第57-58页
致谢第58页

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