| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 中英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-14页 |
| 第2章 实验材料、仪器和试剂 | 第14-17页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 免疫组化标本 | 第14页 |
| 2.1.2 新鲜胃癌组织 | 第14页 |
| 2.1.3 实验细胞来源 | 第14页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.5 实验设备及耗材 | 第15-16页 |
| 2.2 主要试剂的配制 | 第16-17页 |
| 第3章 实验方法 | 第17-28页 |
| 3.1 人胃癌细胞培养 | 第17-18页 |
| 3.1.1 细胞复苏 | 第17页 |
| 3.1.2 细胞传代 | 第17页 |
| 3.1.3 细胞计数 | 第17-18页 |
| 3.1.4 细胞冻存 | 第18页 |
| 3.2 si RNA转染胃癌细胞及其转染效率的检测 | 第18-19页 |
| 3.2.1 实验分组 | 第18页 |
| 3.2.2 si RNA转染 | 第18-19页 |
| 3.3 Western Blotting实验 | 第19-22页 |
| 3.4 实时荧光定量PCR | 第22-24页 |
| 3.4.1 Trizol法提取转染后的胃癌细胞RNA | 第22-23页 |
| 3.4.2 cDNA合成 | 第23页 |
| 3.4.3 RT-PCR | 第23-24页 |
| 3.5 免疫组织化学染色检测胃癌中CUL4B的表达 | 第24-25页 |
| 3.6 胃癌MGC803细胞侵袭和迁移实验 | 第25-26页 |
| 3.6.1 细胞迁移实验 | 第25-26页 |
| 3.6.2 细胞侵袭实验 | 第26页 |
| 3.7 克隆检测细胞增殖 | 第26-27页 |
| 3.8 统计学分析 | 第27-28页 |
| 第4章 实验结果 | 第28-39页 |
| 4.1 CUL4B在胃癌组织中的表达 | 第28-29页 |
| 4.1.1 免疫组化检测 CUL4B 在胃癌组织中的表达情况 | 第28页 |
| 4.1.2 CUL4B 在胃癌组织中表达的临床意义 | 第28-29页 |
| 4.2 Western blot 检测胃癌组织 CUL4B 的表达水平 | 第29-30页 |
| 4.3 CUL4B 在胃癌细胞系中的表达情况 | 第30-32页 |
| 4.4 siRNA转染效率及干扰 CUL4B 效果检测 | 第32-35页 |
| 4.4.1 siRNA 转染 MGC803细胞后镜下观察 | 第32页 |
| 4.4.2 Western Blot 检测 si RNA 干扰 CUL4B 蛋白表达的效果 | 第32-34页 |
| 4.4.3 RT-PCR 检测 CUL4B mRNA表达水平的变化 | 第34-35页 |
| 4.5 胃癌细胞侵袭和迁移实验 | 第35-36页 |
| 4.5.1 Transwell法检测细胞侵袭能力实验 | 第35页 |
| 4.5.2 Transwell法检测细胞迁移能力实验 | 第35-36页 |
| 4.6 胃癌细胞克隆形成实验 | 第36-39页 |
| 第5章 讨论 | 第39-42页 |
| 第6章 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
| 综述 CUL4B 功能的研究 | 第48-54页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
