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Shewanella oneidensis呼吸作用对生物被膜形成的影响及其分子基础研究

摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 绪论第14-29页
    1.1 细菌生物被膜概述第14-19页
        1.1.1 细菌生物被膜的结构特征第14-17页
        1.1.2 细菌生物被膜的生长周期第17-19页
    1.2 气液生物被膜中的金属离子第19-20页
    1.3 S. oneidensis的末端氧化酶及其调控系统第20-26页
        1.3.1 细胞色素氧化酶概述第21页
        1.3.2 细菌中的末端氧化酶第21-25页
        1.3.3 S. oneidensis的末端氧化酶第25-26页
    1.4 本研究的背景、主要内容及意义第26-29页
2 二价金属阳离子对S. oneidensis气液生物被膜的影响第29-56页
    2.1 材料与方法第29-35页
        2.1.1 化学药品和试剂第29-31页
        2.1.2 供试菌株、质粒以及培养条件第31-32页
        2.1.3 框内缺失突变株的构建与回补第32-33页
        2.1.4 气液生物被膜的培养及生物量的测定第33页
        2.1.5 β-半乳糖苷酶活性检测第33-34页
        2.1.6 通过Ferrozine试验测定铁的氧化物中Fe~(2+)和Fe~(3+)的比例第34-35页
    2.2 结果与分析第35-51页
        2.2.1 S. oneidensis气液生物被膜的形成需要二价金属阳离子第35-39页
        2.2.2 Mg~(2+)和Fe~(2+)对于气液生物被膜的形成是必要的第39-43页
        2.2.3 Fe~(2+)的氧化对气液生物被膜形成的影响第43-46页
        2.2.4 不可溶电子受体能够破坏S. oneidensis的气液生物被膜第46-50页
        2.2.5 铁离子对△cymA和△crp的气液生物被膜没有影响第50-51页
    2.3 讨论第51-56页
        2.3.1 Fe~(2+)对S. oneidensis气液生物被膜的影响第52-53页
        2.3.2 铁氧化合物的形成能够破坏S. oneidensis气液生物被膜第53-54页
        2.3.3 S. oneidensis倾向于在不可溶电子受体表面形成固体生物被膜第54-56页
3 c型细胞色素在有氧呼吸中起到关键作用第56-72页
    3.1 材料与方法第56-61页
        3.1.1 供试菌株、质粒以及培养条件第56-57页
        3.1.2 框内缺失突变株的构建与回补第57-58页
        3.1.3 S. oneidensis有氧培养及生长速率测定第58页
        3.1.4 Nadi试验第58-59页
        3.1.5 生理特性研究第59页
        3.1.6 存活率试验第59页
        3.1.7 启动子活性检测第59-60页
        3.1.8 qRT-PCR第60-61页
    3.2 结果与分析第61-69页
        3.2.1 细胞色素c蛋白在有氧生长中的重要作用第61-63页
        3.2.2 细胞色素cbb_3氧化酶在S. oneidensis的有氧呼吸中至关重要第63-65页
        3.2.3 细胞色素cbb_3氧化酶和细胞色素bd氧化酶在微氧呼吸中起到关键作用第65-66页
        3.2.4 S. oneidensis末端氧化酶在呼吸中的功能与表达水平有关第66-68页
        3.2.5 cyd操纵子的补偿表达第68-69页
    3.3 讨论第69-72页
        3.3.1 S. oneidensis在有氧条件下主要利用cbb_3型氧化酶进行呼吸第69-70页
        3.3.2 S. oneidensis中细胞色素caa_3氧化酶功能丧失第70-72页
4 S. oneidensis呼吸系统的调控第72-81页
    4.1 材料与方法第72-74页
        4.1.1 供试菌株、质粒以及培养条件第72-73页
        4.1.2 启动子活性检测第73页
        4.1.3 Crp-His融合蛋白的表达纯化第73-74页
        4.1.4 EMSA试验第74页
    4.2 结果与分析第74-78页
        4.2.1 全局调控因子ArcA,Crp和Fnr对cco,cox以及cyd操纵子表达的影响第74-76页
        4.2.2 Crp蛋白的DNA结合特征第76-78页
    4.3 讨论第78-81页
5 论文总结第81-85页
    5.1 主要研究结论第81-83页
    5.2 创新之处第83页
    5.3 不足及展望第83-85页
参考文献第85-98页
附录第98-101页
致谢第101-103页
作者简介第103-104页

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