| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 常用缩写词 | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 BTV及其与机体相互作用 | 第14-18页 |
| 1.1.1 BTV的病原学 | 第14-17页 |
| 1.1.2 BTV与机体的相互作用 | 第17-18页 |
| 1.2 BTV的流行态势 | 第18-19页 |
| 1.2.1 BT的世界性分布 | 第18-19页 |
| 1.2.2 BTV媒介的分布研究 | 第19页 |
| 1.2.3 BT在中国的流行 | 第19页 |
| 1.3 BT的诊断与防控 | 第19-23页 |
| 1.3.1 BT的诊断 | 第19-21页 |
| 1.3.2 BT防控 | 第21-23页 |
| 1.4 研究目的 | 第23-24页 |
| 第二章 广西地区BTV感染及传播媒介调查 | 第24-47页 |
| 2.1 材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 反刍动物血清样品来源 | 第24页 |
| 2.1.2 广西虫媒病监控点建立及媒介昆虫样品的采集 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 技术路线 | 第26页 |
| 2.2.2 广西BTV血清型调查 | 第26-28页 |
| 2.2.2.1 C-ELISA方法筛选BTV阳性血清 | 第26-27页 |
| 2.2.2.2 标准毒株的准备 | 第27-28页 |
| 2.2.2.3 微量细胞中和试验检 | 第28页 |
| 2.2.3 媒介昆虫调查 | 第28-31页 |
| 2.2.3.1 监控点库蠓形态学鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.3.2 库蠓线粒体基因的扩增 | 第30-31页 |
| 2.2.3.3 监控点库蠓种类分析与统计 | 第31页 |
| 2.3 结果 | 第31-45页 |
| 2.3.1 BTV血清学调查结果 | 第31-38页 |
| 2.3.1.1 广西BTV阳性血清筛查结果 | 第31-33页 |
| 2.3.1.2 广西BTV的血清型的检测结果 | 第33-36页 |
| 2.3.1.3 BTV血清型气候因素及分布地域差异分析 | 第36-38页 |
| 2.3.4 媒介昆虫调查结果 | 第38-45页 |
| 2.3.4.1 库蠓翅膀形态学观察 | 第38-43页 |
| 2.3.4.2 库蠓线粒体基因的序列比对 | 第43-44页 |
| 2.3.4.3 监控点库蠓种类分析 | 第44-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 病毒分离与鉴定 | 第47-87页 |
| 3.1 材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 血液样本 | 第47页 |
| 3.1.2 媒介昆虫样本 | 第47页 |
| 3.1.3 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第48页 |
| 3.2 方法 | 第48-60页 |
| 3.2.1 技术路线 | 第48页 |
| 3.2.2 病毒分离 | 第48-50页 |
| 3.2.2.1 媒介昆虫(库蠓、伊蚊)携带病毒的细胞接种分离 | 第48页 |
| 3.2.2.2 哨兵动物血液中病毒的细胞接种分离培养 | 第48-50页 |
| 3.2.2.2.1 细胞接种分离病毒 | 第48-49页 |
| 3.2.2.2.2 鸡胚-细胞接种分离法 | 第49-50页 |
| 3.2.3 分离病毒的鉴定 | 第50-52页 |
| 3.2.3.1 分离病毒AC-ELISA鉴定 | 第50页 |
| 3.2.3.2 分离病毒的Real-Time PCR鉴定 | 第50-52页 |
| 3.2.4 分离毒株TCID_(50)的测定 | 第52-53页 |
| 3.2.5 分离病毒血清型鉴定 | 第53-56页 |
| 3.2.5.1 病毒中和试验确定分离毒株血清型 | 第53页 |
| 3.2.5.2 扩增BTV-VP2确定分离毒株血清型 | 第53-56页 |
| 3.2.6 分离BTV的VP7与NS3/3A基因序列的扩增 | 第56-58页 |
| 3.2.7 dsRNA病毒检测 | 第58-60页 |
| 3.2.7.1 总RNA提取 | 第58-59页 |
| 3.2.7.2 dsRNA的纯化 | 第59页 |
| 3.2.7.3 dsRNA电泳 | 第59页 |
| 3.2.7.4 八种虫媒病毒鉴定 | 第59-60页 |
| 3.2.8 病毒序列分析 | 第60页 |
| 3.3 结果 | 第60-85页 |
| 3.3.1 媒介昆虫携带病毒的细胞接种分离 | 第60-62页 |
| 3.3.2 监控点哨兵动物病毒的分离 | 第62-67页 |
| 3.3.2.1 哨兵动物血液病毒细胞途径分离结果 | 第62-65页 |
| 3.3.2.2 哨兵动物血液病毒鸡胚-细胞途径分离结果 | 第65-67页 |
| 3.3.3 分离病毒的鉴定结果 | 第67-68页 |
| 3.3.3.1 AC-ELISA鉴定结果 | 第67页 |
| 3.3.3.2 Real-Time PCR鉴定结果 | 第67-68页 |
| 3.3.4 分离病毒的TCID_(50)测定 | 第68-69页 |
| 3.3.5 分离病毒的血清型鉴定结果 | 第69-71页 |
| 3.3.5.1 分离毒株的病毒中和试验结果 | 第69页 |
| 3.3.5.2 BTV的VP2基因扩增结果 | 第69-71页 |
| 3.3.6 dsRNA病毒的电泳鉴定结果 | 第71-72页 |
| 3.3.7 分离BTV的VP7、NS3/NS3A扩增结果 | 第72-73页 |
| 3.3.7.1 BTV的VP7基因扩增结果 | 第72-73页 |
| 3.3.7.2 BTV的NS3/NS3A基因扩增结果 | 第73页 |
| 3.3.8 分离BTV的VP2、VP7、NS3/NS3A序列分析 | 第73-85页 |
| 3.3.8.1 BTV的VP2序列分析 | 第73-79页 |
| 3.3.8.2 BTV的VP7序列分析 | 第79-80页 |
| 3.3.8.3 BTV的NS3/NS3A序列分析 | 第80-85页 |
| 3.4 讨论 | 第85-87页 |
| 第四章 动物攻毒实验 | 第87-95页 |
| 4.1 材料 | 第87页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第87页 |
| 4.1.2 实验材料 | 第87页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第87页 |
| 4.2 方法 | 第87-89页 |
| 4.2.1 技术路线 | 第87页 |
| 4.2.2 分离毒株(牛血毒)回归实验 | 第87-88页 |
| 4.2.3 攻毒牛临床症状及病理剖解变化观察 | 第88页 |
| 4.2.4 攻毒牛组织脏器中BTV增殖情况的测定 | 第88页 |
| 4.2.5 攻毒牛血清抗体水平及毒血症的检测情况 | 第88页 |
| 4.2.6 鸡胚致死实验 | 第88页 |
| 4.2.7 BTV感染猪的实验 | 第88-89页 |
| 4.3 结果 | 第89-93页 |
| 4.3.1 血毒回归Real-Time PCR检测血液中病毒核酸含量 | 第89-90页 |
| 4.3.2 攻毒牛血清抗体水平及毒血症变化情况 | 第90页 |
| 4.3.3 攻毒牛外周血及各组织脏器BTV核酸含量的测定 | 第90-91页 |
| 4.3.4 测血毒毒价 | 第91页 |
| 4.3.5 鸡胚致死实验 | 第91-92页 |
| 4.3.6 猪感染实验 | 第92-93页 |
| 4.4 讨论 | 第93-95页 |
| 第五章 全文总结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-109页 |
| 附录1 | 第109-110页 |
| 附录2 | 第110-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第130页 |
