摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
中英文缩写 | 第11-12页 |
第1章 引言 | 第12-28页 |
1.1 蛋白质淀粉样纤维化 | 第12-15页 |
1.1.1 蛋白质淀粉样纤维化介绍 | 第12-14页 |
1.1.2 蛋白质淀粉样纤维化引发的相关疾病 | 第14-15页 |
1.2 论文的研究背景及意义 | 第15-17页 |
1.3 溶菌酶、牛胰岛素 | 第17-19页 |
1.3.1 溶菌酶 | 第17-18页 |
1.3.2 牛胰岛素 | 第18-19页 |
1.4 氧化剂 | 第19-21页 |
1.4.1 H_2O_2 | 第19页 |
1.4.2 AAPH | 第19-21页 |
1.5 纤维种子 | 第21页 |
1.6 变性剂对蛋白的作用 | 第21-23页 |
1.7 检测蛋白质淀粉样纤维的相关技术 | 第23-28页 |
1.7.1 ThT及ANS荧光标记技术 | 第23-24页 |
1.7.2 内源荧光光谱 | 第24页 |
1.7.3 圆二色谱技术 | 第24-25页 |
1.7.4 MALDI-TOF质谱 | 第25页 |
1.7.5 透射电子显微镜 | 第25-26页 |
1.7.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 | 第26页 |
1.7.7 刚果红紫外光谱法 | 第26-28页 |
第2章 实验部分 | 第28-38页 |
2.1 实验仪器及实验试剂 | 第28-31页 |
2.1.1 实验药品及相关试剂 | 第28-29页 |
2.1.2 实验仪器 | 第29页 |
2.1.3 实验试剂的配制方法 | 第29-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-38页 |
2.2.1 紫外吸收光谱检测 | 第31页 |
2.2.2 内源荧光光谱检测 | 第31页 |
2.2.3 盐酸胍对蛋白的变性检测 | 第31页 |
2.2.4 淀粉样纤维的样品制备 | 第31-33页 |
2.2.5 ThT荧光标记检测淀粉样纤维生长曲线 | 第33页 |
2.2.6 ANS荧光标记检测纤维生长曲线 | 第33-34页 |
2.2.7 圆二色谱检测 | 第34页 |
2.2.8 SDS-PAGE | 第34-35页 |
2.2.9 Native-PAGE | 第35-36页 |
2.2.10 透射电子显微镜检测 | 第36页 |
2.2.11 MALDI-TOF | 第36页 |
2.2.12 细胞溶血实验 | 第36-38页 |
第3章 实验结果 | 第38-68页 |
3.1 H_2O_2对溶菌酶的氧化作用及氧化溶菌酶的淀粉样纤维化 | 第38-51页 |
3.1.1 H_2O_2氧化溶菌酶的紫外光谱 | 第38页 |
3.1.2 H_2O_2氧化溶菌酶的内源荧光光谱 | 第38-39页 |
3.1.3 圆二色谱检测二级结构变化 | 第39页 |
3.1.4 盐酸胍诱导蛋白去折叠 | 第39-42页 |
3.1.5 H_2O_2氧化溶菌酶的纤维动力学 | 第42-45页 |
3.1.6 圆二色谱检测二级结构变化 | 第45-46页 |
3.1.7 ANS荧光检测纤维生长动力学 | 第46-47页 |
3.1.8 SDS-PAGE检测 | 第47-48页 |
3.1.9 Native-PAGE | 第48页 |
3.1.10 刚果红实验 | 第48-49页 |
3.1.11 透射电子显微镜检测纤维形态 | 第49-50页 |
3.1.12 溶菌酶纤维的毒性作用 | 第50-51页 |
3.2 H_2O_2对胰岛素的氧化作用及氧化胰岛素的淀粉样纤维化 | 第51-56页 |
3.2.1 H_2O_2氧化胰岛素的紫外吸收光谱 | 第51页 |
3.2.2 H_2O_2氧化胰岛素的内源荧光光谱 | 第51-52页 |
3.2.3 MALDI-TOF质谱分析 | 第52页 |
3.2.4 H_2O_2氧化胰岛素的纤维动力学 | 第52-53页 |
3.2.5 圆二色谱检测二级结构变化 | 第53-54页 |
3.2.6 SDS-PAGE | 第54-55页 |
3.2.7 透射电子显微镜检测纤维形态 | 第55-56页 |
3.3 AAPH对溶菌酶的氧化作用及氧化溶菌酶的淀粉样纤维化 | 第56-61页 |
3.3.1 AAPH氧化溶菌酶的紫外光谱 | 第56页 |
3.3.2 AAPH氧化溶菌酶的内源荧光光谱 | 第56-57页 |
3.3.3 SDS-PAGE | 第57页 |
3.3.4 AAPH对溶菌酶二级结构的影响 | 第57-58页 |
3.3.5 AAPH氧化溶菌酶的纤维动力学 | 第58页 |
3.3.6 SDS-PAGE | 第58-59页 |
3.3.7 Native-PAGE | 第59-60页 |
3.3.8 透射电子显微镜检测纤维形态 | 第60页 |
3.3.9 溶菌酶淀粉样纤维的毒性检测 | 第60-61页 |
3.4 AAPH对胰岛素的氧化作用及氧化胰岛素的淀粉样纤维化 | 第61-68页 |
3.4.1 AAPH氧化胰岛素的紫外吸收光谱 | 第61-62页 |
3.4.2 AAPH氧化胰岛素的内源荧光光谱 | 第62页 |
3.4.3 MALDI-TOF检测 | 第62-63页 |
3.4.4 AAPH氧化胰岛素的纤维生长动力学 | 第63-64页 |
3.4.5 SDS-PAGE | 第64页 |
3.4.6 圆二色谱检测二级结构变化 | 第64-65页 |
3.4.7 透射电子显微镜检测纤维形态 | 第65-68页 |
第4章 讨论 | 第68-72页 |
4.1 蛋白质淀粉样纤维化 | 第68页 |
4.2 H_2O_2对蛋白质的氧化作用 | 第68-69页 |
4.3 蛋白质经H_2O_2氧化后对其纤维化行为的影响 | 第69-70页 |
4.4 AAPH对蛋白质的氧化作用 | 第70页 |
4.5 蛋白质经AAPH氧化后对其纤维化行为的影响 | 第70-71页 |
4.6 淀粉样纤维的毒性 | 第71-72页 |
第5章 结论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第86页 |