| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 HPPD研究背景 | 第11-15页 |
| 1.1.1 HPPD酶的催化机制 | 第13页 |
| 1.1.2 HPPD酶的晶体结构 | 第13-15页 |
| 1.2 HPPD靶标类抑制剂 | 第15-21页 |
| 1.2.1 I型酪氨酸血症的治疗 | 第15-16页 |
| 1.2.2 农作物杂草的控制 | 第16-21页 |
| 1.3 HPPD抑制剂型除草剂抗性研究 | 第21-22页 |
| 1.4 HPPD酶活性测定方法简介 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第2章 材料及方法 | 第24-28页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 分析软件 | 第25页 |
| 2.3 方法 | 第25-28页 |
| 2.3.1 突变位点和突变方法的确定 | 第25页 |
| 2.3.2 CjHPPD及其突变蛋白的生物信息学分析 | 第25页 |
| 2.3.3 Cjhppd重组菌的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.4 种子培养 | 第26页 |
| 2.3.5 发酵培养产生色素 | 第26页 |
| 2.3.6 色素的提取 | 第26-27页 |
| 2.3.7 色素标准曲线制作 | 第27页 |
| 2.3.8 CjHPPD对DTP的IC50值测定 | 第27页 |
| 2.3.9 CjHPPD及其突变型活性及抗性测定 | 第27-28页 |
| 第3章 结果与分析 | 第28-50页 |
| 3.1 生物信息学分析 | 第28-46页 |
| 3.1.1 序列比对及进化树构建 | 第28-30页 |
| 3.1.2 CjHPPD保守结构域及活性位点预测 | 第30-31页 |
| 3.1.3 CjHPPD突变位点的拟定 | 第31页 |
| 3.1.4 CjHPPD及其突变型理化性质分析 | 第31-35页 |
| 3.1.5 CjHPPD及其突变型信号肽预测 | 第35页 |
| 3.1.6 CjHPPD及其突变型跨膜结构预测 | 第35-36页 |
| 3.1.7 CjHPPD及其突变型亚细胞定位预测 | 第36页 |
| 3.1.8 CjHPPD及其突变型亲疏水性预测 | 第36-37页 |
| 3.1.9 CjHPPD及其突变型二级结构预测 | 第37-40页 |
| 3.1.10 CjHPPD及其突变体模体预测 | 第40-41页 |
| 3.1.11 CjHPPD及其各突变型卷曲螺旋预测 | 第41-42页 |
| 3.1.12 CjHPPD及各突变型三级结构建模 | 第42-44页 |
| 3.1.13 CjHPPD铁结合位点预测 | 第44页 |
| 3.1.14 分子对接反向预测配体结合位点 | 第44-46页 |
| 3.2 CjHPPD活性和对DTP的抗性测定 | 第46-50页 |
| 3.2.1 CjHPPD重组菌鉴定 | 第46页 |
| 3.2.2 色素标准曲线 | 第46-47页 |
| 3.2.3 CjHPPD对DTP的IC50值测定 | 第47-48页 |
| 3.2.4 CjHPPD各突变型活性和对DTP抗性测定 | 第48-50页 |
| 第4章 讨论 | 第50-58页 |
| 4.1 CjHPPD生物信息学分析 | 第50-51页 |
| 4.2 CjHPPD氨基酸位点与酶活性之间的关系 | 第51-52页 |
| 4.3 CjHPPD氨基酸位点与DTP抗性的关系 | 第52-58页 |
| 第5章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 附录 | 第68-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第80页 |
