| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 前言 | 第9-17页 |
| 1.1 日本沼虾简介 | 第9页 |
| 1.2 活性氧ROS的产生 | 第9-12页 |
| 1.2.1 ROS引起的损伤 | 第10页 |
| 1.2.2 ROS的功能 | 第10-12页 |
| 1.3 硫氰酸生成酶研究现状 | 第12-15页 |
| 1.3.1 硫氰酸生成酶简介 | 第12-14页 |
| 1.3.2 硫氰酸生成酶的抗氧化能力 | 第14页 |
| 1.3.3 硫氰酸生成酶与MPST的进化关系 | 第14-15页 |
| 1.3.4 硫氰酸生成酶在医学中的功能 | 第15页 |
| 1.4 研究意义 | 第15-17页 |
| 第2章 日本沼虾硫氰酸生成酶基因序列生物信息学分析 | 第17-24页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第17页 |
| 2.2 实验结果 | 第17-22页 |
| 2.2.1 日本沼虾转录组中硫氰酸生成酶的序列分析 | 第17-18页 |
| 2.2.2 硫氰酸生成酶序列的蛋白质理化性质分析 | 第18-19页 |
| 2.2.3 日本沼虾硫氰酸生成酶蛋白序列比对 | 第19-20页 |
| 2.2.4 日本沼虾硫氰酸生成酶蛋白结构域预测 | 第20页 |
| 2.2.5 空间结构预测 | 第20-21页 |
| 2.2.6 日本沼虾硫氰酸生成酶系统进化关系分析 | 第21-22页 |
| 2.3 讨论 | 第22-24页 |
| 第3章 硫氰酸生成酶基因的克隆、表达及活性鉴定 | 第24-30页 |
| 3.1 实验材料、仪器以及实验中设计的引物 | 第24-25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-26页 |
| 3.2.1 日本沼虾总RNA提取和cDNA制备 | 第25页 |
| 3.2.2 原核表达载体构建，重组蛋白诱导表达及纯化 | 第25-26页 |
| 3.2.3 纯化后重组蛋白的活性检测及Km值测定 | 第26页 |
| 3.3 实验结果 | 第26-29页 |
| 3.3.1 重组蛋白诱导表达及纯化分析 | 第26-27页 |
| 3.3.2 纯化后重组蛋白活性检测及Km值测定结果 | 第27-29页 |
| 3.4 讨论 | 第29-30页 |
| 第4章 日本沼虾硫氰酸生成酶表达模式的研究 | 第30-34页 |
| 4.1 实验方法 | 第30-31页 |
| 4.1.1 日本沼虾不同组织分离 | 第30页 |
| 4.1.2 维氏气单孢菌感染日本沼虾的免疫刺激实验 | 第30页 |
| 4.1.3 数据处理 | 第30-31页 |
| 4.2 实验结果 | 第31-32页 |
| 4.2.1 不同组织中硫氰酸生成酶基因mRNA表达水平检测结果 | 第31页 |
| 4.2.2 维氏气单胞菌刺激后硫氰酸生成酶基因mRNA表达水平分析 | 第31-32页 |
| 4.3 讨论 | 第32-34页 |
| 第5章 日本沼虾硫氰酸生成酶2抗氧化功能的研究 | 第34-39页 |
| 5.1 实验方法 | 第34-35页 |
| 5.1.1 干扰载体构建及dsRNA表达检测 | 第34页 |
| 5.1.2 日本沼虾注射dsRNA后，MnRHOD2干扰效果检测 | 第34页 |
| 5.1.3 dsRNA干扰后氧化应激水平测定 | 第34页 |
| 5.1.4 MnRHOD2蛋白活性检测 | 第34-35页 |
| 5.2 实验结果 | 第35-37页 |
| 5.2.1 dsRNA表达及干扰效果检测 | 第35-36页 |
| 5.2.2 dsRNA干扰MnRHOD2后氧化应激水平测定 | 第36页 |
| 5.2.3 MnRHOD2活性检测 | 第36-37页 |
| 5.3 讨论 | 第37-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 致谢 | 第46-48页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第48页 |
