摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-19页 |
1.1 全基因组关联分析研究进展 | 第13-15页 |
1.1.1 全基因组关联分析的研究背景 | 第13-14页 |
1.1.2 GWAS的提出与发展 | 第14页 |
1.1.3 GWAS的研究原理和研究方法 | 第14-15页 |
1.2 棉花黄萎病的研究进展 | 第15-16页 |
1.3 谷胱甘肽转移酶(GST)的研究进展 | 第16-17页 |
1.3.1 GST简介 | 第16页 |
1.3.2 GST保护植物的研究进展 | 第16-17页 |
1.4 水杨酸(SA)与抗病之间的联系 | 第17-18页 |
1.5 本课题的研究目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 GWAS分析 | 第19-22页 |
2.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.1 实验材料和菌种 | 第19页 |
2.1.2 主要实验试剂和仪器 | 第19页 |
2.1.3 培养基与溶液配方 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-20页 |
2.2.1 亚洲棉群体基因型的获得 | 第19页 |
2.2.2 棉花苗的培养 | 第19-20页 |
2.2.3 群体黄萎病病情指数调查 | 第20页 |
2.3 实验结果与分析 | 第20-21页 |
2.4 讨论 | 第21-22页 |
第三章 GaGSTF9与抗病、感病品种以及激素之间的联系 | 第22-29页 |
3.1 实验材料 | 第22-23页 |
3.1.1 实验材料 | 第22页 |
3.1.2 主要实验试剂和仪器 | 第22页 |
3.1.3 培养基与溶液配方 | 第22-23页 |
3.2 实验方法 | 第23-25页 |
3.2.1 棉花苗的培养 | 第23页 |
3.2.2 接黄萎病菌及取材 | 第23页 |
3.2.3 不同激素处理及取材 | 第23页 |
3.2.4 RNA提取、反转录 | 第23-25页 |
3.3 实验结果与分析 | 第25-28页 |
3.3.1 GaGSTF9表达模式与抗病、感病品种之间的关系 | 第25-27页 |
3.3.2 GaGSTF9表达模式与激素之间的关系 | 第27-28页 |
3.4 讨论 | 第28-29页 |
第四章 沉默抗病品种的GaGSTF9基因对抗黄萎病的影响 | 第29-42页 |
4.1 实验材料 | 第29-30页 |
4.1.1 植物材料 | 第29页 |
4.1.2 载体与菌株 | 第29页 |
4.1.3 酶等其他试剂及耗材 | 第29页 |
4.1.4 引物 | 第29-30页 |
4.2 实验方法 | 第30-35页 |
4.2.1 植物材料 | 第30页 |
4.2.2 总RNA的提取及反转录 | 第30页 |
4.2.3 目的片段的克隆 | 第30-32页 |
4.2.4 VIGS干涉载体的构建及注射 | 第32-34页 |
4.2.5 VIGS体系中GaGSTF9基因干涉水平检测 | 第34页 |
4.2.6 表型观察及病指统计 | 第34页 |
4.2.7 大丽轮枝菌的定量 | 第34-35页 |
4.2.8 大丽轮枝菌恢复实验 | 第35页 |
4.2.9 台盼蓝染色 | 第35页 |
4.3 实验结果与分析 | 第35-40页 |
4.3.1 VIGS载体的构建及转化 | 第35-36页 |
4.3.2 VIGS正对照结果 | 第36-37页 |
4.3.3 基因沉默检测结果 | 第37页 |
4.3.4 VIGS实验结果 | 第37-40页 |
4.4 讨论 | 第40-42页 |
第五章 GaGSTF9基因的功能验证及与SA关系的分析 | 第42-59页 |
5.1 实验材料 | 第42-43页 |
5.1.1 植物材料 | 第42页 |
5.1.2 主要实验试剂和仪器 | 第42页 |
5.1.3 载体与菌株 | 第42页 |
5.1.4 酶等其他试剂及耗材 | 第42-43页 |
5.1.5 引物 | 第43页 |
5.2 实验方法 | 第43-49页 |
5.2.1 GaGSTF9与病原相关基因之间的联系 | 第43页 |
5.2.2 GaGSTF9的克隆 | 第43-44页 |
5.2.3 构建表达载体 | 第44页 |
5.2.4 沾花法转化拟南芥 | 第44-45页 |
5.2.5 转基因拟南芥阳性植株的筛选 | 第45-46页 |
5.2.6 抗黄萎病鉴定 | 第46-47页 |
5.2.7 JA、SA、ET标记基因表达量检测 | 第47-48页 |
5.2.8 转基因拟南芥中SA、H2O2含量检测 | 第48页 |
5.2.9 转基因拟南芥抗病鉴定 | 第48-49页 |
5.3 实验结果与分析 | 第49-57页 |
5.3.1 GSTF9与PR基因间的联系 | 第49-50页 |
5.3.2 过表达载体的构建及农杆菌转化 | 第50页 |
5.3.3 转基因拟南芥的筛选 | 第50-51页 |
5.3.4 抗黄萎病鉴定结果 | 第51-52页 |
5.3.5 标记基因表达量结果 | 第52-53页 |
5.3.6 SA、H2O2测量结果 | 第53-54页 |
5.3.7 转基因拟南芥抗病鉴定结果 | 第54-57页 |
5.4 讨论 | 第57-59页 |
第六章 全文总结及展望 | 第59-61页 |
6.1 全文总结 | 第59-60页 |
6.2 展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简历 | 第68-69页 |