| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 前 言 | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-32页 |
| 1．1 大豆孢囊线虫与寄主植物相互作用的生化与遗传研究 | 第13-19页 |
| 1．1．1 引言 | 第13-14页 |
| 1．1．2 SCN的生活周期及对寄主造成的危害 | 第14-15页 |
| 1．1．3 受SCN侵染的抗性植株的防御反应 | 第15-17页 |
| 1．1．4 大豆抗SCN的遗传研究 | 第17-18页 |
| 1．1．5 结束语 | 第18-19页 |
| 1．2 差异显示（DDRT-PCR）及RACE技术在基因克隆中的应用 | 第19-32页 |
| 1．2．1 DDRT-PCR和RACE的原理 | 第19-23页 |
| 1．2．1．1 DDRT-PCR的原理 | 第19-21页 |
| 1．2．1．2 RACE的原理 | 第21-23页 |
| 1．2．2 DDRT-PCR和RACE的技术关键 | 第23-27页 |
| 1．2．2．1 材料的选择和处理 | 第23页 |
| 1．2．2．2 引物的设计 | 第23-25页 |
| 1．2．2．3 模板的制备 | 第25页 |
| 1．2．2．4 反转录和PCR扩增 | 第25-26页 |
| 1．2．2．5 电泳 | 第26页 |
| 1．2．2．6 差异条带的初步分析 | 第26页 |
| 1．2．2．7 差异条带的阳性鉴定 | 第26-27页 |
| 1．2．3 DDRT-PCR技术在基因表达研究中的应用 | 第27-32页 |
| 1．2．4．1 应用于未知基因的克隆和基因的差异表达分析 | 第27-30页 |
| 1．2．4．2 应用于已知基因或部分已知基因的克隆 | 第30页 |
| 1．2．4．3 应用于已知基因的基因家族或同源基因的克隆 | 第30-32页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第32-41页 |
| 2．1 材料 | 第32-33页 |
| 2．1．1 供试大豆材料 | 第32页 |
| 2．1．2 酶与试剂盒 | 第32页 |
| 2．1．3 实验仪器 | 第32页 |
| 2．1．4 差异显示引物 | 第32-33页 |
| 2．1．5 5’RACE引物 | 第33页 |
| 2．2 方法 | 第33-41页 |
| 2．2．1 SCN 4号生理小种的J2幼虫的孵化 | 第33-34页 |
| 2．2．2 SCN J2幼虫接种大豆的方法 | 第34页 |
| 2．2．3 总RNA的提取方法 | 第34页 |
| 2．2．4 DDRT-PCR的步骤 | 第34-38页 |
| 2．2．5 5’RACE扩增未知序列 | 第38-41页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第41-57页 |
| 3．1 总RNA的产量和纯度 | 第41页 |
| 3．2 受SCN侵染诱导表达的差异cDNA序列的获得及PCR鉴定 | 第41-44页 |
| 3．3 cDNA差异片段的RDB（REVERSE DOT-BLOTTING）杂交鉴定 | 第44-45页 |
| 3．4 受SCN侵染诱导表达的cDNA差异片段的序列测定及同源性比较 | 第45-51页 |
| 3．5 5’RACE的PCR扩增结果 | 第51-52页 |
| 3．6 5’RACE的PCR扩增片段的序列分析 | 第52-54页 |
| 3．7 受SCN侵染诱导表达的cDNA片段“A32-523”的同源序列分析 | 第54-55页 |
| 3．8 A32-523序列的氨基酸一级结构及同源序列比较 | 第55-57页 |
| 第四部分 讨论 | 第57-63页 |
| 4．1 DDRT-PCR技术的应用与改进 | 第57-60页 |
| 4．1．1 实验材料的选择和处理 | 第57-58页 |
| 4．1．2 DDRT-PCR技术引物设计的改进 | 第58-59页 |
| 4．1．3 5’RACE的引物设计 | 第59页 |
| 4．1．4 差异cDNA的鉴定方法的改进 | 第59-60页 |
| 4．2 受SCN侵染诱导表达的cDNA序列的特点及应用前景 | 第60-63页 |
| 总 结 | 第63-64页 |
| 附 录 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
