| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 引言 | 第16-19页 |
| 1 项目来源 | 第16页 |
| 2 溃疡性结肠炎的概述 | 第16-17页 |
| 3 国内外研究状况及应用前景 | 第17-19页 |
| 第一部分 课题研究的主要内容 | 第19-21页 |
| 1 目的和意义 | 第19页 |
| 2 主要内容及技术路线 | 第19-21页 |
| 2.1 主要内容 | 第19-20页 |
| 2.2 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二部分 实验部分 | 第21-112页 |
| 第一章 葛根芩连结肠定位片指纹图谱的建立及有效成分定量研究 | 第21-60页 |
| 1 实验材料 | 第21-22页 |
| 1.1 仪器 | 第21页 |
| 1.2 试剂 | 第21页 |
| 1.3 样品 | 第21-22页 |
| 2 方法与结果 | 第22-58页 |
| 2.1 样品制剂的制备 | 第22-23页 |
| 2.1.1 葛根芩连结肠定位片的制备 | 第22-23页 |
| 2.1.2 阴性制剂的制备 | 第23页 |
| 2.2 色谱条件的选择 | 第23-29页 |
| 2.2.1 色谱柱的选择 | 第23-24页 |
| 2.2.2 流动相的选择 | 第24-25页 |
| 2.2.3 洗脱梯度的选择 | 第25-26页 |
| 2.2.4 检测波长的选择 | 第26-27页 |
| 2.2.5 流速的选择 | 第27页 |
| 2.2.6 柱温的选择 | 第27-28页 |
| 2.2.7 进样量的选择 | 第28-29页 |
| 2.2.8 图谱采集时间的确定 | 第29页 |
| 2.2.9 最终色谱条件的确定 | 第29页 |
| 2.3 供试品制备方法的选择 | 第29-32页 |
| 2.3.1 提取溶剂的选择 | 第29-30页 |
| 2.3.2 提取方法的选择 | 第30-31页 |
| 2.3.3 提取时间的选择 | 第31页 |
| 2.3.4 最终选定供试品制备方法 | 第31-32页 |
| 2.4 溶液的制备 | 第32-33页 |
| 2.4.1 对照品溶液的制备 | 第32页 |
| 2.4.2 供试品溶液的制备 | 第32-33页 |
| 2.5 方法学考察 | 第33-54页 |
| 2.5.1 系统适应性考察 | 第33-35页 |
| 2.5.2 参照峰的确定 | 第35-37页 |
| 2.5.3 线性关系考察 | 第37-41页 |
| 2.5.4 精密度试验 | 第41-44页 |
| 2.5.6 稳定性试验 | 第44-48页 |
| 2.5.7 重复性试验 | 第48-52页 |
| 2.5.8 加样回收率试验 | 第52-54页 |
| 2.6 葛根芩连结肠定位片指纹图谱的建立 | 第54-58页 |
| 2.6.1 指纹图谱分析 | 第54-56页 |
| 2.6.2 有效成分的含量测定 | 第56-58页 |
| 3 讨论与讨论 | 第58-60页 |
| 3.1 色谱条件的优化 | 第58页 |
| 3.2 供试品制备方法的选择 | 第58-59页 |
| 3.3 参照峰的选择 | 第59页 |
| 3.4 指纹图谱的建立 | 第59-60页 |
| 第二章 葛根芩连结肠定位片制剂与中间体、药材相关性研究 | 第60-64页 |
| 1 仪器与试药 | 第60页 |
| 2 方法与结果 | 第60-63页 |
| 2.1 供试品溶液的制备 | 第60-61页 |
| 2.1.1 全方制剂供试品溶液的制备 | 第60页 |
| 2.1.2 缺味阴性制剂供试品溶液的制备 | 第60页 |
| 2.1.3 单味药材供试品溶液的制备 | 第60页 |
| 2.1.4 中间体供试品溶液的制备 | 第60页 |
| 2.1.5 溶剂空白供试品溶液的制备 | 第60页 |
| 2.1.6 辅料空白供试品溶液的制备 | 第60-61页 |
| 2.2 HPLC指纹图谱研究 | 第61-63页 |
| 2.2.1 色谱条件 | 第61页 |
| 2.2.2 色谱图的采集 | 第61-63页 |
| 2.2.3 色谱峰的药材归属及中间体归属 | 第63页 |
| 3 结论与讨论 | 第63-64页 |
| 3.1 供试品的制备 | 第63页 |
| 3.2 色谱峰的归属 | 第63-64页 |
| 第三章 葛根芩连结肠定位片对湿热内蕴型溃疡性结肠炎家兔模型的干预作用研究 | 第64-83页 |
| 1 实验材料 | 第64-65页 |
| 1.1 实验动物 | 第64页 |
| 1.2 实验药物 | 第64页 |
| 1.3 实验试剂 | 第64页 |
| 1.4 实验仪器与设备 | 第64-65页 |
| 1.5 实验器材 | 第65页 |
| 2 实验方法 | 第65-70页 |
| 2.1 湿热内蕴型溃疡性结肠炎家兔模型制备 | 第65页 |
| 2.2 动物分组 | 第65页 |
| 2.3 给药方法 | 第65-67页 |
| 2.3.1 药物配制 | 第65-66页 |
| 2.3.2 灌胃方法 | 第66页 |
| 2.3.3 给药方案 | 第66-67页 |
| 2.4 一般临床观察 | 第67页 |
| 2.5 标本的采集 | 第67页 |
| 2.6 疾病活动度指数(DAI)评分标准 | 第67-68页 |
| 2.7 结肠长度测定 | 第68页 |
| 2.8 脾脏指数、胸腺指数和结肠指数测定 | 第68页 |
| 2.9 结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分标准 | 第68页 |
| 2.10 组织学损伤评估 | 第68-69页 |
| 2.11 结肠组织病理切片HE染色 | 第69-70页 |
| 2.11.1 组织取材及固定 | 第69页 |
| 2.11.2 组织脱水、透明、浸蜡及包埋 | 第69页 |
| 2.11.3 石蜡切片HE染色 | 第69-70页 |
| 2.12 统计分析 | 第70页 |
| 3 实验结果 | 第70-81页 |
| 3.1 动物一般情况观察 | 第70-72页 |
| 3.1.1 造模前 | 第70页 |
| 3.1.2 造模中 | 第70页 |
| 3.1.3 造模后 | 第70页 |
| 3.1.4 给药治疗14天 | 第70-72页 |
| 3.2 各组家兔体重的比较 | 第72-73页 |
| 3.3 各组家兔疾病活动度指数(DAI)的比较 | 第73-74页 |
| 3.4 各组家兔结肠长度的比较 | 第74-75页 |
| 3.5 各组家兔胸腺指数、脾脏指数及结肠指数的比较 | 第75-76页 |
| 3.6 各组家兔结肠黏膜损伤指数(CMDI)的比较 | 第76-77页 |
| 3.7 各组家兔结肠组织的病理学评分的比较 | 第77-81页 |
| 4 结论与讨论 | 第81-83页 |
| 4.1 实验动物模型的选择 | 第81页 |
| 4.2 葛根芩连结肠定位片治疗湿热内蕴型UC的优势 | 第81-83页 |
| 第四章 葛根芩连结肠定位片对湿热内蕴型溃疡性结肠炎家兔模型Th1/Th2平衡的影响 | 第83-100页 |
| 1 实验材料 | 第83-84页 |
| 1.1 实验动物 | 第83页 |
| 1.2 实验药物 | 第83页 |
| 1.3 实验试剂 | 第83页 |
| 1.4 实验仪器与设备 | 第83-84页 |
| 1.5 实验器材 | 第84页 |
| 2 实验方法 | 第84-87页 |
| 2.1 分组、造模、给药 | 第84页 |
| 2.2 标本的采集及处理 | 第84页 |
| 2.2.1 血清的采集 | 第84页 |
| 2.2.2 组织匀浆液的制备 | 第84页 |
| 2.3 ELISA方法检测血清及结肠组织中MPO和Th1/Th2细胞因子 | 第84-86页 |
| 2.3.1 ELISA方法检测血清及结肠组织中MPO | 第84-86页 |
| 2.3.2 ELISA方法检测血清及结肠组织中Th1细胞因子 | 第86页 |
| 2.3.3 ELISA方法检测血清及结肠组织中Th2细胞因子 | 第86页 |
| 2.4 统计分析 | 第86-87页 |
| 3 实验结果 | 第87-97页 |
| 3.1 血清及结肠组织中MPO含量的检测 | 第87-89页 |
| 3.2 血清及结肠组织中Th1细胞因子含量的检测 | 第89-93页 |
| 3.2.1 血清及结肠组织中IL-1β含量的检测 | 第89-91页 |
| 3.2.2 血清及结肠组织中TNF-α含量的检测 | 第91-93页 |
| 3.3 血清及结肠组织中Th2细胞因子含量的检测 | 第93-97页 |
| 3.3.1 血清及结肠组织中IL-4含量的检测 | 第93-95页 |
| 3.3.2 血清及结肠组织中IL-13含量的检测 | 第95-97页 |
| 4 讨论与结论 | 第97-100页 |
| 第五章 葛根芩连结肠定位片对湿热内蕴型溃疡性结肠炎家兔模型结肠黏膜PPAR-γ、NF-kBp65表达的影响 | 第100-112页 |
| 1 实验材料 | 第100-101页 |
| 1.1 实验动物 | 第100页 |
| 1.2 实验药物 | 第100页 |
| 1.3 实验试剂 | 第100页 |
| 1.4 实验仪器与设备 | 第100-101页 |
| 1.5 实验器材 | 第101页 |
| 2 实验方法 | 第101-104页 |
| 2.1 分组、造模、给药 | 第101页 |
| 2.2 溶液的配制 | 第101页 |
| 2.2.1 PBS溶液的配制 | 第101页 |
| 2.2.2 枸橼酸酸钠缓冲溶液的配制 | 第101页 |
| 2.3 标本的采集 | 第101页 |
| 2.4 标本的处理 | 第101-103页 |
| 2.4.1 样本包埋与固定 | 第101-102页 |
| 2.4.2 免疫组化染色 | 第102-103页 |
| 2.5 图像采集和分析 | 第103页 |
| 2.6 统计分析 | 第103-104页 |
| 3 实验结果 | 第104-110页 |
| 3.1 各组家兔结肠组织PPAR-γ蛋白定位表达 | 第104-107页 |
| 3.2 各组家兔结肠组织NF-kBp65蛋白定位表达 | 第107-110页 |
| 4 结论与讨论 | 第110-112页 |
| 总结与展望 | 第112-114页 |
| 1 研究主要成果 | 第112页 |
| 1.1 葛根芩连结肠定位片指纹图谱定性及定量分析 | 第112页 |
| 1.2 葛根芩连结肠定位片治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎药效学研究 | 第112页 |
| 2 特点与创新 | 第112-113页 |
| 3 存在问题及展望 | 第113-114页 |
| 3.1 葛根芩连结肠定位片指纹图谱分析 | 第113页 |
| 3.2 葛根芩连结肠定位片治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎药效学研究 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-117页 |
| 附录一 英文缩略词表 | 第117-118页 |
| 附录二 综述 | 第118-128页 |
| 1 葛根芩连汤概述 | 第118页 |
| 2 葛根芩连汤指纹图谱的研究进展 | 第118-121页 |
| 2.1 中药指纹图谱概述 | 第118页 |
| 2.2 葛根芩连汤指纹图谱的研究 | 第118-121页 |
| 2.2.1 葛根芩连汤HPLC指纹图谱 | 第118-120页 |
| 2.2.2 葛根芩连汤的HPCE指纹图谱 | 第120-121页 |
| 2.3 葛根芩连汤指纹图谱展望 | 第121页 |
| 3 葛根芩连汤治疗展溃疡性结肠炎的研究进 | 第121-126页 |
| 3.1 临床研究 | 第122-123页 |
| 3.2 实验研究 | 第123页 |
| 3.3 抗溃疡机制研究 | 第123-125页 |
| 3.4 葛根芩连汤治疗展溃疡性结肠炎展望 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-128页 |
| 附录三 HPLC色谱图 | 第128-149页 |
| 1 供试品制备方法的选择 | 第128-133页 |
| 1.1 提取溶剂的选择 | 第128-131页 |
| 1.2 提取方法的选择 | 第131-132页 |
| 1.3 提取时间的选择 | 第132-133页 |
| 2 方法学考察 | 第133-144页 |
| 2.1 线性关系考察 | 第133-135页 |
| 2.2 精密度实验 | 第135-137页 |
| 2.3 稳定性实验 | 第137-140页 |
| 2.4 重复性实验 | 第140-142页 |
| 2.5 加样回收率实验 | 第142-144页 |
| 3 指纹图谱的建立 | 第144-149页 |
| 附录四 致谢 | 第149-150页 |
| 附录五 个人简历 | 第150页 |
