| 第1章 前言 | 第9-24页 |
| 1.1 聚羟基脂肪酸酯(PHA)简介 | 第9-14页 |
| 1.1.1 PHA结构 | 第9-10页 |
| 1.1.2 PHA生物合成代谢途径以及相关基因 | 第10-13页 |
| 1.1.3 PHA应用领域 | 第13-14页 |
| 1.2 新型PHA-3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(PHBHHx) | 第14-19页 |
| 1.2.1 PHBHHx优秀的材料性能及生物相容性 | 第14-16页 |
| 1.2.2 PHBHHx生物合成与生产 | 第16-17页 |
| 1.2.3 嗜水气单胞菌生产PHBHHx研究现状及展望 | 第17-19页 |
| 1.3 透明颤菌血红蛋白基因及其在PHA生产中的应用 | 第19-22页 |
| 1.3.1 透明颤菌血红蛋白基因(vgb)简介 | 第19-20页 |
| 1.3.2 vgb基因在高密度发酵中的应用 | 第20-22页 |
| 1.4 论文的目的及意义 | 第22-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-38页 |
| 2.1 主要试剂、原料及仪器 | 第24-26页 |
| 2.1.1 主要试剂、原料 | 第24-25页 |
| 2.1.2 仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 菌种与质粒 | 第26页 |
| 2.3 细菌培养基及培养方法 | 第26-28页 |
| 2.3.1 种子培养 | 第26-27页 |
| 2.3.2 摇瓶培养 | 第27-28页 |
| 2.3.3 发酵罐培养 | 第28页 |
| 2.4 理化分析 | 第28-30页 |
| 2.4.1 细胞干重分析 | 第28页 |
| 2.4.2 PHBHHx含量及单体组成分析 | 第28-29页 |
| 2.4.3 氮及磷含量分析 | 第29-30页 |
| 2.5 透明颤菌血红蛋白酶活测定 | 第30-32页 |
| 2.6 分子生物学实验操作 | 第32-38页 |
| 2.6.1 质粒的快速提取 | 第32-33页 |
| 2.6.2 DNA片断的酶切、回收及凝胶电泳 | 第33-34页 |
| 2.6.3 目的片断的PCR扩增 | 第34-35页 |
| 2.6.4 载体与目的片断的连接 | 第35页 |
| 2.6.5 大肠杆菌感受态的制备 | 第35-36页 |
| 2.6.6 电转化方法及接合方法引入外源质粒 | 第36-37页 |
| 2.6.7 质粒稳定性的测量 | 第37-38页 |
| 第3章 结果及讨论 | 第38-62页 |
| 3.1 培养基中添加丁醇改变嗜水气单胞菌合成PHBHHx的单体组成 | 第38-41页 |
| 3.2 单体可控PHBHHx的生物合成 | 第41-49页 |
| 3.2.1 含有phbA、phbB基因的质粒pTG01的构建 | 第42-43页 |
| 3.2.2 重组Aeromonas hydrophila 4AK4 (pTG01)的构建 | 第43页 |
| 3.2.3 Aeromonas hydrophila 4AK4 (pTG01)摇瓶实验 | 第43-44页 |
| 3.2.4 Aeromonas hydrophila 4AK4 (pTG01)的发酵罐实验 | 第44-47页 |
| 3.2.5 限磷对Aeromonas hydrophila 4AK4 (pTG01)合成PHBHHx的影响 | 第47-49页 |
| 3.3 高密度培养生产PHBHHx研究 | 第49-62页 |
| 3.3.1 含有phbA、phbB及vgb基因的质粒pVGAB的构建 | 第49-50页 |
| 3.3.2 重组Aeromonas hydrophila 4AK4 (pVGAB)的构建 | 第50-51页 |
| 3.3.3 vgb基因在重组Aeromonas hydrophila 4AK4 (pVGAB)中成功表达 | 第51页 |
| 3.3.4 优化摇瓶培养基及培养方法提高vgb的表达 | 第51-55页 |
| 3.3.5 vgb的表达促进细菌生长及PHBHHx合成 | 第55-58页 |
| 3.3.6 vgb的表达提高了质粒的稳定性 | 第58-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢、声明 | 第71-72页 |
| 个人简历、在学期间的研究成果及发表的学术论文 | 第72页 |
