摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 绪论 | 第9-17页 |
1.1 食源性致病菌概述 | 第9-10页 |
1.2 食源性致病菌检测技术现状 | 第10-11页 |
1.2.1 平板计数法 | 第10页 |
1.2.2 免疫学检测技术 | 第10页 |
1.2.3 分子生物学检测技术 | 第10-11页 |
1.2.4 生物传感检测技术 | 第11页 |
1.3 核酸适配体技术 | 第11-12页 |
1.3.1 核酸适配体概述 | 第11-12页 |
1.3.2 核酸适配体在食源性致病菌检测领域的应用 | 第12页 |
1.4 时间分辨荧光分析技术 | 第12-15页 |
1.4.1 时间分辨荧光分析技术原理 | 第12-13页 |
1.4.2 时间分辨荧光分析技术在食品领域的应用 | 第13页 |
1.4.3 传统时间分辨荧光探针 | 第13-14页 |
1.4.4 新型时间分辨荧光纳米探针 | 第14-15页 |
1.5 本研究中其他相关纳米材料 | 第15页 |
1.5.1 磁性纳米材料 | 第15页 |
1.5.2 二硫化钨纳米材料 | 第15页 |
1.6 本课题的立题意义和研究内容 | 第15-17页 |
2 实验材料和方法 | 第17-26页 |
2.1 实验材料与设备 | 第17-18页 |
2.1.1 主要材料与试剂 | 第17页 |
2.1.2 主要设备与仪器 | 第17-18页 |
2.2 基于时间分辨荧光共振能量转移检测鼠伤寒沙门氏菌的方法研究 | 第18-21页 |
2.2.1 检测原理 | 第18-19页 |
2.2.2 时间分辨荧光纳米材料NaYF_4: Ce/Tb的制备 | 第19页 |
2.2.3 亲和素修饰NaYF_4: Ce/Tb纳米材料的制备 | 第19-20页 |
2.2.4 适配体功能化的NaYF_4: Ce/Tb纳米材料的制备 | 第20页 |
2.2.5 菌种活化与处理 | 第20页 |
2.2.6 基于TR-FRET的均相分析法检测鼠伤寒沙门氏菌 | 第20页 |
2.2.7 鸡蛋样品中鼠伤寒沙门氏菌的检测 | 第20-21页 |
2.3 基于双色时间分辨荧光标记-磁分离适配体识别同时检测鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法研究 | 第21-23页 |
2.3.1 检测原理 | 第21-22页 |
2.3.2 两种时间分辨荧光纳米材料的制备 | 第22页 |
2.3.3 氨基化Fe_3O_4磁性纳米材料的制备 | 第22页 |
2.3.4 亲和素修饰时间分辨荧光纳米材料和磁性纳米材料的制备 | 第22页 |
2.3.5 适配体功能化的时间分辨荧光纳米材料和磁性纳米材料的制备 | 第22页 |
2.3.6 菌种活化与处理 | 第22-23页 |
2.3.7 鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的同时检测 | 第23页 |
2.3.8 牛奶样品检测 | 第23页 |
2.4 基于双色时间分辨荧光纳米材料与二硫化钨荧光共振能量转移同时检测鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法研究 | 第23-26页 |
2.4.1 检测原理 | 第23-24页 |
2.4.2 两种时间分辨荧光纳米材料的制备 | 第24页 |
2.4.3 适配体功能化的时间分辨荧光纳米材料的制备 | 第24页 |
2.4.4 菌种活化与处理 | 第24页 |
2.4.5 鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的同时检测 | 第24-25页 |
2.4.6 牛奶样品检测 | 第25-26页 |
3 结果与讨论 | 第26-46页 |
3.1 基于时间分辨荧光共振能量转移检测鼠伤寒沙门氏菌的方法研究 | 第26-33页 |
3.1.1 时间分辨荧光纳米材料NaYF_4: Ce/Tb的表征 | 第26-27页 |
3.1.2 时间分辨荧光纳米材料与亲和素连接的表征 | 第27-28页 |
3.1.3 时间分辨荧光纳米材料连接适配体的表征 | 第28-29页 |
3.1.4 FAM-cDNA的用量优化 | 第29-30页 |
3.1.5 孵育时间的优化 | 第30-31页 |
3.1.7 鼠伤寒沙门氏菌的检测 | 第31-32页 |
3.1.8 特异性研究 | 第32-33页 |
3.1.9 实际样品检测 | 第33页 |
3.2 基于双色时间分辨荧光标记-磁分离适配体识别同时检测鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法研究 | 第33-40页 |
3.2.1 两种时间分辨荧光纳米材料的表征 | 第33-35页 |
3.2.2 磁性纳米材料的表征 | 第35-36页 |
3.2.3 时间分辨荧光纳米材料和磁性纳米材料连接亲和素的表征 | 第36页 |
3.2.4 时间分辨荧光纳米材料和磁性纳米材料连接适配体的表征 | 第36-37页 |
3.2.5 反应条件优化 | 第37-38页 |
3.2.6 鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的同时检测 | 第38-39页 |
3.2.7 特异性研究 | 第39-40页 |
3.2.8 实际样品检测 | 第40页 |
3.3 基于双色时间分辨荧光纳米材料与二硫化钨荧光共振能量转移同时检测鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法研究 | 第40-46页 |
3.3.1 WS_2的表征 | 第40-41页 |
3.3.2 时间分辨荧光纳米材料连接适配体的表征 | 第41页 |
3.3.3 WS_2用量的优化 | 第41-42页 |
3.3.4 WS_2孵育时间优化 | 第42-43页 |
3.3.5 检测体系验证 | 第43-44页 |
3.3.6 鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的同时检测 | 第44-45页 |
3.3.7 特异性研究 | 第45页 |
3.3.8 牛奶样品的检测 | 第45-46页 |
主要结论与展望 | 第46-48页 |
主要结论 | 第46-47页 |
展望 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56页 |