致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
目录 | 第12-16页 |
第一章 文献综述及研究背景 | 第16-32页 |
前言 | 第16页 |
1.1 植物细胞信号转导 | 第16-17页 |
1.2 MAPK级联途径的基本组成 | 第17页 |
1.3 植物MAPK的分类 | 第17-19页 |
1.4 MAPK级联反应的激发子 | 第19-20页 |
1.4.1 Hapin | 第19页 |
1.4.2 鞭毛蛋白(Flagellin) | 第19-20页 |
1.5 MAPK级联途径的信号传导机制 | 第20-21页 |
1.5.1 搭架过程 | 第20-21页 |
1.5.2 锚定反应 | 第21页 |
1.6 植物MAPK级联途径的功能 | 第21-31页 |
1.6.1 MAPK级联途径参与调控生物胁迫 | 第21-22页 |
1.6.2 MAPK级联途径参与调控非生物胁迫 | 第22-24页 |
1.6.2.1 MAPK级联途径在干旱胁迫中的功能 | 第22页 |
1.6.2.2 MAPK级联途径在盐胁迫中的功能 | 第22-23页 |
1.6.2.3 MAPK级联途径在温度胁迫中的功能 | 第23页 |
1.6.2.4 MAPK级联途径在机械损伤中的功能 | 第23-24页 |
1.6.3 MAPK级联途径在活性氧(ROS)信号传导中的功能 | 第24页 |
1.6.4 MAPK级联途径在Ca~(2+)信号传导中的功能 | 第24-25页 |
1.6.5 MAPK级联途径参与植物激素信号转导 | 第25-27页 |
1.6.5.1 MAPK级联途径在ABA信号传导中的功能 | 第25-26页 |
1.6.5.2 MAPK级联途径在乙烯信号传导中的功能 | 第26页 |
1.6.5.3 MAPK级联途径在生长素信号传导中的功能 | 第26-27页 |
1.6.6 MAPK级联途径调控植物生长发育 | 第27-28页 |
1.6.6.1 MAPK级联途径调控胞质分裂 | 第27页 |
1.6.6.2 MAPK级联途径调控气孔发育与运动 | 第27-28页 |
1.6.6.3 MAPK级联途径调控植物衰老过程 | 第28页 |
1.6.7 MAPK级联途径在植物免疫响应中的功能 | 第28-31页 |
1.6.7.1 MAPK级联反应参与PTI抗病反应 | 第29-30页 |
1.6.7.2 MAPK级联反应参与ETI抗病反应 | 第30-31页 |
1.7 本研究的目的意义及主要内容 | 第31-32页 |
1.7.1 研究的目的与意义 | 第31页 |
1.7.2 研究的主要内容 | 第31-32页 |
第二章 材料与方法 | 第32-40页 |
2.1 试验材料 | 第32-34页 |
2.1.1 植物材料 | 第32页 |
2.1.2 植物材料处理 | 第32页 |
2.1.3 菌株和载体 | 第32页 |
2.1.4 酶及各种生化试剂 | 第32页 |
2.1.5 PCR引物(见附表) | 第32页 |
2.1.6 生物信息学软件及网络资源 | 第32-34页 |
2.2 试验方法 | 第34-40页 |
2.2.1 MAPK、MAPKK家族基因的鉴定和命名 | 第34页 |
2.2.2 多重氨基酸序列比对、系统进化树构建及保守结构域分析 | 第34页 |
2.2.3 植物总RNA的提取 | 第34-35页 |
2.2.4 反转录合成cDNA | 第35页 |
2.2.5 基因克隆的鉴定 | 第35页 |
2.2.6 荧光定量PCR表达分析 | 第35-36页 |
2.2.7 采集西瓜各组织样品 | 第36页 |
2.2.8 外源信号分子诱导处理 | 第36页 |
2.2.9 pGADT7-Rec、pGBKT7-Bait载体的构建 | 第36页 |
2.2.10 酵母共转化 | 第36-37页 |
2.2.11 GFP过表达载体的构建 | 第37页 |
2.2.12 本氏烟瞬时表达体系的构建 | 第37-38页 |
2.2.13 亚细胞定位 | 第38页 |
2.2.14 灰霉菌的培养及接种 | 第38页 |
2.2.15 病斑大小统计 | 第38页 |
2.2.16 菌量测定 | 第38页 |
2.2.17 台酚蓝染色、DAB和NBT染色 | 第38-39页 |
2.2.18 西瓜枯萎菌的培养及接种 | 第39-40页 |
第三章 西瓜MAPK、MAPKK家族基因的鉴定、表达模式分析、蛋白互作及抗病功能研究 | 第40-78页 |
3.1 西瓜MAPK和MAPKK家族基因的鉴定和生物信息学分析 | 第40-50页 |
3.1.1 基因的克隆和鉴定 | 第40-42页 |
3.1.2 西瓜MAPK家族成员的序列分析 | 第42-43页 |
3.1.3 西瓜MAPK家族成员的系统进化树构建及保守结构域分析 | 第43-46页 |
3.1.4 西瓜MAPKK家族成员的序列分析 | 第46-47页 |
3.1.5 西瓜MAPKK家族成员的系统进化树构建及保守结构域分析 | 第47-49页 |
3.1.6 西瓜ClMPKs和ClMKKs在染色体上的分布 | 第49-50页 |
3.2 西瓜MAPK和MAPKK家族基因的表达模式分析 | 第50-65页 |
3.2.1 组织特异性表达分析 | 第50-52页 |
3.2.2 逆境胁迫下的表达分析 | 第52-60页 |
3.2.2.1 干旱胁迫下的表达 | 第52-54页 |
3.2.2.2 高盐胁迫下的表达 | 第54-56页 |
3.2.2.3 低温胁迫下的表达 | 第56-58页 |
3.2.2.4 高温胁迫下的表达 | 第58-60页 |
3.2.3 激素诱导下的表达分析 | 第60-62页 |
3.2.4 西瓜枯萎菌侵染后的表达分析 | 第62-65页 |
3.3 西瓜MAPK和MAPKK家族成员间的蛋白互作分析 | 第65-67页 |
3.4 西瓜MAPK和MAPKK家族蛋白的亚细胞定位 | 第67-68页 |
3.5 西瓜MAPK和MAPKK家族基因的抗病功能分析 | 第68-78页 |
3.5.1 ClMPK7瞬时表达引起过敏性反应 | 第68-71页 |
3.5.2 接种灰霉菌B.cinerea前ClMPKs/ClMKKs基因的表达量分析 | 第71-72页 |
3.5.3 接种灰霉菌B.cinerea后的病害表型及发病统计 | 第72-75页 |
3.5.4 5个ClMPKs/ClMKKs基因的抗病机理分析 | 第75-78页 |
第四章 小结与讨论 | 第78-82页 |
参考文献 | 第82-98页 |
附表 本文引物序列 | 第98-103页 |