摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
常用缩略语中英文对照表 | 第11-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-20页 |
1 研究背景 | 第12页 |
2 卵泡的发育 | 第12-14页 |
2.1 原始卵泡库的建立 | 第13页 |
2.2 卵泡的募集 | 第13-14页 |
2.3 优势卵泡的选择与优势化 | 第14页 |
2.4 卵泡的成熟排卵 | 第14页 |
2.5 卵泡闭锁与退化 | 第14页 |
3 卵母细胞与颗粒细胞间连接 | 第14-16页 |
3.1 颗粒细胞 | 第15页 |
3.2 细胞桥梁或缝隙连接 | 第15-16页 |
4 自分泌和旁分泌调节因子 | 第16-17页 |
5 诱导发育卵泡中相关基因的研究状况 | 第17-19页 |
5.1 AMH 基因 | 第17-18页 |
5.2 FSHR 基因 | 第18页 |
5.3 LHR 基因 | 第18-19页 |
6 多种剪接形式的介绍 | 第19页 |
7 本研究目的和意义 | 第19-20页 |
第二部分 实验研究 | 第20-51页 |
第一章 绵羊 AMH 基因的克隆、序列分析与原核表达 | 第20-27页 |
1 材料与方法 | 第20-22页 |
1.1 材料 | 第20-21页 |
1.2 方法 | 第21-22页 |
1.2.1 总 RNA 的提取及 cDNA 第一链合成 | 第21页 |
1.2.2 基因克隆及测序 | 第21页 |
1.2.3 生物信息学分析 | 第21-22页 |
1.2.4 原核表达载体的构建及诱导表达 | 第22页 |
2 结果与分析 | 第22-25页 |
2.1 绵羊 AMH 基因扩增与序列分析 | 第22-23页 |
2.2 绵羊 AMH 氨基酸序列分析 | 第23-25页 |
2.3 融合蛋白在大肠杆菌中表达及鉴定 | 第25页 |
3 讨论 | 第25-27页 |
第二章 绵羔羊卵巢 AMH 的免疫组织化学分析 | 第27-34页 |
1 材料与方法 | 第27-28页 |
1.1 材料 | 第27页 |
1.2 方法 | 第27-28页 |
1.2.1 AMH 的免疫组化 | 第27-28页 |
1.2.2 卵丘细胞的收集 | 第28页 |
1.2.3 RT-PCR | 第28页 |
1.2.4 统计分析 | 第28页 |
2 结果与分析 | 第28-31页 |
2.1 激素诱导羔羊卵泡超数发育卵巢结构 | 第28-29页 |
2.2 绵羊卵巢中 AMH 的表达分布 | 第29-30页 |
2.3 体外培养 AMH 基因表达定量分析结果 | 第30-31页 |
3 讨论 | 第31-34页 |
第三章 FSHR 在绵羊卵巢中的表达特征分析及多种剪接形式鉴定 | 第34-47页 |
1 材料与方法 | 第35-36页 |
1.1 材料 | 第35页 |
1.2 方法 | 第35-36页 |
1.2.1 FSHR 的免疫组化 | 第35页 |
1.2.2 卵丘细胞的收集 | 第35页 |
1.2.3 提取总 RNA | 第35页 |
1.2.4 引物的设计及 PCR 反应 | 第35页 |
1.2.5 克隆 | 第35页 |
1.2.6 RT-PCR | 第35-36页 |
1.2.7 统计分析 | 第36页 |
2 结果与分析 | 第36-45页 |
2.1 绵羊 FSHR 基因扩增与序列分析 | 第36页 |
2.2 绵羊 FSHR 基因序列分析的模式图 | 第36-43页 |
2.3 绵羊卵巢 FSHR Western blot 鉴定 | 第43页 |
2.4 绵羔羊卵巢中 FSHR 的表达分布 | 第43-44页 |
2.5 绵羔羊卵巢定量结果 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
第四章 绵羔羊卵巢中 LHR 免疫组织化学分析 | 第47-51页 |
1 材料与方法 | 第47-48页 |
1.1 材料 | 第47页 |
1.1.1 绵羊卵巢 | 第47页 |
1.1.2 卵丘细胞的收集 | 第47页 |
1.2 方法 | 第47-48页 |
1.2.1 Western blot 检测蛋白 | 第47-48页 |
1.2.2 免疫组织化学染色 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-49页 |
2.1 Western blot 检测蛋白 | 第48页 |
2.2 免疫组化 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
全文结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65页 |