| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| 1.1 亮氨酸简介 | 第10-11页 |
| 1.2 胎盘及滋养层细胞的功能 | 第11-12页 |
| 1.3 胎盘内氨基酸转运 | 第12-14页 |
| 1.4 mTOR信号通路 | 第14-15页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第16页 |
| 2.2 试剂与用品 | 第16-18页 |
| 2.2.1 试剂 | 第16-17页 |
| 2.2.2 主要实验耗材 | 第17页 |
| 2.2.3 试剂配制 | 第17页 |
| 2.2.4 试验用品的清洗与消毒 | 第17-18页 |
| 2.3 细胞模型 | 第18页 |
| 2.4 试验方法 | 第18-25页 |
| 2.4.1 pTr细胞的培养 | 第18页 |
| 2.4.2 pTr细胞的传代 | 第18-19页 |
| 2.4.3 pTr细胞的冻存与复苏 | 第19页 |
| 2.4.4 pTr细胞接种及试验处理 | 第19-20页 |
| 2.4.5 pTr细胞生长期曲线绘制 | 第20页 |
| 2.4.6 亮氨酸对pTr细胞增殖能力的影响 | 第20页 |
| 2.4.7 细胞增殖周期检测 | 第20-21页 |
| 2.4.8 总RNA抽提 | 第21-23页 |
| 2.4.9 引物设计及合成 | 第23-24页 |
| 2.4.10 实时荧光定量 PCR | 第24-25页 |
| 2.4.11 实时荧光定量 PCR 数据处理 | 第25页 |
| 2.5 数据统计分析 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-34页 |
| 3.1 总RNA样品的质量检测 | 第26页 |
| 3.2 pTr细胞形态学观察 | 第26页 |
| 3.3 pTr细胞的生长曲线 | 第26-27页 |
| 3.4 亮氨酸对pTr细胞增殖的影响 | 第27-28页 |
| 3.5 亮氨酸对pTr细胞增殖周期分布及相关基因CDK4表达的影响 | 第28-29页 |
| 3.6 亮氨酸对pTr细胞凋亡相关基因Caspase-8 表达的影响 | 第29-30页 |
| 3.7 亮氨酸对pTr细胞mTOR信号通路表达的影响 | 第30-32页 |
| 3.8 亮氨酸对pTr细胞氨基酸转运载体表达的影响 | 第32-34页 |
| 4 讨论 | 第34-40页 |
| 4.1 细胞生长曲线 | 第34页 |
| 4.2 亮氨酸对pTr细胞增殖的影响 | 第34-35页 |
| 4.3 亮氨酸对pTr细胞周期分布及相关基因CDK4表达的影响 | 第35页 |
| 4.4 亮氨酸对pTr细胞凋亡相关基因Caspase-8 表达的影响 | 第35-36页 |
| 4.5 亮氨酸通过mTOR信号通路对pTr细胞氨基酸转运载体表达的影响 | 第36-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 附录 | 第49-51页 |
